导读:本文包含了电转染论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:转染,干细胞,细胞,效率,组织,工程,肿瘤。
电转染论文文献综述
邓晓芬,杨晓佳,易天红,冯英,柯潇[1]（2019）在《融合蛋白基因与抗体基因电转染CHO-S细胞的条件摸索优化》一文中研究指出旨在对编码融合蛋白和抗体的重组质粒转染CHO-S细胞的转染条件进行摸索优化,提高外源基因的转染效率,从而增加外源蛋白的表达。应用Amaxa Nucleofector-II电转仪,从电转染程序、质粒用量及细胞用量叁方面着手,最终发现编码融合蛋白的重组质粒的最佳电转条件为:电转程序U-030,质粒用量20μg/孔,细胞用量1×10~7个/孔;编码抗体的重组质粒的最佳电转条件为:电转程序U-024,质粒用量15μg/孔,细胞用量1×10~7个/孔;实验结果进一步显示抗体重组质粒电转染CHO-S细胞的效果要优于融合蛋白重组质粒,利用高通量细胞筛选仪Clone Pix对转染后重组细胞的阳性克隆数进行统计,证实了该抗体重组质粒的转染效率更高。这为以后的抗体及融合蛋白重组质粒电转染CHO-S细胞提供了一定的数据支持,同时提示不同类型的细胞及外源基因,都需要设计相应的电转染实验进行条件优化,进而为获得高产稳定的生产用细胞株奠定基础。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年04期）
侯海涛,吕金阳,张志强,陆颖,周翠萍[2]（2018）在《一种优化的成年斑马鱼视网膜吗啡啉电转染方法》一文中研究指出通过吗啡啉(morpholino,MO)电转染敲降斑马鱼视网膜内目标基因表达是研究基因功能的有效手段,但现有方法存在局限性。本文旨在发展一种优化的成年斑马鱼视网膜MO电转染方法。优化要点是在电极内侧涂抹超声凝胶,并使用方形电极而不是圆形电极。结果显示,使用超声凝胶可有效减少电转染所致视网膜损伤并简化实验步骤,采用方形电极显着提高了MO电转染效率。用本方法敲降视网膜再生相关基因Ascl1a显着抑制了视网膜祖细胞的生成。本方法是对现有MO电转染方法的优化。(本文来源于《生理学报》期刊2018年01期）
李计来,崔文禹,刘敬,郝少杰,徐静[3]（2017）在《CHO DG44细胞电转染条件的优化》一文中研究指出目的优化CHO DG44细胞的电转染条件,提高细胞的转染效率。方法采用电转染的方法将p EGFP-1质粒转入CHO DG44细胞内,利用L9(33)正交试验设计,对质粒量、电压和电容3因素进行优化,流式细胞仪检测不同条件下的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)阳性率和GFP的平均荧光强度,台盼蓝染色对细胞进行计数,了解细胞生长情况。结果 3个因素中,电压对转染效率影响最大,其次为电容,质粒浓度影响最小。质粒量8μg、电压300 V、电容900μF为最佳电转染条件。结论优化了CHO DG44细胞的电转染条件,为外源基因转染CHO DG44细胞表达重组蛋白提供了基础数据。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2017年11期）
加叁叁,胡俊,李美宁,张凯丽,刘志贞[4]（2017）在《慢病毒转染和电转染原代C57BL/6小鼠神经干细胞的比较》一文中研究指出目的比较慢病毒与电转染两种技术转染小鼠原代神经干细胞的优劣,获得神经干细胞高效转染的方法。方法从C57BL/6小鼠脑组织中提取神经干细胞,进行原代培养;分别进行慢病毒转染和电转染,通过观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达,比较两种转染方法的转染效果,并用噻唑蓝(MTT)法计算相对存活率,比较两种方法转染后对细胞的影响。结果慢病毒与电转染两种转染技术转染神经干细胞48 h后,慢病毒的转染率为(77.6±6.6)%,高于电转染法转染率([29.2±4.8)%],两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);转染72 h后,慢病毒转染的细胞荧光表达量为(60.0±3.6)%,电转染细胞的荧光表达量仅剩(12.8±2.4)%;MTT法结果显示,电转染组细胞相对存活率为(75.8±2.3)%,慢病毒转染组细胞相对存活率为(70.1±1.4)%,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于原代神经干细胞转染,慢病毒转染法比电转染法具有更高的转染效率及长久稳定性,转染后细胞存活率与电转染法接近,因此慢病毒转染法更能满足研究者的需求。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2017年06期）
李鹏辉,费洪新,王立红,许惠玉,张海燕[5]（2017）在《构建PDCD5基因真核表达载体及电转染BGC823细胞的研究》一文中研究指出目的构建PDCD5基因真核表达载体,并电转染BGC823细胞,获得稳定转染细胞。方法设计合成PDCD5基因片段,将其插入经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pcDNA3.1~+表达载体,菌落PCR和基因测序进行鉴定。重组质粒电转染BGC823细胞,G418筛选数周后PCR鉴定稳定转染细胞。结果重组质粒经菌落PCR测序分析表明,PDCD5基因序列准确插入预期位置,且序列正确。重组质粒成功电转染BGC823细胞,并整合入细胞基因组DNA。结论成功构建了PDCD5基因真核表达载体,并整合进BGC823细胞基因组,为研究PDCD5基因的功能及胃癌的基因治疗提供实验基础。(本文来源于《中国现代医生》期刊2017年06期）
王俊,王建中[6]（2016）在《沉默ABCE1基因电转染卵巢癌肿瘤干细胞对β-榄香烯乳的敏感性》一文中研究指出背景:对肿瘤干细胞相关基因ABCE1的深入研究有可能会发现它在参与恶性肿瘤的发生及进展等方面的重要作用。目的:观察沉默ABCE1基因电转染卵巢癌肿瘤干细胞的增殖特性及对β-榄香烯乳的敏感性。方法:设计合成ABCE1的siR NA序列,通过电转染入卵巢癌肿瘤干细胞。RT-PCR和Western blot检测ABCE1基因沉默后卵巢癌肿瘤干细胞ABCE1 m RNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期变化,MTT法和细胞克隆形成实验分析ABCE1基因沉默后卵巢癌肿瘤干细胞对β-榄香烯乳的敏感性。结果与结论:(1)ABCE1基因沉默后卵巢癌肿瘤干细胞的ABCE1基因和蛋白表达明显降低;(2)ABCE1基因沉默后细胞周期被阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少;(3)ABCE1基因沉默后β-榄香烯乳对卵巢癌肿瘤干细胞的增殖抑制率和克隆形成抑制率显着增加;(4)结果表明,沉默ABCE1基因能显着抑制卵巢癌肿瘤干细胞的增殖能力,并能增强肿瘤干细胞对β-榄香烯乳的敏感性。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年28期）
卢莎,谭文杰,张玲,邓瑶,陶格斯[7]（2016）在《脂质体转染法与电转染法在丙型肝炎病毒RNA转染人肝癌细胞中的应用效果比较》一文中研究指出目的比较脂质体转染法与电转染法在丙型肝炎病毒(HCV)RNA转染人肝癌细胞中的应用效果。方法培养人肝癌细胞Huh7.5-CD81并分为A、B组及对照组。A组采用电转染质粒p Hebei(E1E2)/JFH1来源的HCV RNA;B组采用脂质体转染质粒p Hebei(E1E2)/JFH1来源的HCV RNA;对照组采用脂质体转染复制缺陷质粒p JFH1/GND转录获得的HCV RNA。光学显微镜下观察各组转染后细胞形态,采用免疫荧光法(IFA)检测叁组转染效率,real-time PCR法检测叁组细胞培养液上清中的HCV RNA,采用TCID50法检测A、B组细胞培养液上清中的丙型肝炎病毒(HCVcc)感染滴度。结果 A组转染使用细胞数为1×10~6,转染后第2天细胞损伤过半,边缘毛糙;B组转染使用细胞数为2×105,转染后第2天细胞基本无损伤。A组转染效率为9.98%±0.83%,B组转染效率为2.58%±0.39%,两组转染效率相比,P<0.01;对照组未检出荧光阳性细胞。A、B组转染后细胞培养液上清中HCV RNA拷贝数均呈现先下降后升高的趋势,最终稳定于106copies/m L。A组转染后21 d、B组转染后31 d方能检测到HCV感染滴度,A、B组收获HCV最高感染滴度均为104ffu/m L。结论脂质体转染和电转染两种方法均可建立嵌合HCV的人肝癌细胞培养体系,脂质体转染法对细胞的损伤较小,电转染法转染效率较高、收获HCVcc的时间较短,但两种方法收获的HCVcc感染滴度无明显差异。(本文来源于《山东医药》期刊2016年19期）
彭义,曲家富,曹立海,赵国志,杜晓健[8]（2016）在《人端粒酶反转录酶基因电转染优化培养大鼠前软骨干细胞》一文中研究指出背景:将人端粒酶反转录酶转染至目的细胞中,可以提高其端粒酶活性,保持端粒的长度,在调控增殖和分化方面有重要作用。目的:探讨人端粒酶反转录酶基因转染对体外培养大鼠前软骨干细胞端粒酶活性及生物学特性的影响。方法:体外培养Wistar大鼠前软骨干细胞,以反转录病毒PLXSN为载体介导人端粒酶反转录酶基因转染,同时设置对照组、阴性对照序列组、转染组。用TRAP-ELISA法检测前软骨干细胞端粒酶活性,RT-PCR、Western blot检测前软骨干细胞人端粒酶反转录酶基因和蛋白的表达,CCK-8法、细胞生长曲线检测细胞生长增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期分布的变化。结果与结论:(1)人端粒酶反转录酶基因转染前软骨干细胞48 h,端粒酶活性明显升高;(2)与对照组、阴性对照序列组相比,转染组人端粒酶反转录酶基因和蛋白水平表达明显,细胞的生长速度明显增快,G0/G1期细胞数减少,S期细胞数增多,差异有显着性意义(P<0.05);(3)结果表明,以反转录病毒PLXSN为载体介导人端粒酶反转录酶基因转染使前软骨干细胞端粒酶活性明显升高,能够促进大鼠前软骨干细胞增殖。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年14期）
付建茹[9]（2015）在《端粒酶反转录酶基因电转染人羊膜间充质干细胞移植治疗糖尿病》一文中研究指出背景:羊膜是胎儿出生后的废弃物,羊膜间充质干细胞具有取材方便、增殖能力强、无伦理学争议、免疫原性低等优势。目的:通过端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,h TERT)基因电转染人羊膜间充质干细胞移植到大鼠糖尿病模型,探讨其对糖尿病大鼠的疗效。方法:分离培养人羊膜间充质干细胞,经h TERT基因电转染羊膜间充质干细胞,从50只SD大鼠中随机取10只作为对照组,剩余40只按45 mg/kg的剂量注射链脲霉素,建立糖尿病模型后,将建模成功的36只SD大鼠随机分为糖尿病组、人羊膜间充质干细胞移植组和h TERT-人羊膜间充质干细胞移植组,每组各12只;人羊膜间充质干细胞移植组和h TERT-人羊膜间充质干细胞移植组分别通过大鼠舌下静脉注射移植人羊膜间充质干细胞和经h TERT基因电转染羊膜间充质干细胞。移植后各组进行动态血糖水平监测,于移植后每周检测各组大鼠血浆胰岛素的浓度,胰腺切片苏木精-伊红染色观察病理变化。结果与结论:移植后4周,与糖尿病组比较,人羊膜间充质干细胞移植组和h TERT-人羊膜间充质干细胞移植组血糖水平明显下降(P<0.05),尤其是h TERT-人羊膜间充质干细胞移植组的空腹血糖水平接近于对照组水平(P>0.05),而糖尿病组空腹血糖维持在较高水平;移植后6周,与糖尿病组比较,人羊膜间充质干细胞移植组和h TERT-人羊膜间充质干细胞移植组的血浆胰岛素含量增加(P<0.05),胰腺病损程度减轻(P<0.05),h TERT-人羊膜间充质干细胞移植组更明显(P<0.05)。结果证实,提示h TERT转染的羊膜间充质干细胞移植能明显降低糖尿病大鼠血糖和减轻胰岛损伤,可以有效治疗大鼠糖尿病。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年36期）
李炜杰,杨娇,王聪慧,罗健,周平[10]（2015）在《电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化》一文中研究指出【目的】采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率。【方法】利用Lonza 4D—Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率。【结果】通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案:L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×106个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率。(本文来源于《新疆农业科学》期刊2015年08期）
电转染论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过吗啡啉(morpholino,MO)电转染敲降斑马鱼视网膜内目标基因表达是研究基因功能的有效手段,但现有方法存在局限性。本文旨在发展一种优化的成年斑马鱼视网膜MO电转染方法。优化要点是在电极内侧涂抹超声凝胶,并使用方形电极而不是圆形电极。结果显示,使用超声凝胶可有效减少电转染所致视网膜损伤并简化实验步骤,采用方形电极显着提高了MO电转染效率。用本方法敲降视网膜再生相关基因Ascl1a显着抑制了视网膜祖细胞的生成。本方法是对现有MO电转染方法的优化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
电转染论文参考文献
[1].邓晓芬,杨晓佳,易天红,冯英,柯潇.融合蛋白基因与抗体基因电转染CHO-S细胞的条件摸索优化[J].生物技术通报.2019
[2].侯海涛,吕金阳,张志强,陆颖,周翠萍.一种优化的成年斑马鱼视网膜吗啡啉电转染方法[J].生理学报.2018
[3].李计来,崔文禹,刘敬,郝少杰,徐静.CHODG44细胞电转染条件的优化[J].中国生物制品学杂志.2017
[4].加叁叁,胡俊,李美宁,张凯丽,刘志贞.慢病毒转染和电转染原代C57BL/6小鼠神经干细胞的比较[J].中国现代医学杂志.2017
[5].李鹏辉,费洪新,王立红,许惠玉,张海燕.构建PDCD5基因真核表达载体及电转染BGC823细胞的研究[J].中国现代医生.2017
[6].王俊,王建中.沉默ABCE1基因电转染卵巢癌肿瘤干细胞对β-榄香烯乳的敏感性[J].中国组织工程研究.2016
[7].卢莎,谭文杰,张玲,邓瑶,陶格斯.脂质体转染法与电转染法在丙型肝炎病毒RNA转染人肝癌细胞中的应用效果比较[J].山东医药.2016
[8].彭义,曲家富,曹立海,赵国志,杜晓健.人端粒酶反转录酶基因电转染优化培养大鼠前软骨干细胞[J].中国组织工程研究.2016
[9].付建茹.端粒酶反转录酶基因电转染人羊膜间充质干细胞移植治疗糖尿病[J].中国组织工程研究.2015
[10].李炜杰,杨娇,王聪慧,罗健,周平.电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化[J].新疆农业科学.2015
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