木糖异构酶基因论文-赵建华,李浩霞,尹跃,王亚军,李彦龙

木糖异构酶基因论文-赵建华,李浩霞,尹跃,王亚军,李彦龙

导读:本文包含了木糖异构酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:枸杞,木糖异构酶,原核表达,多克隆抗体

木糖异构酶基因论文文献综述

赵建华,李浩霞,尹跃,王亚军,李彦龙[1](2019)在《枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备》一文中研究指出以‘宁杞1号’枸杞果实为材料,利用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,克隆出枸杞木糖异构酶基因(Lycium barbarum Linn. xylose isomerase,LbxylA)的全长,开放阅读框为1 446 bp,编码481个氨基酸,蛋白质分子质量为53.54 kDa,理论等电点5.37;对其进行生物信息学分析,发现LbxylA与烟草和马铃薯的木糖异构酶基因序列相似性较高,达到95%;构建重组质粒pGEX4T-1-LbxylA,转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行原核表达,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-Dthiogalactoside,IPTG)诱导培养,筛选出重组蛋白的适宜表达条件为:在18℃条件下100 μmol/L IPTG诱导10 h蛋白量最大,该蛋白为融合表达的且部分可溶;进一步纯化该蛋白并将获到的LbxylA融合蛋白为抗原,以日本大耳兔免疫制备Lbxyl A多克隆抗体,采用间接酶联免疫吸附测定法,测定抗体血清的效价高于1∶81 000;随着果实的发育,果实中LbxylA的相对表达量呈现逐渐下降的趋势,且在开花后9 d果实中LbxylA表达丰度最高;利用Western blot检测到LbxylA蛋白的变化与LbxylA相对表达量基本一致,但在开花后9 d果实中蛋白表达量低于开花后15 d,随后逐渐降低,果实成熟时两者的表达量到达最低。这表明枸杞果实发育前期LbxylA蛋白由于翻译后加工可能导致蛋白质表达滞后于基因,其结果有助于进一步研究LbxylA功能及其对果实糖积累的作用。(本文来源于《食品科学》期刊2019年10期)

彭博[2](2016)在《ASK10基因突变及敲除增强酿酒酵母木糖异构酶酶活机制的研究》一文中研究指出随着石油等化石燃料的日益枯竭以及人们环境保护意识的提升,作为可再生生物质能源的第二代燃料乙醇能源逐渐被人们所认可。与第一代燃料乙醇生产相比,第二代工业乙醇以各种农作物残渣为原料,除去了与人“争粮”的危害,并使这些纤维素原料得到较高的利用,减少了焚烧所造成的空气污染。酿酒酵母具有高糖和高乙醇耐受性,以及高乙醇发酵能力的优势,因而成为了燃料乙醇生产的首选菌株。然而天然的酿酒酵母菌株只能利用己糖进行发酵,而不能利用在纤维素原料中含量仅次于葡萄糖的木糖。因此葡萄糖和木糖在酿酒酵母中共发酵的研究对于第二代燃料乙醇的经济适用性尤为重要。课题组前期通过代谢工程改造和菌株的非理性进化获得了高效的木糖代谢酿酒酵母菌株。该菌株表达了低等真菌Piromyces s.来源的木糖异构酶基因(Pi-xylA),超表达内源木酮糖激酶基因以及非氧化磷酸戊糖途径的关键酶基因的改造以增加木糖代谢途径的流量;敲除GRE3基因减少木糖向木酮糖非特异性转化,敲除呼吸链中关键基因COX4,破坏菌株的呼吸链,去除呼吸作用对乙醇积累的影响。在此基础上,课题组通过长期在以木糖为唯一碳源的条件下对菌株进行非理性进化,获得了一株能够高效发酵木糖生产乙醇的酿酒酵母菌株,该菌株木糖异构酶酶活比进化前菌株显着提高。在更换了实验室自身发现的来自牛瘤胃宏基因组的木糖异构酶基因Ru-xylA(美国专利授权US 8586336B2)后,该菌株的木糖生长能力以及木糖异构酶的酶活与之前携带有其他木糖异构酶基因的菌株相似,但木糖异构酶活性提高的机理并未揭示。随后对该菌株进行了全基因组测序及进一步验证分析,发现8个纯合的SNPs位点和4个short InDels,但是各突变基因是否在提高菌株木糖代谢能力上发挥作用尚不清楚。本论文在前期工作的基础上,对12个突变基因进行敲除或超表达,分析对木糖代谢的影响。发现大部分基因对木糖代谢能力的提高没有正向作用。但是ASK10基因的突变和敲除,能够提高菌株在木糖上的生长能力以及木糖异构酶的酶活。研究发现该基因的敲除,能够通过提高质粒的拷贝数,提高木糖异构酶基因Ru-xylA的转录水平,从而提高木糖异构酶的酶活,使菌株的木糖代谢能力得到提高。但ASK10M475R突变基因虽然也使得木糖异构酶酶活增加,但并未影响质粒拷贝数。为进一步研究ASK10M475R突变基因提高木糖异构酶的原因,我们对携带有木糖异构酶途径ASK10M475R突变菌株及ask1O△菌株进行了转录组测序和分析,结合之前进化前后菌株的转录组数据,发现ASK10M475R突变可上调分子伴侣Hsp26p的表达,从而提高木糖异构酶的酶活,使菌株的木糖代谢能力得到提高。具体研究内容如下:1)驯化后菌株突变基因的敲除或超表达对木糖代谢影响的分析通过对驯化前后菌株的测序及后续的PCR重复验证,一共发现了 12个基因的突变,包括8个SNPs和4个short InDels。在仅引入Ru-xylA基因的原始菌株中对含有SNP的突变基因进行超表达,含有short InDel的基因进行敲除,通过葡萄糖和木糖上的点滴平板实验,发现大部分基因对木糖代谢能力的提高没有正向作用,但是只有ASK10基因的敲除及在敲除基础上超表达ASK10M475R能够提高菌株在木糖上的生长。进一步验证发现对ASK10基因在基因组上原位突变为ASK10M475R后同样能够提高酿酒酵母菌株在木糖上的生长,且在木糖上生长能力的提高是由于木糖异构酶活性的提高引起的。2)原位突变ASK10M475R功能分析Ask10p的功能主要是作为调控因子参与多种胁迫响应,如氧化胁迫等。为了验证ASK10M475R欠突变是否对于维持Ask10p的功能发挥重要作用,我们对原位突变的酿酒酵母菌株进行了 H2O2的点滴平板实验,发现ASK10M475R基因原位突变菌株对H2O2的敏感性显着提高,说明该突变位点对于维持ASK10基因的功能具有重要作用。3)ASK10基因的敲除提高酿酒酵母含有xylA基因的质粒拷贝数从而提高了木糖异构酶的酶活通过转录水平检测发现在ASK10敲除菌株Ru-xylA的转录水平明显上调,进一步测定发现,含有Ru-xylA的质粒拷贝数增加,因此ASK10敲除提高木糖异构酶酶活是通过增加质粒拷贝数实现的。而ASK10M475R基因原位突变菌株中虽然Ru-xylA的转录水平也有所提高,但质粒拷贝数没有明显变化。4)ASK10M475R上调分子伴侣Hsp26p的转录水平提高木糖异构酶的酶活为研究ASK10M475R基因原位突变提高木糖异构酶酶活的原因,我们对携带有木糖异构酶途径ASK10M475R突变菌株及ask10△菌株又进行了转录组检测,结合之前进化前后菌株的转录组数据,发现HSP26分子伴侣的转录水平在驯化后菌株及ASK10原位突变菌株中均有明显上调。进一步分析发现在原始菌株中超表达HSP26基因对于木糖异构酶的酶活提高具有积极作用。说明ASK10M475R原位突变在一定程度上提高分子伴侣编码基因HSP26转录水平进而提高木糖异构酶的酶活。(本文来源于《山东大学》期刊2016-05-20)

付晓萌,诸葛斌,陆信曜,宗红,方慧英[3](2015)在《异源表达木糖异构酶基因对克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇的影响》一文中研究指出【目的】提高克雷伯氏菌胞内还原力以强化1,3-丙二醇合成。【方法】将来源于大肠杆菌的木糖异构酶基因在克雷伯氏菌中异源表达,构建重组菌。研究重组菌添加不同浓度木糖为辅底物与甘油共发酵过程中代谢产物和NADH的变化规律。【结果】与对照菌相比,重组菌细胞内还原力NADH提高了0.1-0.3倍,1,3-丙二醇产量达到23.31 g/L,提高20%,1,3-丙二醇转化率从0.60 mol/mol提高到0.73 mol/mol。【结论】木糖异构酶基因的表达强化了木糖代谢途径,经磷酸戊糖途径积累大量还原力,促进了1,3-丙二醇的生成。(本文来源于《微生物学通报》期刊2015年11期)

杨柳,许敬亮,陈小燕,袁振宏[4](2014)在《启动子对木糖异构酶基因在谷氨酸棒杆菌中表达的影响》一文中研究指出以大肠杆菌的强启动子Ptrc和谷氨酸棒杆菌ATCC 13032的内源强启动子Pgro作为大肠杆菌的木糖异构酶基因xylA在谷氨酸棒杆菌中表达的转录起始元件,通过实验表明谷氨酸棒杆菌自身的强启动子Pgro能有效促使外源基因xylA在谷氨酸棒杆菌ATCC 13032中的表达,同时,核糖体结合位点RBS序列的优化对目的基因的表达水平有一定的影响。(本文来源于《新能源进展》期刊2014年05期)

杨柳,叶菁,陈小燕,许敬亮,袁振宏[5](2014)在《木糖异构酶基因xylA表达载体构建》一文中研究指出以大肠埃希菌MG1655的基因组为模板,通过PCR扩增获得木糖异构酶基因xylA。利用敲除编码对基因转录起负调控作用的lacIq基因的大肠埃希菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pEC-XK99E,酶连后转化大肠埃希菌BL21和谷氨酸棒杆菌ATCC 13032。成功构建出了具有大肠埃希菌BL21表达活性的木糖异构酶表达载体pEC(lacI-)-xylA。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2014年03期)

叶菁[6](2013)在《木糖异构酶基因xylA在谷氨酸棒杆菌中的克隆与表达研究》一文中研究指出利用廉价、储量丰富的木质纤维素类生物质生产液体燃料,对于解决当前能源危机和环境问题具有重大意义。木质纤维原料经预处理和水解后会产生大量的葡萄糖和木糖,其中木糖比重最高可达20%,然而自然界中的微生物普遍不能以木糖作为发酵底物,这一问题已成为发展木质纤维原料生物炼制的主要瓶颈。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)是当前氨基酸和核酸工业的主要生产菌株,在细胞生长停滞的状态下,仍能大量合成乳酸、琥珀酸等高附加值产物,且对木质纤维原料预处理过程中产生的抑制物具有良好的耐受性,但目前分离出的谷氨酸棒杆菌都由于缺失木糖异构酶的编码基因xylA而不能代谢木糖。由此,本论文拟通过基因工程手段,将大肠杆菌MG1655的xylA基因导入谷氨酸棒杆菌ATCC13032菌株中进行表达,从而构建谷氨酸棒杆菌木糖代谢工程菌。首先通过PCR扩增得到大肠杆菌MG1655的xylA基因,并将其克隆于穿梭表达载体pEC-XK99E上,构建得到的质粒pEC(lacI-)-xylA分别转化大肠杆菌BL21和谷氨酸棒杆菌ATCC13032,并通过蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和木糖异构酶酶活测定,对xylA在转化子中的表达水平进行检测,结果表明异源基因仅在大肠杆菌BL21中获得了成功表达。谷氨酸棒杆菌和大肠杆菌在基因表达、调控机制上本身存在差异,表达载体上的大肠杆菌强启动子Ptrc在谷氨酸棒杆菌中的活性较低可能是导致xylA基因在谷氨酸棒杆菌ATCC13032中表达失败的主要原因。为此,本论文又通过SOE PCR技术,以谷氨酸棒杆菌ATCC13032的内源强启动子Pgro作为xylA基因的转录起始元件,构建了两个含不同内源核糖体结合位点序列的表达载体pEC-Pgro-xylA和pEC-Pgro-xylA’。相应转化子的木糖异构酶酶活为0.182和0.237U/mg蛋白,这表明启动子Pgro能有效起始xylA基因在谷氨酸棒杆菌ATCC13032中的表达,RBS序列的改变对目的基因的表达水平有一定影响。(本文来源于《华中科技大学》期刊2013-01-01)

丁霄,隋炯明,王晶珊,乔利仙[7](2012)在《以木糖异构酶基因作为选择标记的花生遗传转化》一文中研究指出用木糖异构酶基因xylA替换掉pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶基因(hygromycin-B-phosphotransferase,Hpt),构建了植物表达载体pCAMBIA1301-xylA。再利用农杆菌介导法将pCAMBIA1301-xylA导入花生,转移到添加蔗糖(5g/L)和不同浓度木糖(5,10,20,30g/L)的体胚诱导及体胚萌发培养基上培养。对外植体成苗率及转基因阳性率进行统计,结果表明,当木糖浓度为10g/L时,诱导成苗率为15.25%,再生植株生长健壮,且转基因阳性率高达77.27%,最终确定10g/L为最适木糖筛选浓度。该筛选方法利用木糖作为筛选剂,可以避免利用抗生素筛选可能造成的安全隐患,转化效率高,是一种安全、高效的筛选方法。(本文来源于《核农学报》期刊2012年03期)

张洁,黄志勇,王钦宏,王永莉,王硕[8](2011)在《地芽孢杆菌Y565-5分离鉴定及其木糖异构酶基因xylA的克隆表达和酶学性质》一文中研究指出从甘肃玉门油田地表土中分离到一株嗜热木糖利用菌,地芽孢杆菌Y565-5。利用PCR方法从该菌株中克隆得到一个木糖异构酶基因,xylA。该基因开放阅读框长1182 bp,编码394个氨基酸,XylA氨基酸序列与Geobacillus sp.Y412MC52相似性达到99%。将xylA基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,得到重组质粒pET-28a(+)-xylA,然后将此重组质粒转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳检测出明显的45 kD(相对分子质量)特异性蛋白质条带,并且通过半胱氨酸咔唑法检测出表达产物具有木糖异构酶的活性。对其酶学性质的研究发现,XylA最适温度为90°C,最适pH值为8.0。(本文来源于《微生物学通报》期刊2011年08期)

孙磊,张国军,闫爱玲,徐海英[9](2011)在《木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建》一文中研究指出木糖异构酶基因xylA是一种正向选择标记基因,在植物基因工程中使用该标记可以获得安全的转基因植物。构建了以xylA基因为选择标记的植物表达载体。从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因,插入到质粒pCAMBIA2301的XhoI位点,通过酶切和PCR检测插入片段的正确性,得到载体pCAMBIA2301-xylA,将pBI121载体上的‘35S-GUS-Nos’表达框插入到pCAMBIA2301-xylA的EcoR I和Hind III位点。得到中间载体pCAMBIA2301-xylA-GUS,用SacI和SmaI切下克隆载体上的CBF1基因替代pCAMBIA2301-xylA-GUS中的GUS片段,用电转化法将获得的表达载体转化到农杆菌中,为将来获得安全的转基因抗寒植株奠定基础。(本文来源于《生物技术通报》期刊2011年07期)

尹慧祥[10](2010)在《木糖异构酶和木酮糖激酶基因克隆、表达及活性分析》一文中研究指出能源是人类社会发展的基础,随着石化燃料等非再生能源的日渐减少,新能源、清洁能源尤其是可再生能源得到了各国的关注。其中,以燃料乙醇为代表的生物燃料已经成为关注热点。如何利用廉价的,可再生的植物纤维素和半纤维素生产乙醇是当前研究的热点,其中半纤维素主要由木糖组成。由于酿酒酵母缺乏木糖异构酶以及没有足够酶活力的木酮糖激酶(木酮糖激酶是关键酶)不能直接代谢木糖生成乙醇。本项目研究木糖异构酶及木酮糖激酶基因克隆并在酵母中的表达与生物活性分析。本研究以E. coli DH5a基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增木糖异构酶基因(xi)和木酮糖激酶基因(xk),并分别使其基因的3’末端融合了His标签,便于蛋白的纯化。克隆得到的DNA片段与pPIC9K、pGAP9K载体均用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后连接,然后转化大肠杆菌,获得了带有AOX1启动子的重组质粒(pPIC9K-xi、pPIC9K-xk)和带有GAP启动子的重组质粒(pGAP9K-xi、pGAP9K-xk)。利用电转化技术将线性化后的质粒pPIC9K-xi、pPIC9K-xk、pGAP9K-xi、pGAP9K-xk转化P. pastoris GS115,经MD板和700μg/mL的G418抗生素筛选得到多拷贝重组菌株GS115(pPIC9K-xi)、GS115(pPIC9K-xk)、GS115(pGAP9K-xi)、GS115(pGAP9K-xk)作为工程菌。外源蛋白的表达在摇瓶中进行,GS115(pPIC9K-xi)和GS115(pPIC9K-xk)以甲醇为唯一碳源,而GS115(pGAP9K-xi)和GS115(pGAP9K-xk)以葡萄糖为唯一碳源。SDS-PAGE分析结果显示,木糖异构酶和木酮糖激酶成功地在巴斯德毕赤酵母中分泌表达。随后用木糖发酵试验作活性分析,结果表明摇瓶发酵的重组木糖异构酶都具有生物活性。利用电转化技术将线性化后的质粒pGAP9K-xi和pGAP9K-xk转化酿酒酵母京龙1号,经MD板和700μg/mL的G418抗生素筛选得到多拷贝重组菌株JL1(pGAP9K-xi)、JL1(pGAP9K-xk)。摇瓶发酵工程菌株JL1(pGAP9K-xi)和JL1(pGAP9K-xk)表达木糖异构酶和木酮糖激酶。随后用木糖发酵试验作活性分析,结果表明摇瓶发酵的重组木糖异构酶具有生物活性。综上所述,本实验成功地克隆了木糖异构酶和木酮糖激酶基因,实现了在巴斯德毕赤酵母和酿酒酵母中表达木糖异构酶和木酮糖激酶。同时,证明了酵母表达来源于大肠杆菌的木糖异构酶具有活性。为今后构建直接利用来自半纤维素的木糖的酿酒酵母工程菌,直接代谢木糖生成乙醇,以及生产重组木糖异构酶和木酮糖激酶而应用于半纤维素乙醇的生产打下基础。(本文来源于《海南大学》期刊2010-06-01)

木糖异构酶基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

随着石油等化石燃料的日益枯竭以及人们环境保护意识的提升,作为可再生生物质能源的第二代燃料乙醇能源逐渐被人们所认可。与第一代燃料乙醇生产相比,第二代工业乙醇以各种农作物残渣为原料,除去了与人“争粮”的危害,并使这些纤维素原料得到较高的利用,减少了焚烧所造成的空气污染。酿酒酵母具有高糖和高乙醇耐受性,以及高乙醇发酵能力的优势,因而成为了燃料乙醇生产的首选菌株。然而天然的酿酒酵母菌株只能利用己糖进行发酵,而不能利用在纤维素原料中含量仅次于葡萄糖的木糖。因此葡萄糖和木糖在酿酒酵母中共发酵的研究对于第二代燃料乙醇的经济适用性尤为重要。课题组前期通过代谢工程改造和菌株的非理性进化获得了高效的木糖代谢酿酒酵母菌株。该菌株表达了低等真菌Piromyces s.来源的木糖异构酶基因(Pi-xylA),超表达内源木酮糖激酶基因以及非氧化磷酸戊糖途径的关键酶基因的改造以增加木糖代谢途径的流量;敲除GRE3基因减少木糖向木酮糖非特异性转化,敲除呼吸链中关键基因COX4,破坏菌株的呼吸链,去除呼吸作用对乙醇积累的影响。在此基础上,课题组通过长期在以木糖为唯一碳源的条件下对菌株进行非理性进化,获得了一株能够高效发酵木糖生产乙醇的酿酒酵母菌株,该菌株木糖异构酶酶活比进化前菌株显着提高。在更换了实验室自身发现的来自牛瘤胃宏基因组的木糖异构酶基因Ru-xylA(美国专利授权US 8586336B2)后,该菌株的木糖生长能力以及木糖异构酶的酶活与之前携带有其他木糖异构酶基因的菌株相似,但木糖异构酶活性提高的机理并未揭示。随后对该菌株进行了全基因组测序及进一步验证分析,发现8个纯合的SNPs位点和4个short InDels,但是各突变基因是否在提高菌株木糖代谢能力上发挥作用尚不清楚。本论文在前期工作的基础上,对12个突变基因进行敲除或超表达,分析对木糖代谢的影响。发现大部分基因对木糖代谢能力的提高没有正向作用。但是ASK10基因的突变和敲除,能够提高菌株在木糖上的生长能力以及木糖异构酶的酶活。研究发现该基因的敲除,能够通过提高质粒的拷贝数,提高木糖异构酶基因Ru-xylA的转录水平,从而提高木糖异构酶的酶活,使菌株的木糖代谢能力得到提高。但ASK10M475R突变基因虽然也使得木糖异构酶酶活增加,但并未影响质粒拷贝数。为进一步研究ASK10M475R突变基因提高木糖异构酶的原因,我们对携带有木糖异构酶途径ASK10M475R突变菌株及ask1O△菌株进行了转录组测序和分析,结合之前进化前后菌株的转录组数据,发现ASK10M475R突变可上调分子伴侣Hsp26p的表达,从而提高木糖异构酶的酶活,使菌株的木糖代谢能力得到提高。具体研究内容如下:1)驯化后菌株突变基因的敲除或超表达对木糖代谢影响的分析通过对驯化前后菌株的测序及后续的PCR重复验证,一共发现了 12个基因的突变,包括8个SNPs和4个short InDels。在仅引入Ru-xylA基因的原始菌株中对含有SNP的突变基因进行超表达,含有short InDel的基因进行敲除,通过葡萄糖和木糖上的点滴平板实验,发现大部分基因对木糖代谢能力的提高没有正向作用,但是只有ASK10基因的敲除及在敲除基础上超表达ASK10M475R能够提高菌株在木糖上的生长。进一步验证发现对ASK10基因在基因组上原位突变为ASK10M475R后同样能够提高酿酒酵母菌株在木糖上的生长,且在木糖上生长能力的提高是由于木糖异构酶活性的提高引起的。2)原位突变ASK10M475R功能分析Ask10p的功能主要是作为调控因子参与多种胁迫响应,如氧化胁迫等。为了验证ASK10M475R欠突变是否对于维持Ask10p的功能发挥重要作用,我们对原位突变的酿酒酵母菌株进行了 H2O2的点滴平板实验,发现ASK10M475R基因原位突变菌株对H2O2的敏感性显着提高,说明该突变位点对于维持ASK10基因的功能具有重要作用。3)ASK10基因的敲除提高酿酒酵母含有xylA基因的质粒拷贝数从而提高了木糖异构酶的酶活通过转录水平检测发现在ASK10敲除菌株Ru-xylA的转录水平明显上调,进一步测定发现,含有Ru-xylA的质粒拷贝数增加,因此ASK10敲除提高木糖异构酶酶活是通过增加质粒拷贝数实现的。而ASK10M475R基因原位突变菌株中虽然Ru-xylA的转录水平也有所提高,但质粒拷贝数没有明显变化。4)ASK10M475R上调分子伴侣Hsp26p的转录水平提高木糖异构酶的酶活为研究ASK10M475R基因原位突变提高木糖异构酶酶活的原因,我们对携带有木糖异构酶途径ASK10M475R突变菌株及ask10△菌株又进行了转录组检测,结合之前进化前后菌株的转录组数据,发现HSP26分子伴侣的转录水平在驯化后菌株及ASK10原位突变菌株中均有明显上调。进一步分析发现在原始菌株中超表达HSP26基因对于木糖异构酶的酶活提高具有积极作用。说明ASK10M475R原位突变在一定程度上提高分子伴侣编码基因HSP26转录水平进而提高木糖异构酶的酶活。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

木糖异构酶基因论文参考文献

[1].赵建华,李浩霞,尹跃,王亚军,李彦龙.枸杞木糖异构酶基因LbxylA的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备[J].食品科学.2019

[2].彭博.ASK10基因突变及敲除增强酿酒酵母木糖异构酶酶活机制的研究[D].山东大学.2016

[3].付晓萌,诸葛斌,陆信曜,宗红,方慧英.异源表达木糖异构酶基因对克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇的影响[J].微生物学通报.2015

[4].杨柳,许敬亮,陈小燕,袁振宏.启动子对木糖异构酶基因在谷氨酸棒杆菌中表达的影响[J].新能源进展.2014

[5].杨柳,叶菁,陈小燕,许敬亮,袁振宏.木糖异构酶基因xylA表达载体构建[J].微生物学杂志.2014

[6].叶菁.木糖异构酶基因xylA在谷氨酸棒杆菌中的克隆与表达研究[D].华中科技大学.2013

[7].丁霄,隋炯明,王晶珊,乔利仙.以木糖异构酶基因作为选择标记的花生遗传转化[J].核农学报.2012

[8].张洁,黄志勇,王钦宏,王永莉,王硕.地芽孢杆菌Y565-5分离鉴定及其木糖异构酶基因xylA的克隆表达和酶学性质[J].微生物学通报.2011

[9].孙磊,张国军,闫爱玲,徐海英.木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建[J].生物技术通报.2011

[10].尹慧祥.木糖异构酶和木酮糖激酶基因克隆、表达及活性分析[D].海南大学.2010

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