导读:本文包含了阿魏酸酯酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:阿魏酸,拟南芥,菌株,性质,性能,聚糖,菌种。
阿魏酸酯酶论文文献综述
康超,甘丽妃,梁媛文,朱春瑶,冯珍[1]（2019）在《产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化》一文中研究指出采用初筛和复筛试验,从土壤中筛选获得一株产阿魏酸酯酶活力较高的菌株A3,经形态观察、生理生化特性结合18S/ITS功能区进行测序鉴定其为黄曲霉(Aspergillus flavus)。通过单因素轮换法和正交试验设计,对该菌株进行产酶条件考察及发酵条件优化,结果表明:在接种量5%、温度28℃、180 r/min条件下培养84 h,菌株A3产阿魏酸酯酶的酶活最高为843.52 mU/mL。(本文来源于《食品科技》期刊2019年10期）
倪幸楠,王永丽,武艳芳,李霞,高璐[2]（2019）在《热纤梭菌嗜热阿魏酸酯酶在拟南芥中的异源表达》一文中研究指出在植物细胞壁中,阿魏酸可与半纤维素和木质素共价交联形成木质素-阿魏酸-阿拉伯木聚糖复合物,是木质纤维素形成坚固抗降解屏障的重要分子基础。阿魏酸酯酶(ferulic acid esterase, FAE)可以打破半纤维素之间及半纤维素与木质素之间的阿魏酸酯键。本研究将来源于热纤梭菌(Clostridium thermocellum)的阿魏酸酯酶基因的密码子进行优化后,构建了该嗜热FAE基因在胞质、质外体、内质网、叶绿体和线粒体等不同亚细胞空间特异表达的植物表达载体,并转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)。结果表明,在获得的不同类型转基因系中均可检测到有该嗜热FAE的表达,其中在胞质中表达的酶活性最高,且在高温预处理(70℃)条件下的酶活性都显着高于常温下的酶活性(P<0.05)。与野生型相比,各个拟南芥转基因系的株高、鲜重、种子百粒重差异不显着,但在叶绿体和线粒体中表达的转基因株系出现了花期提前的现象。本研究可为能源植物、牧草和农作物秸秆的高效资源化利用提供新的思路与方法。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年10期）
曹艳,夏其乐,陈剑兵,陆胜民[3]（2019）在《1株阿魏酸酯酶产生菌的筛选鉴定及发酵条件优化》一文中研究指出从浙江绍兴鉴湖附近土样中分离筛选到1株产阿魏酸酯酶(ferulic acid esterase,FAE)的菌株FD-8,通过菌落形态、分生孢子梗形态对比和ITS/18S rDNA分子生物学同源性分析,鉴定该菌株为溜曲霉,命名为Aspergillus tamarii FD-8。FD-8生长最适碳源和氮源分别为蔗糖和酵母浸提物,最适生长温度和pH分别为32℃和5.0,最适产酶条件为32℃、pH 6.0,发酵周期为120 h。在最适培养基中、分阶段控制pH培养条件下,FAE比酶活达到231.34 mU/mg。去淀粉麸皮可诱导FAE的合成,在发酵48 h添加20.0 g/L去淀粉麸皮,FAE最高比酶活可达到573.61 mU/mg,比对照提高1.48倍。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2019年05期）
施其成,Ahmed,M.Abdel-Hamid,李袁飞,成艳芬,Isaac,Cann[4]（2019）在《厌氧真菌阿魏酸酯酶基因表达及其生物学功能研究》一文中研究指出本研究旨在表达纯化厌氧真菌的一种阿魏酸酯酶,并分析其相关特性和功能,为实现其在生产中应用提供理论依据。试验利用基因组学技术获取了能够在大肠杆菌(DE3)中高效表达的阿魏酸酯酶基因序列,将其导入表达质粒并在宿主菌株内表达后,通过亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤法得到纯化的重组酶蛋白。在此基础上,通过定点突变技术,对阿魏酸酯酶基因序列中编码酯酶及糖苷水解酶的功能区分别做定点突变,并获取相应的纯化酶蛋白,比较分析几种酶的基本特性及其对不同底物的降解能力。本研究阿魏酸酯酶的基因序列为1878bp,其编码的酶蛋白包含625个氨基酸,理论等电点为5.93,不稳定系数是15.36,为稳定性蛋白。该酶催化底物的最适温度及pH值分别为37°C和7.5,野生型阿魏酸酯酶(WT)、酯酶区突变酶(TM1)及糖苷水解酶区突变酶(TM2)的分子量分别为67.80KDa、67.78KDa和67.74KDa。多糖类底物降解结果显示,TM1对多糖类底物的降解能力显着高于酶WT和酶TM2(P<0.05),TM2几乎丧失了对多糖类底物的降解能力。酯类物质及阿魏酰基低聚糖的降解结果显示,WT的降解能力均显着高于酶TM1和TM2(P<0.05);TM1和TM2都表现出极低的酯酶活性,且两者间差异不显着(P>0.05)。综上,本研究成功地表达纯化出了厌氧真菌阿魏酸酯酶及其突变酶。通过定点突变发现,野生型阿魏酸酯酶中糖苷水解酶功能区的失活使得酶的多糖降解能力几乎丧失,但酯酶功能区的失活会显着增强酶对多糖类底物的降解,而两种突变酶在降解含酯键的底物上都表现出极低的活性。由此推测,在降解多糖类底物上,该酶的酯酶功能区会抑制糖苷水解酶功能区的活性。但在降解含酯键的底物上,这两个功能区表现出强烈的互作效应。(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
张雷[5]（2019）在《基于foldon介导阿魏酸酯酶的寡聚化对催化性能的影响》一文中研究指出阿魏酸酯酶(feruloyl esterase,FAE,EC 3.1.1.73)是羧酸酯酶的一个亚类,它能水解植物细胞壁中阿魏酸与多糖之间连接的酯键,使得木质纤维素原料变得疏松,从而将阿魏酸释放出来。FAE在食品、饲料、医药、造纸、化妆品、生物合成等领域有广泛的应用前景。目前,FAE的催化性能仍有较大提升空间,因此FAE的改造意义深远。本文基于foldon可自发形成寡聚化结构的特性,通过末端融合短肽foldon对FAE进行改造,并对重组FAE活性、酶学性质、寡聚化结构进行探究。主要研究结果如下:(1)从Uniprot数据库中筛选出FAE O42807,根据毕赤酵母密码子偏好性表达将其氨基酸序列转换成fae基因序列,化学合成fae、fae-foldon基因序列,并连接至质粒pPIC9K,构建表达载体pPIC9K-fae、pPIC9K-fae-foldon。将表达质粒电转化至毕赤酵母GS115中,经PCR验证表明,成功获得基因工程菌GS1115/pPIC9K-fae、GS1115/pPIC9K-fae-foldon。(2)设计含有His标签的引物,将其克隆至表达载体pPIC9K-fae及pPIC9K-fae-foldon,成功构建表达载体pPIC9K-His-fae、pPIC9K-His-fae-foldon,电转化至毕赤酵母GS115中,诱导培养后,发酵液经Ni层析柱收集洗脱液,GS115/pPIC9K-His-fae洗脱液经SDS-PEGE分析显示在40 kD处有单一蛋白条带(命名为mon-FAE_2),GS115/pPIC9K-His-fae-foldon洗脱液经SDS-PEGE分析显示有3条蛋白条带,分别为45 kD处的蛋白条带(命名为pro-olig-FAE_2)、110kD处的蛋白条带(命名为tri-FAE_2)及240 kD处的蛋白条带(命名为six-FAE_2),经测定mon-FAE_2的FAE发酵液的酶活力为251.09±7.61 U/L,比活力为0.36±0.011 U/mg;multi-FAE_2(mon-FAE_2、tri-FAE_2及six-FAE_2的混合物)的FAE酶活力为440.78±12.7 U/L,比活力为1.63±0.045 U/mg。(3)为了减少FAE寡聚化时的空间位阻作用,在fae和foldon基因之间插入一段大小为1.63 kD的linker序列,成功构建表达载体pPIC9K-His-fae-linker-foldon,电转化至毕赤酵母GS115中,诱导表达后发酵液经Ni层析柱收集洗脱液,洗脱液经SDS-PAGE分析显示也有3条蛋白条带,分别为45 kD处蛋白条带(命名为pro-olig-FAE_3)、110 kD处的蛋白条带(命名为tri-FAE_3)及240 kD处蛋白条带(命名为six-FAE_3),经测定six-FAE_3的FAE发酵液的酶活力为334.14±11.24 U/L,比活力为1.74±0.063 U/mg。(4)重组FAE理化性质为:叁种结构的FAE最适反应温度均为50℃,mon-FAE_2、multi-FAE_2及six-FAE_3在50℃的半衰期分别为99.6 min、129 min及222min。mon-FAE_2的最适反应pH为6.0,且在pH为6.0时稳定性较好,multi-FAE_2及six-FAE_3的最适pH为5.0,且在pH为5.0时稳定性较好。对于mon-FAE_2,Mn~(2+)、Mg~(2+)对其有促进作用,K~+、Ca~(2+)、Fe~(3+)及Cu~(2+)对其有一定的抑制作用,而Zn~(2+)对其有显着的抑制作用,对于multi-FAE_2及six-FAE_3,Mn~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(3+)及Cu~(2+)对其有促进作用,K~+对其有一定的抑制作用。multi-FAE_2较mon-FAE_2的比活力提高3.53倍,K_m值减小77.36%,k_(cat)/K_m值提高7.57倍。six-FAE_3较mon-FAE_2的比活力提高3.83倍,K_m常数减小75.16%,k_(cat)/K_m提高8.67倍。(5)25℃时在透射电子显微镜下可观察到multi-FAE_2及six-FAE_3形成了寡聚化结构的蛋白聚集体。动态光散射结果表明随着温度的升高mon-FAE_2的平均粒径保持不变,tri-FAE_2及tri-FAE_3的随着温度的升高逐渐解聚,直至65℃,tri-FAE_2及tri-FAE_3平均粒径大小与mon-FAE_2平均粒径大小几乎一致,说明其已解聚为单体。本论文的实验结果为FAE分子水平的改造提供基础理论研究,该改造酶的方法简单高效,无需事先详细了解酶的3D结构,有很好的应用前景。(本文来源于《华侨大学》期刊2019-06-30）
高兆建,许祥,王先凤,芦宁,王旭东[6]（2019）在《深绿木霉嗜酸性阿魏酸酯酶酶学性质及生物质转化分析》一文中研究指出为实现生物质的高效降解,制备具有重要生理功能的阿魏酸,本实验从深绿木霉XS6发酵液中分离纯化深绿木霉阿魏酸酯酶(Trichoderma atroatroviride feruloyl esterase,TaFAE),并研究酶学特性。发酵液经(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE-Cellulose DE52阴离子交换层析和Sephadex G-200凝胶过滤层析后,得到电泳纯的TaFAE,比活力134.3 U/mg,回收率28.9%,纯化倍数31.52。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳测得酶分子质量约为66.4 kDa。TaFAE对阿魏酸甲酯亲和力最高,以其为底物,酶K_m值和V_(max)值分别为0.53 mmol/L和16.74 μmol/(min·mg)。以芥子酸甲酯为底物,酶促反应速率最大,达到32.21 μmol/(min·mg),是阿魏酸甲酯的2倍,对咖啡酸甲酯无活性,说明该酶具有严格的底物特异性。TaFAE最适pH值和温度分别为pH 4.0和40℃。在pH 2.0～9.0的范围内,30～40℃温度下都表现出良好的稳定性。金属离子Ca~(2+)和Mg~(2+)对TaFAE活性有显着激活作用,重金属离子Hg~(2+)和Pb~(2+)几乎完全抑制酶活性;β-巯基乙醇、二硫苏糖醇、十二烷基硫酸钠、Trition X-100增强酶活性,苯甲基磺酰氟有较强的抑制作用。木聚糖酶降解生物质的体系中加入TaFAE可显着增加阿魏酸和还原糖产量,表明TaFAE和木聚糖酶有良好协同作用。综上所述,TaFAE优良的耐酸性及其他酶学性质说明其在食品和饲料行业有较好的应用潜力。(本文来源于《食品科学》期刊2019年10期）
陈振楠[7]（2019）在《阿魏酸酯酶的微生物合成及其应用进展》一文中研究指出阿魏酸酯酶能够水解阿魏酸等酚酸与半纤维素和木质素相互作用的酯键,促进木质纤维素降解的同时可以释放出阿魏酸、p-香豆酸等抗氧化物质,在食品、造纸、饲料、医药等领域具有很高的应用价值。本文系统阐述了阿魏酸酯酶的分类、微生物来源及应用等方面的最新研究进展。认为获得适应性更广泛、生产能力更强、能大规模应用工业化生产的阿魏酸酯酶及其生产菌株仍是今后研究的重点和方向,用于食品和医药领域具有广阔前景。(本文来源于《湖北科技学院学报(医学版)》期刊2019年03期）
雷林超,赵明双,龙宣蓉,陈培钦,李夏兰[8]（2019）在《阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程的影响》一文中研究指出以晒青毛茶为原料,研究阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程中活性物质的影响。利用高效液相色谱法以及分光光度计法测定茶叶中各种活性物质含量的变化。实验结果表明,发酵8 d后茶叶的水浸出物、还原糖、阿魏酸及低聚木糖均比晒青毛茶高,茶汤的p H值及游离氨基酸含量下降。在晒青毛茶中同时添加3 m L(75 U/m L)阿魏酸酯酶和3 m L(75 U/m L)木聚糖酶,在发酵第8天阿魏酸及低聚木糖分别可达838. 9μg/g及3. 78μg/g,比不添加任何酶的茶样分别高20. 9%及38. 6%。在晒青毛茶发酵过程中,同时添加阿魏酸酯酶与木聚糖酶有利于提高茶叶的品质,从而提升茶叶的附加值。该研究结果对发酵型茶的保健功效提供一定的理论依据。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年14期）
张雷,雷林超,张光亚,李夏兰[9]（2019）在《基于foldon介导的寡聚化以提高阿魏酸酯酶催化效率》一文中研究指出将foldon结构域与阿魏酸酯酶C-末端进行融合表达并用组氨酸标签对融合蛋白进行纯化。实现基于foldon的寡聚化阿魏酸酯酶及单体阿魏酸酯酶在毕赤酵母GS115中表达,并应用目标蛋白与foldon结构域融合可自发形成叁聚体结构的特性对阿魏酸酯酶进行改造,以提高阿魏酸酯酶的催化性能。经纯化获得寡聚化及单体阿魏酸酯酶,寡聚化阿魏酸酯酶表观分子量约为110kDa,单体阿魏酸酯酶表观分子量为40 kDa;寡聚化阿魏酸酯酶的最适反应温度和pH分别为50℃和5.0,而单体阿魏酸酯酶则分别为50℃和6.0。寡聚化阿魏酸酯酶的底物亲和力(K_m)及催化效率(k_(cat)/K_m)较单体阿魏酸酯酶分别提高3.42倍和7.57倍。结果表明,寡聚化及单体阿魏酸酯酶均成功表达,且寡聚化阿魏酸酯酶在底物亲和力和催化效率上具有明显优势,该提高阿魏酸酯酶催化效率的方法简单、高效,有很好的应用前景。(本文来源于《生物工程学报》期刊2019年05期）
张芳芳[10]（2019）在《冠突散囊菌中阿魏酸酯酶基因的发现、表达及酶学性质研究》一文中研究指出冠突散囊菌(Aspergillus cristatus)是散囊菌目发菌科散囊菌属的一种真菌,是茯砖茶发酵过程中的优势菌种,也是形成茯砖茶独特品质的关键原因。研究表明,冠突散囊菌具有降脂减肥、抗氧化、调节免疫、抗肿瘤、抑菌等多种功效。由于微生物次级代谢产物复杂,且代谢产物的生成受生长环境等诸多因素的影响,冠突散囊菌代谢产物中发挥作用的有效成分目前并不完全清楚。为了更好地研究冠突散囊菌的功效成分,本课题组对冠突散囊菌进行了全基因组测序,系统进行了冠突散囊菌基因组功能的研究。阿魏酸(Ferulic acid)是一种普遍存在的酚酸类物质,具有清除自由基、预防血栓形成、降血脂、抗菌消炎及预防癌症的功效。在植物细胞壁中,阿魏酸与木聚糖、阿拉伯糖等半纤维素成分结合形成阿魏酸糖酯,无法发挥生物学活性。阿魏酸酯酶(Feruloyl esterase)是一种羧酸酯酶,可以水解植物细胞壁中阿魏酸酯键,释放出游离的阿魏酸。在对冠突散囊菌基因组分析过程中,我们发现基因组中存在一段基因序列,与已经报道的来源于黑曲霉的阿魏酸酯酶有73%的相似性,且含有A型阿魏酸酯酶共有的GHSLG氨基酸序列,推测这很可能是一种新的A型阿魏酸酯酶编码基因,且该酶的功能发挥可能是茯砖茶和冠突散囊菌健康功效产生原因之一。因此,对该基因及酶的性质进行深入研究具有重要的意义。在本研究中,首先,我们利用基因预测软件Augustus和基因比对的方法,确定了该段基因序列由92 bp的内含子和846 bp的外显子组成,同时利用信号肽预测软件检测到该段基因编码的氨基酸序列包含一段由22个氨基酸构成的信号肽,由此推测该基因的完整功能编码序列为780 bp,共编码260个氨基酸。为了验证上述预测及深入研究该酶的特性,我们从冠突散囊菌基因组中扩增出完整的编码序列后,利用大肠杆菌表达系统对这段预测序列进行表达验证。首先我们构建了原核表达载体pET22b-Acfae,导入大肠杆菌后进行诱导表达。经检测,重组蛋白表达在包涵体中,采用透析复性的方法,我们获得了可溶的重组蛋白。采用分光光度法对重组酶进行了酶活检测,但没有检测到阿魏酸酯酶活性,可能原因是在复性过程中重组蛋白没有得到正确折迭。然后我们改用毕赤酵母表达系统对AcFAE进行了表达及验证。根据毕赤酵母的密码子偏好性、G+C百分比、密码子适应指数优化基因序列,然后构建表达载体pGAPZaA-Acfaeo,并电转化入毕赤酵母SMD1168H细胞中,筛选出阳性转化子后进行摇瓶发酵培养和高密度发酵培养,SDS-PAGE和阿魏酸酯酶酶活检测表明,重组蛋白在毕赤酵母中成功表达,且具有阿魏酸酯酶的活性,发酵液最高酶活为0.75 U/mL。利用镍柱分离纯化重组蛋白,并进行了酶学性质研究。结果发现,重组阿魏酸酯酶的最适反应温度为55℃;在40℃及以下有较好的稳定性,但在55℃放置1 h酶活基本消失;重组酶的最适反应pH为6.6,且在pH 5.0～8.0范围内具有良好的稳定性。本研究从冠突散囊菌基因组中发现了一种新的阿魏酸酯酶基因,通过序列的分析及优化实现了在毕赤酵母中的表达,并对其酶学性质进行了初步研究。这是首次关于冠突散囊菌中阿魏酸酯酶基因的报道,为茯砖茶和冠突散囊菌健康机制的研究提供了一种依据,也为该酶的工业化生产奠定了理论基础。(本文来源于《山东大学》期刊2019-04-03）
阿魏酸酯酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
在植物细胞壁中,阿魏酸可与半纤维素和木质素共价交联形成木质素-阿魏酸-阿拉伯木聚糖复合物,是木质纤维素形成坚固抗降解屏障的重要分子基础。阿魏酸酯酶(ferulic acid esterase, FAE)可以打破半纤维素之间及半纤维素与木质素之间的阿魏酸酯键。本研究将来源于热纤梭菌(Clostridium thermocellum)的阿魏酸酯酶基因的密码子进行优化后,构建了该嗜热FAE基因在胞质、质外体、内质网、叶绿体和线粒体等不同亚细胞空间特异表达的植物表达载体,并转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)。结果表明,在获得的不同类型转基因系中均可检测到有该嗜热FAE的表达,其中在胞质中表达的酶活性最高,且在高温预处理(70℃)条件下的酶活性都显着高于常温下的酶活性(P<0.05)。与野生型相比,各个拟南芥转基因系的株高、鲜重、种子百粒重差异不显着,但在叶绿体和线粒体中表达的转基因株系出现了花期提前的现象。本研究可为能源植物、牧草和农作物秸秆的高效资源化利用提供新的思路与方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
阿魏酸酯酶论文参考文献
[1].康超,甘丽妃,梁媛文,朱春瑶,冯珍.产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其产酶条件优化[J].食品科技.2019
[2].倪幸楠,王永丽,武艳芳,李霞,高璐.热纤梭菌嗜热阿魏酸酯酶在拟南芥中的异源表达[J].农业生物技术学报.2019
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[4].施其成,Ahmed,M.Abdel-Hamid,李袁飞,成艳芬,Isaac,Cann.厌氧真菌阿魏酸酯酶基因表达及其生物学功能研究[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[5].张雷.基于foldon介导阿魏酸酯酶的寡聚化对催化性能的影响[D].华侨大学.2019
[6].高兆建,许祥,王先凤,芦宁,王旭东.深绿木霉嗜酸性阿魏酸酯酶酶学性质及生物质转化分析[J].食品科学.2019
[7].陈振楠.阿魏酸酯酶的微生物合成及其应用进展[J].湖北科技学院学报(医学版).2019
[8].雷林超,赵明双,龙宣蓉,陈培钦,李夏兰.阿魏酸酯酶对晒青毛茶发酵过程的影响[J].食品与发酵工业.2019
[9].张雷,雷林超,张光亚,李夏兰.基于foldon介导的寡聚化以提高阿魏酸酯酶催化效率[J].生物工程学报.2019
[10].张芳芳.冠突散囊菌中阿魏酸酯酶基因的发现、表达及酶学性质研究[D].山东大学.2019
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