戚玉杨吴光启刘红张飞吕芳
(南京鼓楼医院集团宿迁市人民医院血液科江苏宿迁223800)
【摘要】目的：探讨染色体检测在骨髓增生异常综合征（myelodysplasticsyndromesMDS）分型及预后中的意义。方法：分析37例骨髓增生异常综合征患者的染色体核型与疾病分型、免疫表型、国际预后积分的关系。采用直接免疫荧光标记法标记经流式细胞仪测定，依据MDS的WHO分型方案、染色体核型以及系统（IPSS）将MDS患者划分为RA/RARS/RCMD组、RAEBI/RAEBII组；染色体良好组、染色体不良组；中危I组、中危II组、高危组。结果：①染色体良好组，RA/RARS/RCMD14例，RAEBI/RAEBII8例；染色体不良组中，RA/RARS/RCMD4例，RAEBI/RAEBII11例。②染色体良好组：部分患者CD34、CD117表达阳性；染色体不良组中，所有患者CD34、CD117均表达阳性，并且CD34、CD117的阳性表达率均较染色体良好组高。③染色体良好组平均国际预后积分较染色体不良组低。结论：染色体核型检测有助于MDS的分型、预后判断。
【关键词】染色体；骨髓增生异常综合征
【中图分类号】R394【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）28-0028-02
ExpressionandsignificanceofCD34，CD117onbonemarrowmononuclearcellsofmyelodysplasticsyndromes
QiYuyang,WuGuangqi,LiuHong,ZhangFei,LvFang.NanjinggulouHospitalGroup,SuqianPeople'sHospital,JiangsuProvince,Suqian223800,China
【Abstract】ObjectiveToexploretheexpressionandsignificanceofCD34，CD117onbonemarrowmononuclearcellsofmyelodysplasticsyndromes（MDS）.MethodsDirectimmunofluorescencestainingwereusedbymeansofFlowcytometry.37patientswithMDSwerepidedintoRA/RARS/RCMDsubgroup，RAEBI/RAEBIIsubgroup；favorablechromosomalsubgroup，poorchromosomalsubgroup；intermediate-riskIsubgroup，intermediate-riskIIsubgroup，high-risksubgrouprespectivelyaccordingtoWorldHealthOrganizationclassification,cytogeneticabnormalitiesandInternationalPrognosticScoringSystem（IPSS）.Results①CD34andCD117werepositiverespectivelyin11of19patientswithRA/RARS/RCMD,allcasesinRAEBI/RAEBIIexpressedCD34andCD117;increasedexpressionofCD34andCD117wasMDSgrade-related.②favorablechromosomalsubgroup,14/22patientswerepositiveforCD34，CD117，allcasesinpoorchromosomesexpressedCD34andCD117;therewasadirectrelationshipbetweenphenotyticdensityandpoorcytogeneticriskfactor.③CD34andCD117expressionwaspresentrespectivelyinintermediate-riskI（9/17patients）,intermediate-riskII（11/11）andhigh-risksubgroup（9/9）;thephenotypicintensityalsowascorrelatedwithIPSSscores.ConclusionsDetectionofCD34，CD117maybeausefultoolforsubtypingandpredictingtheprognosisofMDS.
【Keywords】Myelodysplastic;Syndromes;CD34;CD117
研究表明骨髓增生异常综合征（myelodysplasticsyndromes，MDS）患者骨髓细胞免疫表型在整个疾病过程中呈现出紊乱及异常表达,其中某些抗原分子的表达对疾病诊断、分型、预后具有重要价值。我们对MDS患者骨髓单个核细胞CD34、CD117的表达进行了初步探讨，现报道如下：
1.病例与方法
1.1一般资料
37例患者均为我科2005年11月-2015年01月初诊的MDS患者，男29例，女8例，发病时平均年龄49.6（18-79）岁,所有患者均符合MDS的WHO方案诊断标准[1]，并据此分为RA/RARS/RCMD组、RAEBI/RAEBII组。
1.2方法
1.2.1染色体检测：取肝素抗凝骨髓5ml,采用直接法、24小时培养法和同步法制备染色体，采用R带或G带技术显带，描述核型。依据IPSS预后积分标准，将MDS患者染色体核型区分如下：（1）染色体良好组，包括正常核型、-Y、5q-、20q-,（2）染色体不良核型组，包括复杂异常（≥3种异常）、7号染色体异常，（3）染色体中间核型组，除上述两类以外的其它核型异常。
1.2.2抗原检测：取肝素抗凝骨髓2-3ml,常规分离单个核细胞，采用单标或双标直接免疫荧光标记法标记细胞表面分化抗原，运用三色流式细胞仪做活细胞荧光检测,阳性病例的判断标准：抗原阳性细胞≧20%。
1.2.3IPSS预后积分及危险度分组[2]：依据骨髓原始细胞百分比、骨髓造血细胞染色体核型和外周血细胞减少系列数进行积分，危险度分组：低危：0分，中危I：0.5-1分，中危II：1.5-2.0分，高危：≥2.5分。
1.3统计学处理
所有统计数据利用SPSS12软件完成，阳性表达率以均数±标准差表示（x-±s），样本间的表达及阳性表达率差异的比较分别采用Fisher确切概率法、秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1染色体良好组RA/RARS/RCMD16例，RAEBI/RAEBII7例；染色体不良组RA/RARS/RCMD4例，RAEBI/RAEBII12例。疾病不同亚型在两组之间出现的比例差异具有显著性（P﹤0.05）。
2.2染色体良好组15例（15/23）患者CD34表达阳性，14例（14/23）患者CD117表达阳性，CD34阳性表达率48.79±23.37%（20%～85%），CD117阳性表达率52.89±26.88%（20%～96%）；染色体不良组所有患者CD34、CD117均表达阳性，CD34阳性表达率75.31±16.68%（52%～94%），CD117阳性表达率72.01±17.45%（44.1%～96%）。染色体良好组CD34、CD117阳性表达及阳性表达率均较染色体不良组低（P均﹤0.05）。
2.3染色体良好组无高危患者，平均IPSS预后积分0.89。所有高危患者均在染色体不良组，平均IPSS预后积分2.5。染色体良好组平均IPSS预后积分低于染色体不良组。（P﹤0.05）
3.讨论
有关MDS患者骨髓单个核细胞的免疫表型研究，目前认为免疫表型异常不仅与MDS的形态学诊断、FAB分型具有良好一致性，而且随着疾病恶性程度的进展,一些特定细胞表面抗原的表达范围及强度亦随之改变[3]。Pirruccello等[4]发现MDS不同亚型间骨髓单个核细胞CD34、CD117表达存在明显差异，其中RA/RCMD亚型约50%存在表达，而RAEB则100%存在异常表达；在CD34、CD117表达出现由弱到强变化的同时，往往伴随着异常遗传学的出现、疾病由RA/RCMD向RAEB的进展、IPSS预后积分的递增，因此作者提出CD34、CD117表达与否、表达强度高低代表疾病的不同阶段，与疾病进展预后相关，Ogata等[5]的报道与之类似。
我们在对37例MDS患者的骨髓单个核细胞CD34、CD117表达进行分析后发现，CD34、CD117在MDS各亚型、不同染色体核型、预后积分分组间存在明显差异，即随着疾病由RA/RARS/RCMD向RAEB进展，CD34、CD117表达及阳性表达率差异亦出现由低到高的变化，并且这一改变与患者的染色体核型异常、IPSS积分等预后指标相关，CD34、CD117阳性表达率高，提示疾病预后不良。基于上述分析，我们认为了解MDS患者的CD34、CD117表达异常有助于疾病分型、判断预后，对决定临床治疗方案具有重要意义。
本文采用流式细胞仪对CD34、CD117在MDS的不同亚型、染色体核型、IPSS预后积分分组等方面的表达进行了初步分析，然由于本组病例数较少，未能区分出CD34、CD117在染色体中间组、IPSS低危组的表达，进一步扩大病例数的临床研究可能会得到结果。
【参考文献】
[1]BennettJM.WorldHealthOrganizationclassificationoftheacuteleukemiasandmyelodysplasticsyndrome.[J]IntJHematol,2000,72(2):131-133.
[2]GreenbergP,CoxC,LeBeauMM,etal.Internationalscoringsystemforevaluatingprognosisinmyelodysplasticsyndromes[J].Blood.1997;89(6):2079-2088.
[3]MaynadieM,PicardF,HussonB,etal.Immunophenotypicclusteringofmyelodysplasticsyndromes[J].Blood,2002,100(17):2349-2356.
[4]PirruccelloSJ,YoungKH,AounP.Myeloblastphenotypicchangesinmyelodysplasia.CD34andCD117expressionabnormalitiesarecommon[J].AmJClinPathol.2006Jun;125(6):884-94.
[5]OgataK,NakamuraK,YokoseN,etal.Clinicalsignificanceofphenotypicfeaturesofblastsinpatientswithmyelodysplasticsyndromes[J].Blood,2002,100(12):3887-3896.