导读:本文包含了玉米细菌性枯萎病菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:病菌,玉米,细菌性,层析,聚糖,探针,免疫。
玉米细菌性枯萎病菌论文文献综述
李志锋,冯建军,吴绍精,王忠文,程颖慧[1]（2017）在《基于锁式探针快速检测玉米细菌性枯萎病菌和内州萎蔫病菌研究》一文中研究指出玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii subsp.stewartii,PSST)和玉米内州萎蔫病菌(Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis,CMN)是两种主要为害玉米维管束的毁灭性细菌。随着我国进口玉米种子逐年增加,这两种细菌传入我国的风险越来越高,并且被列入2007年颁布的《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》。因此,针对玉米产品上这两种细菌建立一种特异性强、灵敏度高的二重检测方法,既是快速通关的需要,也是严格检疫和保护我国玉米安全生产的需要。本研究根据PPST的CpsD基因和CMN的ITS基因序列分别设计了PPSTPLP和CMN-PLP锁式探针,建立二重滚环扩增体系,并利用生物素标记的下游引物进行扩增,将扩增产物与偶联上微球的捕获探针进行特异性杂交,最后利用液相悬浮芯片仪进行检测。结果表明:第一,16株供试单一或混合菌株样品中,该二重检测体系可在同一反应同时检测出CMN与PSST协同混合DNA模板,也可检测出单一靶标菌DNA模板,而近似种或其他属供试菌株检测结果呈阴性;第二,通过对菌株CMN和PSST混合配制的10~2-10~8 CFU/mL的不同梯度菌悬液进行二重检测,该体系能够检测到菌悬液浓度阈值为10~3CFU/mL,同时相互之间无交叉反应:第叁,该二重检测体系3次重复试验的平均荧光值变异系数均小于10%,表明具有良好的重复性;第四,通过系列梯度浓度的纯菌悬液混合健康种子浸泡液检测,在所有处理样品中利用二重检测方法可同时检测到该混合浸泡液体系中含有1×10~5 CFU/mL的CMN和1×10~4 CFU/mL的PSST,而对应的常规PCR检测结果均为阴性。因此,本研究所设计的特异的锁式探针建立的玉米细菌性枯萎病菌和玉米内州萎蔫病菌的二重检测方法是一种特异性强,灵敏度高的检测新方法,可为进境玉米检疫提供新的技术保障。(本文来源于《中国植物病理学会2017年学术年会论文集》期刊2017-07-25）
孔德昭,彭娟,刘丽强,唐丽娟,匡华[2]（2016）在《基于酶联免疫反应的玉米细菌性枯萎病菌快速检测方法》一文中研究指出通过菌体免疫小鼠获得高灵敏的高特异性单克隆抗体,并以此为基础建立一种快速、灵敏的单克隆抗体双抗体夹心法检测玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartill subsp.Stewartii)。通过小鼠脾脏融合实验获得3株单克隆抗体(12B4、10B1、11C2),并通过双抗体夹心法筛选配对细胞株,建立双抗体夹心法。最低检测限(LOD)为1.5×104cfu/m L,线性范围在4.57×105~1.11×108cfu/m L。该方法对玉米细菌性枯萎病菌具有很好的特异性,对玉米种子添加回收实验回收率为85.6%~90.2%,相对标准偏差低于5.0%。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2016年09期）
李志锋,王忠文,冯建军,程颖慧,李一农[3]（2016）在《基于锁式探针技术快速检测玉米细菌性枯萎病菌和玉米内州萎蔫病菌》一文中研究指出目的:建立一种检测玉米细菌性枯萎病菌和玉米内州萎蔫病菌的方法,为同时检测这2种检疫性细菌提供技术手段。方法:基于靶标序列设计2种检疫性细菌的锁式探针,与靶标菌进行连接消化反应,然后采用通用引物进行滚环扩增,其产物与偶联上对应捕获探针的微球进行杂交,最后通过液相悬浮芯片二重检测。结果:该检测方法能够有效地检测2种检疫性细菌,其检测阈值为103CFU/m L,具有良好的可重复性。结论:建立了一种快速、灵敏的玉米细菌性枯萎病菌和玉米内州萎蔫病菌的二重检测方法。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2016年04期）
厉艳,邵秀玲,张京宣,王英超,封立平[4]（2016）在《玉米细菌性枯萎病菌EGase内切葡聚糖酶蛋白纯化研究初探》一文中研究指出目的研究玉米细菌性枯萎病菌EGase内切葡聚糖酶蛋白纯化的方法。方法以玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii subsp.stewartii)菌株为材料,分离纯化其内切葡聚糖酶Egase。制备EGase浓缩液,浓缩液经Sephradex~(TM)G-75凝胶过滤层析和DEAE-Sephorose Fast Flow阴离子交换柱层析等提纯步骤,获得了凝胶电泳均一的内切葡聚糖酶。结果经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为一条电泳带,纯化后的EGase是单体蛋白,分子量约为72.3 k Da。Egase酶反应的最适温度是60℃,最适pH为5.0。结论本研究从玉米细菌性枯萎病菌中分离得到了一种新的内切葡聚合糖酶,对其部分性质进行了表述,为后续EGase基因的克隆及表达研究提供了研究基础。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2016年04期）
封立平,倪新,吴兴海,伦才智,吴翠萍[5]（2015）在《玉米细菌性枯萎病菌的环介导恒温扩增(LAMP)检测方法》一文中研究指出为了提高口岸和基层实验室检疫和监测玉米细菌性枯萎病菌的准确性和工作效率,利用环介导恒温扩增技术(LAMP),根据内切葡聚糖酶(EGase)基因前导序列,设计2个内引物和2个外引物,对玉米细菌性枯萎病菌进行快速检测。结果表明,使用玉米细菌性枯萎病菌的近缘种或引致相似症状的病原菌菊欧文氏菌玉米致病变种Erwinia chrysanthemi pv.zeae、玉米内州萎蔫病菌Clavibacter michiganensis subsp.nebraskensis、燕麦假单胞菌Pseudomonas avenae、杓兰欧文氏菌Erwinia cypripedii检测其特异性,仅玉米细菌性枯萎病菌有扩增。LAMP检测灵敏度达到2 pg DNA,为普通PCR的100倍;与其它检测方法相比,LAMP方法检测时间短,效率高,不仅降低了设备投入,易于操作,而且具有较高的灵敏度和特异性,适合玉米细菌性枯萎病菌的现场检疫和大规模检测。(本文来源于《植物保护学报》期刊2015年03期）
杨金玲,黄大亮,李莉,刘彩虹,陈勇[6]（2015）在《玉米细菌性枯萎病菌纳米磁标记免疫层析检测试剂与试纸条》一文中研究指出分别以粒径为50和100 nm的羧基化纳米磁珠,通过碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)交联法使磁珠与抗体偶联,制备出可特异性识别玉米细菌性枯萎病菌的两种纳米免疫磁珠试剂。基于双抗体夹心法,经实验条件优化,选用100 nm的羧基化纳米磁珠为磁标记探针,组装了玉米细菌性枯萎病菌磁标记免疫层析检测试纸条。该方法用于玉米种子中玉米细菌性枯萎病菌的检测,检出限为1.0×106CFU/m L,15 min内可通过肉眼判读结果,也可用超顺磁共振检测仪实现量化检测,具有简便、快速、现场化检测的优势。(本文来源于《化学试剂》期刊2015年06期）
冯建军,刘杰,王飞,李秋枫,刘新娇[7]（2014）在《PMA结合实时荧光PCR进行玉米细菌性枯萎病菌细胞活性检测初步研究》一文中研究指出本文将DNA染料PMA选择渗透性和实时荧光PCR特异性相结合,建立了一种快速灵敏检测玉米细菌性枯萎病菌细胞活性的新方法。结果表明,当菌悬液浓度不高于104 CFU/mL时,终浓度为1μg/mL或更高PMA渗透处理后,可以完全抑制死菌DNA的扩增,而活菌DNA的实时荧光PCR检测仍有荧光信号;当菌悬液浓度为105 CFU/mL时,20μg/mL的PMA也可以完全抑制死细胞DNA扩增。该方法能有效区分玉米细菌性枯萎病菌死活细胞,并有助于监测玉米种子中该病菌的活性。(本文来源于《植物检疫》期刊2014年02期）
袁钧,高文娜,汪万春,廖晓兰[8]（2013）在《玉米细菌性枯萎病菌LAMP检测方法的建立》一文中研究指出利用玉米细菌性枯萎病菌基因组DNA特有的保守区域设计LAMP(loop-mediated isothermal amplification)引物,通过优化其反应条件,建立了玉米细菌性枯萎病菌的LAMP检测体系。以多种参比菌DNA为模板对LAMP检测体系的特异性进行了验证,利用玉米细菌性枯萎病菌DNA溶液和菌液梯度稀释液对LAMP检测体系的灵敏度进行了验证。在特异性测试中,LAMP检测体系仅对玉米细菌性枯萎病菌进行扩增,对非靶标菌不产生扩增。LAMP检测体系DNA和菌体检测灵敏度分别达到了0.858×10-4ng/uL和45 CFU/mL。为玉米细菌性枯萎病菌的检测提供了一种新的、简便的、快速的检测手段。(本文来源于《植物检疫》期刊2013年05期）
袁钧[9]（2013）在《玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌LAMP检测方法的建立》一文中研究指出环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)是一种新的核酸扩增技术,具有操作简单、快速、灵敏度高、特异性强等优点,己在核酸研究、临床诊断和转基因食品检测等领域得到了广泛的应用,成为可以替代PCR的新的核酸扩增技术。玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌是两种重要的检疫性病原微生物,目前我国口岸的检疫中,主要采用传统的分离培养、生理生化鉴定、致病性试验和酶联免疫法等检验的方法,但均耗时长、效率低,不适合口岸要求。因此建立快速检测这两种致病菌的方法具有重要意义。本研究利用玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌基因组DNA特有的保守区域设计LAMP引物,通过优化其反应条件,建立了玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌的LAMP检测体系。以多种参比菌DNA为模板对LAMP检测体系的特异性进行了验证,利用玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌DNA溶液和菌液梯度稀释液对LAMP检测体系的灵敏度进行了验证。在特异性测试中,LAMP检测体系仅对玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌进行扩增,对非靶标菌不产生扩增。玉米细菌性枯萎病菌LAMP检测体系DNA和菌体检测灵敏度分别达到了0.858×10-4ng/uL和45CFU/mL。马铃薯环腐病菌LAMP检测体系DNA和菌体检测灵敏度分别达到了0.527×10-3ng/uL和150CFU/mL。为玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌的检测提供了一种新的简便、快速的检测手段。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2013-06-01）
齐玲玲,金涌,邹明强,梁赤周,田世民[10]（2010）在《胶体金免疫层析试纸条快速检测玉米细菌性枯萎病菌》一文中研究指出本文采用胶体金免疫层析技术成功建立了玉米细菌性枯萎病菌试纸条快速检测法。条件优化后的试纸条用于玉米细菌性枯萎病菌的检测,方法的检测限为106cfu/mL,其灵敏度与双抗夹心ELISA检测方法相当;交叉试验结果表明,该试纸条对玉米细菌性枯萎病菌有良好的特异性。本方法可作为玉米细菌性枯萎病菌日常监测的现场筛查手段,具有简便、快速、成本低廉、便于普及等优点,对保障我国农产品安全具有重要的现实意义。(本文来源于《检验检疫学刊》期刊2010年01期）
玉米细菌性枯萎病菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过菌体免疫小鼠获得高灵敏的高特异性单克隆抗体,并以此为基础建立一种快速、灵敏的单克隆抗体双抗体夹心法检测玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartill subsp.Stewartii)。通过小鼠脾脏融合实验获得3株单克隆抗体(12B4、10B1、11C2),并通过双抗体夹心法筛选配对细胞株,建立双抗体夹心法。最低检测限(LOD)为1.5×104cfu/m L,线性范围在4.57×105~1.11×108cfu/m L。该方法对玉米细菌性枯萎病菌具有很好的特异性,对玉米种子添加回收实验回收率为85.6%~90.2%,相对标准偏差低于5.0%。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
玉米细菌性枯萎病菌论文参考文献
[1].李志锋,冯建军,吴绍精,王忠文,程颖慧.基于锁式探针快速检测玉米细菌性枯萎病菌和内州萎蔫病菌研究[C].中国植物病理学会2017年学术年会论文集.2017
[2].孔德昭,彭娟,刘丽强,唐丽娟,匡华.基于酶联免疫反应的玉米细菌性枯萎病菌快速检测方法[J].食品与生物技术学报.2016
[3].李志锋,王忠文,冯建军,程颖慧,李一农.基于锁式探针技术快速检测玉米细菌性枯萎病菌和玉米内州萎蔫病菌[J].生物技术通讯.2016
[4].厉艳,邵秀玲,张京宣,王英超,封立平.玉米细菌性枯萎病菌EGase内切葡聚糖酶蛋白纯化研究初探[J].食品安全质量检测学报.2016
[5].封立平,倪新,吴兴海,伦才智,吴翠萍.玉米细菌性枯萎病菌的环介导恒温扩增(LAMP)检测方法[J].植物保护学报.2015
[6].杨金玲,黄大亮,李莉,刘彩虹,陈勇.玉米细菌性枯萎病菌纳米磁标记免疫层析检测试剂与试纸条[J].化学试剂.2015
[7].冯建军,刘杰,王飞,李秋枫,刘新娇.PMA结合实时荧光PCR进行玉米细菌性枯萎病菌细胞活性检测初步研究[J].植物检疫.2014
[8].袁钧,高文娜,汪万春,廖晓兰.玉米细菌性枯萎病菌LAMP检测方法的建立[J].植物检疫.2013
[9].袁钧.玉米细菌性枯萎病菌与马铃薯环腐病菌LAMP检测方法的建立[D].湖南农业大学.2013
[10].齐玲玲,金涌,邹明强,梁赤周,田世民.胶体金免疫层析试纸条快速检测玉米细菌性枯萎病菌[J].检验检疫学刊.2010
论文知识图
