血耳多糖的提取工艺、微观结构及其抗炎症作用

血耳多糖的提取工艺、微观结构及其抗炎症作用

论文摘要

采用单因素法和响应曲面法优化热水提取法提取血耳总糖的工艺条件,得到最佳提取条件:液料比124∶1、提取时间120 min和提取温度100℃,其总糖提取率可达到35.347%±0.551%。利用Sevage法、冻融法、透析和DEAE-Sepharose CL-6B柱层析等方法对血耳粗多糖进行分离纯化,得到均一组分(命名为TSP-Ⅱ)。TSP-Ⅱ的回收率为31.56%,相对分子质量是350 ku,糖含量和蛋白质含量分别为97.3%和1.05%。红外光谱显示TSP-II具有糖类物质的特征吸收峰。透射电子显微镜观察TSP-II的微观结构,显示TSP-II是无分支结构的多糖,糖链之间相互缠绕。通过1μg/mL脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7产生炎症因子(TNF-α、IL-6和COX-2)。经脂多糖诱导的细胞添加TSP-II(75,150μg/mL)后,3种炎症因子的m RNA表达量均明显降低,说明血耳多糖TSP-II具有良好的抗炎症作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器及设备
  •   1.3 试验方法
  •     1.3.1 单因素试验设计
  •     1.3.2 响应曲面法优化血耳总糖提取工艺
  •     1.3.3 分离纯化与均一性鉴定
  •     1.3.4 TSP-II的理化性质和微观结构分析方法
  •     1.3.5 抗炎症试验方法
  •       1.3.5. 1 RAW264.7细胞培养
  •       1.3.5. 2 总RNA的提取
  •       1.3.5. 3 反转录
  •       1.3.5. 4 实时荧光定量PCR反应
  • 2 结果与分析
  •   2.1 血耳总糖提取工艺优化
  •     2.1.1 单因素试验结果
  •     2.1.2 响应面优化试验结果
  •   2.2 血耳多糖的分离纯化与均一性鉴定
  •   2.3 TSP-II的性质与微观结构分析
  •   2.4 TSP-II抗炎症作用研究
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王昭晶,曹森,曾亚威,罗巅辉

    关键词: 血耳,响应曲面法,微观结构,抗炎症作用

    来源: 中国食品学报 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 华侨大学生物工程与技术系

    基金: 国家自然科学基金项目(31201314)

    分类号: TS255.1

    DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.01.013

    页码: 96-102

    总页数: 7

    文件大小: 388K

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