敲低PFKP联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir协同对肾透明细胞癌细胞Caki-1的抗肿瘤作用

敲低PFKP联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir协同对肾透明细胞癌细胞Caki-1的抗肿瘤作用

论文摘要

目的:研究敲低P型磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFKP)联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir对肾透明细胞癌Caki-1细胞的影响,并进一步探究其作用机制。方法:利用Western blot验证对照及PFKP shRNA敲低肾透明细胞癌细胞中PFKP的敲低效率,分别检测对照组(shCtrl)、PFKP敲低组、etomoxir组(shCtrl+etomoxir)、PFKP敲低联合etomoxir组的增殖曲线。使用Annexin-V/PI染色并用流式细胞检测对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的细胞死亡,研究PFKP敲低联合etomoxir对细胞存活的影响。分别检测对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的ATP水平与脂肪酸变化。结果:Western blot结果验证了PFKP的敲低效率。流式细胞检测显示,对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的平均细胞死亡率分别为1.1、1.9、13.9、31.3%。PFKP敲低联合etomoxir组Caki-1细胞的死亡率显著高于单纯PFKP敲低与etomoxir组(P<0.05)。PFKP敲低联合etomoxir组Caki-1细胞的ATP水平显著低于单纯PFKP敲低与etomoxir组(P<0.05)。Etomoxir的加入抑制了PFKP敲低引起的游离脂肪酸下降(P<0.05)。结论:PFKP敲低联合etomoxir对Caki-1细胞呈现协同的细胞毒抗肿瘤作用。

论文目录

  • 前言
  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验设计
  •   1.2 细胞系与培养
  •   1.3 Etomoxir处理
  •   1.4 Western blot
  •   1.5 Annexin-V/PI染色
  •   1.6 ATP检测
  •   1.7 脂肪酸检测
  •   1.8 细胞增殖实验
  •   1.9 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 PFKP敲低效果验证
  •   2.2 敲低PFKP联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir对肾透明细胞癌的作用
  •   2.3 敲低PFKP联合etomoxir显著下调细胞ATP水平
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王俊,王聪,徐超亮,鲁军,邵怡

    关键词: 肾透明细胞癌,细胞死亡,肿瘤代谢

    来源: 现代生物医学进展 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 泌尿科学,肿瘤学

    单位: 上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科

    基金: 上海交通大学",医工交叉基金",项目(YG2016MS20)

    分类号: R737.11

    DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.23.003

    页码: 4411-4414+4406

    总页数: 5

    文件大小: 1732K

    下载量: 61

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