利用引物探针序列构建转基因马铃薯检测阳性重组质粒及其验证

论文摘要

[目的]通过将特定转基因检测方法引物和探针序列重组拼接,并将重组序列连接至质粒中,验证其作为转基因检测阳性对照的可行性。[方法]通过搭桥PCR和全基因合成的方法制备阳性重组序列,验证阳性重组序列作为阳性对照品的可行性与阳性重组质粒的均一性、稳定性。[结果]通过将引物探针序列顺序拼接构建得到的阳性重组质粒的性状均一,在4和-20℃条件下均能稳定产生阳性结果。[结论]该种阳性重组质粒的构建方法能够满足转基因成分检测方法中阳性对照品的要求。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 阳性物质
•   1.2 试剂设备
•   1.3 NOS终止子基因阳性重组序列的搭桥PCR连接及验证
•   1.4 CaMV35S启动子基因与NOS终止子基因二元阳性重组序列的连接及验证
•   1.5 转基因马铃薯外源基因引物探针序列重组阳性质粒的构建及验证
•     1.5.1 基因马铃薯外源基因阳性重组序列的设计。
•     1.5.2 转基因马铃薯外源基因阳性重组质粒的正确性验证。
•     1.5.3 转基因马铃薯外源基因阳性重组质粒的均匀性验证。
•     1.5.4 转基因马铃薯外源基因阳性重组质粒的稳定性验证。
•     1.5.5 重组质粒进行转基因样品检测效果的验证。
• 2 结果与分析
•   2.1 NOS终止子基因阳性重组序列的搭桥PCR连接
•   2.2 二元阳性重组序列的连接
•   2.3 转基因马铃薯外源基因引物探针序列重组阳性质粒的构建及验证
• 3 讨论
•   3.1 通过引物探针序列重组阳性质粒的应用
•   3.2 存在的问题及改进方向

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨杰,李兰,戴莉,张江国,莫善明,徐新龙

关键词: 引物,探针序列,转基因检测,搭桥,阳性重组质粒

来源: 安徽农业科学 2019年23期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 阿拉山口海关技术中心

基金: 新疆维吾尔自治区国际合作项目(20166012)

分类号: Q943.2

页码: 213-218

总页数: 6

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