导读:本文包含了细粒棘球绦虫论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细粒,绦虫,抗原,基因,信息学,蛋白,树突。
细粒棘球绦虫论文文献综述
王芬,陈林,赵明才,刘家瑞,黎昆[1]（2019）在《细粒棘球绦虫Calpain蛋白的生物信息学分析》一文中研究指出目的采用生物信息学软件分析细粒棘球绦虫Calpain蛋白(EgCalpain)的结构与抗原表位,为研制基于Calpain的棘球蚴病疫苗提供依据。方法从NCBI核苷酸和蛋白质数据库下载EgCalpain的核苷酸和氨基酸序列,采用ProtParam、SignalP、TMHMM、Cell-Ploc等在线分析程序,结合DNAStar、DNAMAN等生物信息学软件分析、预测EgCalpain蛋白的理化性质、信号肽序列、跨膜结构域、亚细胞定位及抗原表位;采用Clustal omega程序对不同物种来源的Calpain蛋白进行多序列比对,并通过MEGA 6.06程序构建邻接树。结果 EgCalpain基因全长7 734 bp,包含15个外显子和14个内含子;EgCalpain基因编码蛋白由707个氨基酸组成,是一种稳定蛋白,不含有信号肽序列和跨膜区域,可能定位于细胞质。EgCalpain蛋白含有5个T、B细胞联合表位,分别为267-299 aa、328-356 aa、486-507 aa、546-567 aa、648-662 aa。EgCalpain蛋白与曼氏血吸虫Calpain的亲缘关系较近,与人、牛、羊Calpain的亲缘关系较远。结论 EgCalpain蛋白含有5个T、B细胞联合表位且与人、牛、羊Calpain的亲缘关系较远,作为棘球蚴病疫苗进行免疫时,可能具有良好的免疫保护作用。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年10期）
王正荣,张艳艳,马勋,刘乙,徐梦飞[2]（2019）在《细粒棘球绦虫原头蚴lncRNA表达谱分析》一文中研究指出本研究旨在解析lncRNA在细粒棘球绦虫原头蚴中的表达谱特性,为进一步揭示lncRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用及调控机制提供理论依据。从患病绵羊肝无菌采集细粒棘球绦虫原头蚴,提取总RNA,构建原头蚴lncRNA文库,利用RNA sequencing技术进行测序分析。结果表明,首次从细粒棘球绦虫原头蚴中鉴定出609个新的lncRNA分子。其中intergenic lncRNA有431个,intronic lncRNA有11个,anti-sense lncRNA有68个,sence lncRNA有99个。GO分析表明,其表达量前200的lncRNA分子主要与MAP激酶的负调控、SMC结合复合物、IMP的生物合成以及乙酰转移酶激活剂活性相关。KEGG分析结果表明,其表达量前200的lncRNA分子主要与细胞凋亡、萜类骨架生物合成、碳代谢以及背腹轴形成相关。cis分析结果表明,在这609个新的lncRNA分子中,与虫体Wnt信号通路、Hedgehog信号通路、NF-κB信号通路、cAMP信号通路、Notch信号通路、胆酸盐信号通路以及背腹轴信号通路相关的lncRNA分子分别有79、31、10、128、43、84和73个。qRT-PCR的验证结果表明,表达量前10的lncRNA分子与测序结果一致。RNA荧光探针原位杂交结果表明,高表达的lncRNA分子在细粒棘球绦虫原头蚴吸盘以及表皮均有表达。综上所述,本研究首次解析了细粒棘球绦虫原头蚴中lncRNA的表达谱特性,丰富了细粒棘球绦虫lncRNA的数据,为进一步解析lncRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用奠定了基础。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2019年09期）
魏玉环,胡媛,曹建平[3]（2019）在《细粒棘球绦虫基因多态性的研究进展》一文中研究指出细粒棘球绦虫的幼虫寄生于中间宿主(人、牛、羊等)肝、肺等脏器后发展成包囊,压迫、刺激宿主脏器,引起细粒棘球蚴病,严重危害人体健康和畜牧业发展。全球患细粒棘球蚴病的人数超过100万,被世界卫生组织列为要求重点关注的热带病之一。随着分子生物学技术的发展,目前把细粒棘球绦虫分为9个基因型(G1、 G3～G8、 G10和狮株),每种基因型的地区分布、宿主种类、致病性等不尽相同。该综述主要对全球细粒棘球绦虫基因多态性的研究进展进行综述,并对发展方向进行展望,为进一步开展细粒棘球蚴病防治研究提供数据支撑。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年04期）
张超,胡尊楠,马忠臣,何金科,徐明国[4]（2019）在《细粒棘球绦虫Eg95-5蛋白生物信息学分析及鉴定》一文中研究指出棘球蚴病(echinococcosis),又称包虫病(cysticechinococcosis,CE),是由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus, Eg)的中绦期幼虫感染动物机体引起的一种人畜共患寄生虫病[1]。目前包虫病的控制主要以免疫预防为主,Eg95是细粒棘球绦虫六钩蚴阶段的蛋白,被认为是理想的保护性抗原。研究思路及目的:本实验主要包括四部分内容,试验采用生物信息学分析、p MD19-T-Eg95-5与p ET30a-Eg95-5载体的构建、Eg95-5蛋白诱导表达及纯化、免疫印迹技术(Western-blot)的方法对Eg95-5蛋白序列和反应原性进行研究。为以Eg95-5蛋白为靶标的包虫病诊断提供新的依据,旨在研发新型诊断疫苗。材料方法:通过查找基因序列、设计引物,利用超纯RNA提取试剂盒提取成虫RNA,反转录成c DNA,以合成的c DNA为模板进行Eg95-5基因的PCR扩增,回收目的片段与p MD19-T载体连接,通过提质粒双酶切后与p ET-30a载体连接,经转化、涂板、菌液PCR验证,测序成功后将构建好的p ET30a-Eg95-5质粒转化到大肠杆菌DE3感受态细胞中,然后接种至LB液体培养基(加入硫酸卡那霉素)中,进行蛋白的诱导表达及纯化,纯化好的蛋白经过SDS-PAGE后,转至NC膜,然后用5%脱脂奶粉室温封闭1 h,包虫病羊血清为一抗,兔抗绵羊Ig G-HRP为二抗,杂交炉孵育1 h,DAB显色。结果及结论:Eg95-5蛋白无信号肽和跨膜结构,蛋白含有6个抗原决定簇和12个磷酸化位点,二级结构以无规则卷曲(39.25%)、延伸链(33.64%)和α螺旋(21.50%)为主,并获得了Eg95-5的叁级结构模型;且成功克隆并构建了Eg95-5重组表达载体,获得了高纯度的Eg95-5蛋白,蛋白可与患病动物血清发生特异性反应。说明Eg95-5蛋白结构较为保守,是无信号肽和非跨膜蛋白,作为抗原可以引起良好的免疫反应。讨论:本文通过生物信息学分析发现,Eg95-5蛋白具有亲水性、无跨膜结构、无信号肽,对其抗原表位分析发现其含有一定数量的抗原决定簇,暗示该蛋白可作为抗原引起免疫反应,因此本研究为亚单位疫苗研发奠定基础。本研究通过构建p ET30a-Eg95-5重组表达载体,成功获得Eg95-5蛋白,通过Western-blot试验证明Eg95-5蛋白可以与患病动物阳性血清发生反应,暗示Eg95-5蛋白在一定程度上可以用于包虫病的检测。本试验对15℃低温诱导和37℃诱导进行了比较研究,发现在15℃条件下诱导16h,目的蛋白可表达于上清溶液中,且不同浓度的咪唑对目的蛋白的洗脱效果不同,这为包虫病亚单位疫苗的开发提供了数据支撑。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
郝力力,阳爱国,袁东波,郭莉,侯巍[5]（2019）在《普境安对细粒棘球绦虫虫卵的作用效果》一文中研究指出为研究环境改良剂普境安对细粒棘球绦虫虫卵的作用效果,采用不同剂量组/时间段对阳性犬粪样本进行了处理。结果表明,100 g·m~(-2)作用12 h和24 h对虫卵抑制效果最明显。结合四川省甘孜州自然环境特点,建议采用100 g·m~(-2)作用24 h,可显着抑制虫卵活力,降低人畜感染包虫风险。(本文来源于《浙江农业科学》期刊2019年07期）
徐梦飞,卢平萍,马勋,张艳艳,王炜烨[6]（2019）在《细粒棘球绦虫脂肪酸去饱和酶1基因序列及不同发育阶段表达分析》一文中研究指出旨在寻找细粒棘球绦虫发育相关基因,为预防和治疗细粒棘球绦虫引起的包虫病而制定相应的措施提供理论基础。通过分析细粒棘球绦虫原头蚴高通量转录组测序数据文库,对Unigene进行KEGG通路分析,筛选出一个脂肪代谢通路,并筛选出该通路中主要的调控基因脂肪酸去饱和酶1。通过对Eg-FADS 1基因的PCR扩增,分析其核苷酸序列及氨基酸序列,用实时荧光定量PCR和全量组织原位杂交检测Eg-FADS 1基因在不同发育阶段的表达情况。结果显示,该基因具有完整的开放阅读框,cDNA全长为819 bp,编码272个氨基酸,预测该蛋白分子质量为30.98 ku,等电点为7.10。实时荧光定量PCR结果表明,Eg-FADS1基因在原头蚴及成虫阶段均有表达,并且该基因在成虫阶段极显着高于原头蚴阶段的表达量。全量组织原位杂交结果显示,Eg-FADS 1 mRNA在原头蚴及成虫阶段分布广泛。提示Eg-FADS 1具有生物防治作用,值得进一步研究。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年06期）
徐梦飞[7]（2019）在《细粒棘球绦虫原头蚴感染BMDC后microRNA差异表达分析及功能初步研究》一文中研究指出细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.granulosus),是一种危害严重的全球性人兽共患寄生虫病病原,严重危害人类健康和畜牧业的发展。近年来,由于微小RNA(microRNA,miRNA)在基因表达调控方面发挥着重要的作用而成为研究的热点之一。研究表明,miRNA在寄生虫-宿主相互作用过程中发挥着重要作用,miRNA的调控作用能够帮助寄生虫对宿主的免疫反应进行逃避。因此,本研究通过高通量转录组测序,构建细粒棘球绦虫原头蚴(protoscoleces,PSC)感染小鼠髓系树突状细胞(mouse bone myeloid dendritic cells,BMDC)不同时间点的miRNA表达谱,筛选差异表达miRNA,对其进行靶基因预测,分析差异表达miRNA靶基因富集的细胞通路和发挥的功能,进而筛选BMDC中可能与免疫应答相关miRNA和PSC中可能与免疫逃避相关miRNA。本研究从miRNA角度探究了PSC与宿主细胞间的相互作用,为揭示E.granulosus的致病机制提供了新的思路,也为E.granulosus的防治提供了新的视角。目的:(1)构建PSC感染BMDC不同时间点的miRNA文库;(2)分析不同时间点差异表达miRNA靶基因富集的通路和参与的细胞过程,筛选PSC文库中可能与免疫逃避相关和BMDC文库中可能与免疫应答相关差异表达miRNA,为进一步研究miRNA在E.granulosus-宿主互作中的作用机制奠定基础;(3)从BMDC差异表达miRNA中筛选可能与免疫应答相关miRNA,对其功能进行初步研究。方法:(1)分别在PSC感染BMDC后6 h、12 h、24 h取样。分别提取12个总RNA样本:PX_6(6 h实验组中的BMDC)、PX_12、PX_24、PBS_6(6 h对照组中的BMDC)、PBS_12、PBS_24、PSC_6(6 h实验组中的PSC)、PSC_12、PSC_24、Eg_6(6 h对照组中的PSC)、Eg_12和Eg_24。将质检合格的样本进行miRNA文库构建,在Illumina HiSeq~(TM)2500/MiSeq测序平台测序,对原始数据进行质量检测并通过数据过滤获得高质量读段。(2)以qvalue<0.01且|log2(foldchange)|>1为标准筛选差异表达miRNA,通过生物信息学方法对其进行靶基因预测,利用GOseq R软件包和KOBAS软件对预测的靶基因进行基因富集分析,筛选PSC文库中可能与免疫逃避相关和BMDC文库中可能与免疫应答相关差异表达miRNA。随机挑选差异表达miRNA,通过qPCR验证与高通量测序结果的一致性。(3)通过生物信息学分析,选取BMDC文库中可能与免疫应答相关的mmu-miR-301a-5p。通过双荧光素酶报告基因检测mmu-miR-301a-5p能否与预测靶基因Heat shock 70 kDa protein 4(Hspa4)的mRNA 3′-UTR结合。通过将化学合成的mmu-miR-301a-5p mimics、mimics negative control(NC)、inhibitor和inhibitor NC转染BMDC,随后使用qPCR检测各组HSPA4蛋白的表达量,从而验证mmu-miR-301a-5p与Hspa4间的调控关系。使用PSC感染转染mimics后的BMDC,通过ELISA对细胞因子含量进行检测。结果:(1)建立了6个BMDC miRNA文库,以及6个PSC miRNA文库。从BMDC的6个文库中共获得3.777 Gb数据,72,489,485个原始读段(raw reads),质量分析各个文库的Q20和Q30分别高于98%和97%,测序错误率均为0.01%。在PSC的6个miRNA文库中共测得3.536 Gb数据,70,748,082个raw reads,各个文库的Q20和Q30分别高于98%和96%,测序错误率均为0.01%。文库质量评估合格,符合进行后续研究的要求;经过数据过滤,共获得140,455,720个高质量读段(clean reads)。(2)实验组与对照组相比,PSC中叁个时间点分别有30、34、32个差异表达miRNA,BMDC中分别有9、16、58个miRNA发生差异表达。GO结果显示,PSC中差异miRNA预测靶基因多富集在生物学功能类中,如蛋白结合(protein binding)等;BMDC中差异miRNA预测靶基因主要富集在细胞组分类中,如膜上细胞器(membrane-bounded organelle)等。KEGG分析发现,PSC差异miRNA预测靶基因多富集在丝裂原活化蛋白激酶信号通路(MAPK signaling pathway)等通路中;BMDC差异miRNA预测靶基因主要富集在活化B细胞的核因子κ-轻链增强子信号通路(NF-kappa B signaling pathway)等通路中。PSC中可能与免疫逃避相关差异miRNA有egr-miR-2c-5p,egr-miR-219,egr-miR-71等,BMDC中可能与免疫应答相关差异miRNA有mmu-miR-3074-2-3p,mmu-miR-193a-3p,mmu-miR-301a-5p等。qPCR验证结果显示挑选的miRNA差异表达结果与高通量测序结果一致。(3)双荧光素酶检测结果显示,与inhibitor组、inhibitor NC组、mimics NC组相比,mimics组中荧光素酶活性显着较低(P<0.05)。mimics转染BMDC后,通过qPCR对Hspa4的表达进行检测,与其他组比较,mimics组中Hspa4基因的表达量显着较低(P<0.05)。mmu-miR-301a-5p在PSC感染BMDC初期(24 h)能够促进Th2型细胞因子IL-4和IL-10的分泌。结论:(1)成功构建PSC感染BMDC不同时间点的miRNA文库,文库质量评估合格,符合进行后续研究的要求。(2)在PSC感染过程中,PSC与BMDC中miRNA的表达均发生了迅速而显着的变化,特别是PSC中可能与免疫逃避相关的miRNA与BMDC中可能与免疫应答相关的miRNA的表达,推测miRNA可能在E.granulosus-宿主间互作中起着重要的调控作用。(3)Hspa4基因是mmu-miR-301a-5p靶基因之一;推测mmu-miR-301a-5p在PSC感染BMDC初期(24 h)有利于E.granulosus的免疫逃避及持续性感染。(本文来源于《石河子大学》期刊2019-06-01）
齐文静,何黎,王甜,郑雪婷,郭宝平[8]（2019）在《细粒棘球绦虫EgM123蛋白融合霍乱毒素B亚单位疫苗的构建表达及免疫原性研究》一文中研究指出目的构建和表达细粒棘球绦虫成虫特异表达EgM123基因与霍乱毒素B的融合蛋白(CTB-EgM123);并确定CTB-EgM123蛋白的抗原性。方法将合成EgM123基因序列连接到pET28a/CTB原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中。利用IPTG诱导目的基因的表达;用SDS-PAGE及Western-Blotting对表达蛋白进行分析和鉴定;用纯化蛋白免疫小鼠及犬,用ELISA方法对小鼠及犬的血清抗体效价和肠黏液的抗体亚类进行分析。结果 PCR和测序确定CTB-EgM123基因片段长度为804 bp,pET28a/CTB-EgM123原核表达阅读框序列正确。在37℃条件下,经IPTG 0.4 mmol/L诱导5 h,获得CTB-EgM123高表达的包涵体蛋白,分子质量为37 kDa。免疫小鼠结果表明复性CTB-EgM123蛋白具较好免疫原性,抗体效价>320 000;以IgG2a为主。检测免疫犬血清效价,结果发现用融合蛋白免疫后的犬血清抗体效价>64 000,效价高于EgM123免疫组(t=0.0064,P<0.05);且在4周时,抗体呈上升趋势,并能较长时间维持抗体水平。结论原核表达载体pET28a/CTB-EgM123在大肠杆菌中成功表达,纯化蛋白接种小鼠和犬表明具有高的抗原性。表明CTB可以增强蛋白的免疫原性,并刺激小鼠和犬体内产生高水平的体液和黏膜免疫。本研究为研发犬用包虫病疫苗奠定了基础。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2019年07期）
刘文英,李军,王甜,郑雪婷,郭刚[9]（2019）在《胰蛋白酶和胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴外翻和成虫发育的影响》一文中研究指出目的探讨胰蛋白酶和犬胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴外翻和体外成虫培养发育的影响。方法无菌条件下采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴,用磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗,经胃蛋白酶处理后,用0.1%亚甲基蓝染色,检测虫体活率>98%的原头蚴用不同浓度的犬胆汁(0.005%～5%)和胰蛋白酶(0.01%～5%)及纯水刺激处理,在不同的培养条件及时间点采集样品,观察原头蚴的死亡率及头节外翻情况。结果当胆汁终浓度为0.02%时,培养48 h头节外翻率最高,可达62.7%;原头蚴可以耐受0.25%的胰蛋白酶,但其浓度为0.5%,原头蚴培养48 h时,死亡率为13.7%。研究发现,原头蚴培养的前3 d,其培养基中添加0.25%的胰蛋白酶和0.02%的犬胆汁,培养3 d后去除胰蛋白酶,仅在培养基中加入0.02%的犬胆汁原头蚴可以保持高的成虫发育率,达60%以上。原头蚴经两次在室温下30 s的刺激,原头蚴外翻率达到100%,但培养24 h后外翻的原头蚴回翻,外翻率与对照无差别(t=0.27,P=0.79)。结论犬胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴的外翻和成虫的维持和发育是必须的。适量(0.25%)胰蛋白酶有利于已外翻原头蚴成虫性状发育。仅纯水刺激原头蚴,可以使原头蚴外翻,但不能提高后成虫的发育率。(本文来源于《新疆医科大学学报》期刊2019年05期）
李锴[10]（2019）在《细粒棘球绦虫AQP-9多肽抗体的制备及免疫定位》一文中研究指出目的:建立经济、高效的非疫区实验室细粒棘球蚴生发细胞的原代培养方法。制备细粒棘球绦虫水通道蛋白9的多克隆抗体,确定其在细粒棘球蚴生发细胞内的细胞定位及在原头蚴、棘球蚴囊壁中的组织分布。为进一步研究细粒棘球蚴水通道蛋白与囊液形成之间的关系奠定基础。方法:1.0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液对鼠源次生细粒棘球蚴囊壁消化10~30 min后进行贴壁,探索最佳消化时间。2.倒置显微镜下观察以最佳消化时间消化后的细粒棘球蚴囊壁残片贴壁培养法和单纯组织贴壁培养法行生发细胞培养的细胞形态改变并对比生长曲线。3.免疫荧光鉴定经残片培养法获得的细粒棘球蚴生发细胞。4.行经残片培养法获得的细粒棘球蚴生发细胞的小鼠腹腔返种试验并取病变组织行HE染色后观察。5.利用生物信息学的方法预测Eg AQP 9的亚细胞定位。6.利用生物信息学的方法分析并设计EgAQP 9序列免疫多肽并免疫新西兰兔。7.SDS-PAGE检测制备的Eg AQP 9多肽抗体的纯化效果,酶联免疫吸附试验测定该多抗滴度。8.免疫印迹法鉴定EgAQP 9蛋白。免疫荧光检测EgAQP 9在细粒棘球蚴生发细胞内的细胞定位,免疫组化检测EgAQP 9在原头蚴、棘球蚴囊壁中的组织分布。结果:1.10 min为胰蛋白酶溶液的最佳消化时长,消化后培养第2~4天后棘球蚴囊壁残片边缘游出的生发细胞具备较好的完整性。2.最佳消化时间条件下的残片培养法和单纯组织贴壁法的生长曲线均似“S”形,两种培养方法的生发曲线的对数生长期间隔相近,然而残片培养法细胞的增殖水平显着高于单纯囊壁组织贴壁培养法。3.免疫荧光试验证实残片培养法得到的细胞含有细粒棘球蚴抗原成分。4.残片培养法培养的细胞返种试验可观察到小鼠腹腔有新生细粒棘球蚴囊泡结构,并且HE染色后于光学显微镜下能发现发育中的细粒棘球蚴囊泡的囊壁生发层与角皮层。5.利用生物信息学的方法预测EgAQP 9的亚细胞定位显示该蛋白主要分布于细胞膜、线粒体和内质网。6.利用生物信息学的方法分析、设计EgAQP 9多肽的氨基酸序列:ASEEHSTDEDEDTEA,利用合成的多肽免疫新西兰兔制备多肽抗体。7.SDS-PAGE显示研制的EgAQP 9多肽抗体的纯度较好。ELISA测定该多抗滴度效价达1:256 000。8.免疫印迹显示条带所在位置与EgAQP 9分子量大小基本吻合。免疫荧光显示天然的EgAQP 9主要分布于细粒棘球蚴生发细胞的胞质、胞膜中,与生信预测结果基本吻合。免疫组化检测EgAQP 9主要分布于原头蚴虫体表面,细粒棘球蚴鼠囊泡及感染细粒棘球蚴羊囊泡的生发层。结论:1.0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化鼠源次生棘球蚴囊壁10 min,其残片贴壁培养可成功培养出活性正常的生发细胞。该方法充分利用保种小鼠体内的次生棘球蚴组织,可为细粒棘球蚴生发细胞的相关研究奠定基础。2.生物信息学软件分析EgAQP 9的氨基酸序列、设计并合成EgAQP 9序列免疫多肽,免疫新西兰兔制备EgAQP 9多肽抗体。实验确定EgAQP 9蛋白在细粒棘球蚴生发细胞内、原头蚴和鼠源次生细粒棘球蚴囊壁、羊源棘球蚴囊壁中的分布,可为进一步研究EgAQP 9可能在囊化过程中的囊液生成过程中发挥的作用及细粒棘球绦虫水通道蛋白的功能代谢特点做铺垫。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
细粒棘球绦虫论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究旨在解析lncRNA在细粒棘球绦虫原头蚴中的表达谱特性,为进一步揭示lncRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用及调控机制提供理论依据。从患病绵羊肝无菌采集细粒棘球绦虫原头蚴,提取总RNA,构建原头蚴lncRNA文库,利用RNA sequencing技术进行测序分析。结果表明,首次从细粒棘球绦虫原头蚴中鉴定出609个新的lncRNA分子。其中intergenic lncRNA有431个,intronic lncRNA有11个,anti-sense lncRNA有68个,sence lncRNA有99个。GO分析表明,其表达量前200的lncRNA分子主要与MAP激酶的负调控、SMC结合复合物、IMP的生物合成以及乙酰转移酶激活剂活性相关。KEGG分析结果表明,其表达量前200的lncRNA分子主要与细胞凋亡、萜类骨架生物合成、碳代谢以及背腹轴形成相关。cis分析结果表明,在这609个新的lncRNA分子中,与虫体Wnt信号通路、Hedgehog信号通路、NF-κB信号通路、cAMP信号通路、Notch信号通路、胆酸盐信号通路以及背腹轴信号通路相关的lncRNA分子分别有79、31、10、128、43、84和73个。qRT-PCR的验证结果表明,表达量前10的lncRNA分子与测序结果一致。RNA荧光探针原位杂交结果表明,高表达的lncRNA分子在细粒棘球绦虫原头蚴吸盘以及表皮均有表达。综上所述,本研究首次解析了细粒棘球绦虫原头蚴中lncRNA的表达谱特性,丰富了细粒棘球绦虫lncRNA的数据,为进一步解析lncRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细粒棘球绦虫论文参考文献
[1].王芬,陈林,赵明才,刘家瑞,黎昆.细粒棘球绦虫Calpain蛋白的生物信息学分析[J].中国病原生物学杂志.2019
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[3].魏玉环,胡媛,曹建平.细粒棘球绦虫基因多态性的研究进展[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2019
[4].张超,胡尊楠,马忠臣,何金科,徐明国.细粒棘球绦虫Eg95-5蛋白生物信息学分析及鉴定[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[5].郝力力,阳爱国,袁东波,郭莉,侯巍.普境安对细粒棘球绦虫虫卵的作用效果[J].浙江农业科学.2019
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[8].齐文静,何黎,王甜,郑雪婷,郭宝平.细粒棘球绦虫EgM123蛋白融合霍乱毒素B亚单位疫苗的构建表达及免疫原性研究[J].中国人兽共患病学报.2019
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论文知识图
