导读:本文包含了葡萄球菌肠毒素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:葡萄球菌,毒素,金黄色,耐药性,荧光,基因,蛋白。
葡萄球菌肠毒素论文文献综述
章海通,邢家溧,傅晓,王绍辉,承海[1](2019)在《食源性金黄色葡萄球菌产肠毒素情况及耐药性分析》一文中研究指出为了解日常检测分离株产肠毒素和耐药情况,探讨食源性金黄色葡萄球菌产毒素的类型及分布状况,研究其耐药特性,对本实验室2016年~2017年日常食品检测中的分离株,分别用全自动荧光酶联免疫法检测肠毒素总量和酶联免疫吸附法对肠毒素SEA~SEE进行分型,并用全自动微生物鉴定药敏分析系统进行药敏试验。结果表明,370份食品中分离到的29株金黄色葡萄球菌,产肠毒素的有16株,阳性率为55.2%,其中食物中毒分离株5株都为肠毒素阳性。产2种及以上肠毒素的菌株为12株,占41.4%。A型~E型常见肠毒素都有检出,其中产SEE的菌株最多,有12株,占41.4%,产SEA的菌株次之,为11株。29株食源性金黄色葡萄球菌对庆大霉素、妥布霉素、青霉素、安苄西林、苯唑西林、阿莫西林-克拉维酸、复方新诺名、克林霉素、红霉素、利福平、四环素均有不同程度的耐药,并出现多重耐药性,其中对青霉素和安苄西林的耐药率最高,均为82.8%,其次为红霉素44.8%。该研究的食品监测中分离到的金黄色葡萄球菌其产肠毒素率较高,主要的类型为SEE和SEA。而且分离得到的食源性金黄色葡萄球菌存在不同程度的耐药性和多重耐药现象,建议从各个环节加强监测,降低因耐药菌带来的食品安全风险。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2019年20期)
郑玉玲,欧阳譞,黄文华,刘鹏,孔德聪[2](2019)在《金黄色葡萄球菌肠毒素阵列ELISA检测方法的建立及评价》一文中研究指出目的为实现对5种经典肠毒素的准确、快速鉴定及分型,本研究基于ELISA和芯片技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA(Array-ELISA)检测方法。方法通过原核表达、亲和纯化制备SE蛋白,利用杂交瘤腹腔注射制备腹水,纯化SE单克隆抗体,通过ELISA对抗体的灵敏度、特异性进行评价,点制Array-ELISA阵列,评价Array-ELISA对SE检测的灵敏度和特异性。结果采用Array-ELISA,在PBS中SE的检测限除葡萄球菌肠毒素C(SEC)为10 ng/mL外,其余均为0.0001 ng/mL,液态牛奶中SE的检测限为(0.001~10)ng/mL。在PBS和牛奶中SE检测的特异性均为100%,各型SE之间无交叉反应。同时显示与肉毒毒素也无交叉反应。结论成功建立Array-ELISA检测方法,能够灵敏、准确鉴定同一份样本中5种经典SE。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年08期)
陈镜如,梁惠,陈欣林,石明,黎诚耀[3](2019)在《金黄色葡萄球菌肠毒素C促进异基因骨髓移植小鼠早期T细胞重建》一文中研究指出目的通过建立异基因骨髓移植(allogeneic bone marrow transplantation,allo-BMT)小鼠模型联合腹腔给药,探讨金黄色葡萄球菌肠毒素C(staphylococcal enterotoxin C,SEC)对allo-BMT小鼠的T细胞早期重建的影响。方法以BALB/C雄性小鼠为受鼠,C57BL/6雄性小鼠为供鼠,在移植前12 h对受鼠进行全身性照射的预处理,进行异基因骨髓内骨髓移植(intra-bone marrow bone marrow transplantation,IBM-BMT)后将其随机分为两组腹腔给药。实验组给予SEC 100μL/(g·d),对照组给予同剂量的生理盐水,每组10只。每天检测受鼠的体质量变化情况,并于移植2周后应用流式细胞仪检测两组外周血及脾脏T淋巴细胞重建情况,采用ELISA检测血浆IFN-γ、IL-2、TNF-α的分泌水平。结果实验组、对照组外周血CD8~+T细胞比例(12.63±1.33)%、(6.67±0.53)%,组间差异有统计学意义(P <0.01)。实验组脾脏和外周血的CD4~+T细胞比例分别为(1.798±0.110)%、(1.470±0.075)%,高于对照组(1.418±0.069)%、(1.112±0.064)%,差异有统计学意义(P <0.05)。实验组血浆中分泌的细胞因子IFN-γ、IL-2和TNF-α水平分别为(383.7±49.22)pg/mL、(17.49±1.434)pg/mL和(144.9±14.38)pg/mL,高于对照组(230.0±13.17)pg/mL、(12.38±0.759)pg/mL和(102.0±7.58)pg/mL,组间差异有统计学意义(P <0.05)。结论腹腔注射SEC能有效促进移植后T细胞早期重建。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2019年15期)
郭鹏利,路云龙,李想,李丽华,任孝茹[4](2019)在《基于纳米抗体的酶联免疫吸附法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B》一文中研究指出在前期已获得抗金黄色葡萄球菌肠毒素B (Staphylococcal enterotoxin B,SEB)纳米抗体的基础上,建立一种用于检测食品中SEB的酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),为食品及农产品质量监管提供技术支持。优化表达条件后,通过大肠杆菌原核表达获得抗SEB的纳米抗体B7;以纳米抗体B7作为捕获抗体,以噬菌体展示的抗SEB纳米抗体B6为检测识别元件,建立夹心ELISA方法;以牛奶、牛肉及西瓜汁为样本对其进行方法学评价。结果显示,纳米抗体B7在大肠杆菌中成功表达,表达量为6. 2 mg/L;该方法在16~1 024 ng/m L具有良好的线性关系(R2=0. 990 4),最低检出限为(9. 58±0. 07) ng/m L;该方法与SEC有42. 18%的交叉,与SEA及另外3株金黄色葡萄球菌无明显交叉;牛奶、牛肉和西瓜汁的加标回收率分别为87. 26%~108. 43%,79. 36%~106. 56%和83. 81%~99. 43%。该方法以纳米抗体作为识别元件,可应用于实际食品及农产品中的SEB高灵敏检测,具有广阔的应用前景。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年20期)
张彦斌,范鑫,朱叶青,张宏博[5](2019)在《食品中金黄色葡萄球菌肠毒素分子检测方法探索》一文中研究指出金黄色葡萄球菌一般只能在固定生长条件下产生肠毒素,与营养成分,温度,水分活度,pH值等有关。金黄色葡萄球菌可产生多种毒素,引起中毒。金黄色葡萄球菌生四种溶血毒素,α,β,γ,δ溶血毒素,可引起血小板白细胞溶酶体破坏。金黄色葡萄球菌广泛存在自然中,水,土壤以及人类和动物排泄物。如果由于生产者操作不当而导致生产和销售过程中的食物可能被金黄色葡萄球菌污染。(本文来源于《临床医药文献电子杂志》期刊2019年54期)
张力文,赵俊清,郑玉玲,律清宇,姜永强[6](2019)在《AlphaLISA检测金黄色葡萄球菌肠毒素E方法的建立》一文中研究指出目的:利用AlphaLISA技术,建立新型均相检测方法,对金黄色葡萄球菌肠毒素E(SEE)进行检测。方法:采用2种SEE抗体建立AlphaLISA检测方法,羊抗肠毒多克隆抗体同受体微球偶联,SEE小鼠单克隆抗体标记生物素,并同偶联了亲和素的供体微球连接,3种组分与待测抗原形成双抗体夹心结构,680 nm的光激发供体微球产生能量,将周围反应体系中的氧分子转变为激发态,并将能量传递给受体微球,产生520~620 nm的荧光,荧光信号与抗原浓度正相关。对该方法的反应体系进行优化,验证其重复性、敏感性和特异性,并采用该方法检测菌液上清和食品模拟样本。结果:所建立的AlphaLISA检测方法重复性较好,批间变异系数和批内变异系数皆小于10%;检测SEE的灵敏度可以达到100 pg/mL,并与其他几种毒素均无交叉反应,具有较好的特异性。该方法也能够准确地对金黄色葡萄球菌菌液上清中的SEE进行检测,对食品模拟样本的检测也有较好的灵敏度。结论:建立了检测SEE的AlphaLISA方法。该方法均相免洗,操作便捷,用时短,灵敏度更高,可对菌液上清和不同食品模拟样本中的SEE进行检测。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2019年03期)
陈欣林,施明杰,林泽桁,张玉明,石明[7](2019)在《金黄色葡萄球菌肠毒素C及其突变体在抗肿瘤和骨科治疗中的应用进展》一文中研究指出金黄色葡萄球菌肠毒素C(SEC)是一种由金黄色葡萄球菌产生的超抗原,具有强大的T细胞活化增殖能力,中国SEC生物制剂(金葡素注射液)应用于临床抗肿瘤及骨科疾病的治疗。但SEC作为一种天然肠毒素,具有一定的免疫毒性,可导致发热、呕吐、腹泻等不良反应,一定程度上限制了金葡素注射液的临床应用。为提高SEC的超抗原特性,减少毒性,现已开发出多种SEC突变体蛋白,未来可生产出更安全、高效、低毒性或无毒性的生物制剂,扩大SEC的临床应用范围,治疗更多疾病。(本文来源于《医学综述》期刊2019年10期)
李孟寒,李莹,闫琳,杨舒然,李凤琴[8](2019)在《中国食源性金黄色葡萄球菌耐药及肠毒素特征》一文中研究指出目的了解2017年中国食源性金黄色葡萄球菌(金葡菌)耐药和肠毒素特征。方法 2017年收集全国29个省市食源性金葡菌397株,并测定其抗生素耐药性、肠毒素基因和产肠毒素情况。结果 96.5%(383/397)金葡菌对受试的13种抗生素呈不同程度耐药,其中青霉素(PEN)耐药率最高(94.7%);30.2%(120/397)金葡菌为多重耐药,米面制品和面包来源金葡菌多重耐药率最高,分别为37.4%和37.3%;共存在72种耐药谱。284株金葡菌检出了20种肠毒素基因,其中sea、seb、sec和sed等常见肠毒素基因检出82株(20.7%,82/397),其中sea(14.9%)基因检出率明显高于seb~sed基因(χ~2=74.534,P <0.05),90%以上的菌株均能产生SE-A~SE-D肠毒素。结论 2017年中国29个省市食源性金葡菌耐药水平较高,多重耐药现象严重,且同时携带多种肠毒素基因并能产肠毒素。(本文来源于《中国公共卫生》期刊2019年05期)
赵俊清[9](2019)在《AlphaLISA检测葡萄球菌肠毒素B方法的建立及荧光功能化微球的制备》一文中研究指出葡萄球菌肠毒素B(SEB)是金黄色葡萄球菌(金葡菌)产生的一种超抗原,具有极大的毒性,可以在很低的浓度下激活大量的CD4~+T细胞。而细胞因子的大量产生会引发“细胞因子风暴”,进而导致急性毒性效应。作为一种重要的肠毒素,SEB不仅是食物中毒的主要原因,也是潜在的生物威胁,可以被发展成一种气溶胶化的生物武器。同时,因为SEB具有较大的毒性、稳定性和易获得性,美国国家疾病控制中心将其列为生化武器清单上的重要致病毒素。因此,对SEB进行快速准确的检测是非常重要和迫切的。AlphaLISA是一种基于两个微球的技术。当这两种微球彼此接近时,用波长为680 nm的光激发供体微球产生能量,将周围反应体系中的氧分子转变为激发态,并将能量传递给受体微球,最终产生520~620 nm的荧光。该技术操作便捷,反应用时少,均相免洗,并具有较高的灵敏度。本实验建立了AlphaLISA检测SEB的方法。对结果进行分析,采用非线性回归法进行AlphaLISA标准曲线的建立,缓冲液中SEB检测的线性范围为25 pg/mL至25 ng/mL,LOD为25 pg/mL,具有较高的灵敏度。在模拟样品中,LOD可达50pg/mL,同时具有较好的耐受性,受到样品基质影响较小,稳定性高。在缓冲液和模拟样品中的批间CV和批内CV均小于10%,具有较好的重复性。该方法检测特异性高,不与其他经典的肠毒素、肉毒毒素、蓖麻毒素、相思子毒素等发生交叉反应。这对于确认SEB污染引起的食物中毒是非常重要的。在将AlphaLISA用于菌液上清中SEB的检测时,发现该方法几乎不受葡萄球菌蛋白A(SPA)的干扰。SPA是金葡菌免疫检测的主要干扰因素,能够与鼠,兔等哺乳动物抗体FC段产生高亲和力结合。而在本实验中,使用100μg/mL的SPA对SEB进行稀释并检测后发现,SPA对AlphaLISA的信号值几乎没有影响。因此AlphaLISA检测方法的建立不仅适用于食品样品中SEB的检测,同时,在金葡菌污染的食物样品中SEB含量较低时,也可以通过分离培养金葡菌,对菌液上清中的SEB进行检测。在AlphaLISA技术中,功能化的聚合物微球是其重要的材料。聚合物微球是指具有圆球形状,且粒径在数十纳米至数百微米尺度范围内的聚合物粒子。制备材料主要分为天然高分子和合成聚合物,如聚苯乙烯(PS)。而对微球的功能化的研究,一直是相关领域的重点。微球的功能化,现在已经有包括量子点化,荧光化,中空化,磁化等多种方法。商业化的AlphaLISA技术微球为国外公司制备,无法获得具体的合成方法和所含材料。但是随着荧光材料的发展和新型光敏剂的出现,该微球也出现了越来越多的改进空间。为了对微球性能的提升做准备,如何稳定的负载功能化材料就显着的尤为重要。本实验初步构建了通过溶胀法使PS微球负载荧光染料组合物的方法,并对合成的整体步骤进行了优化,在优化后的步骤下合成的微球,具有良好的重复性,CV值均小于10%。同时对溶胀的温度和时间进行了摸索,发现在80°C下溶胀15 min的微球信号值强度最佳。通过透射电镜观察了溶胀前的微球和不同温度下溶胀的微球的外部形貌,发现了80°C下溶胀的微球同溶胀前相比,分散性几乎没有变化。而90°C下的微球,发生了一定的程度的聚集重迭。透射电镜的结果,也揭示了80°C下溶胀效果更佳的一种可能原因。在对微球偶联抗体的步骤进行优化的过程中,探索了EDC的用量和偶联抗体的时间。根据结果显示,为了得到最优的活化效果和偶联效率,每5 mg微球需使用0.1 mg的EDC对其表面的羧基官能团进行活化,并且最佳的抗体偶联时间为2 h。通过溶胀法构建微球负载荧光染料的方法,已有了初步结果,能够较为稳定的实现微球的荧光化。为下一步对荧光染料的改进和应用,打下了良好的基础。(本文来源于《军事科学院》期刊2019-03-20)
杨丹茹,赵燕英,唐俊妮[10](2019)在《金黄色葡萄球菌肠毒素SEK的纯化及DAS-ELISA检测方法的建立与应用》一文中研究指出本研究目的为建立一种快速检测金黄色葡萄球菌新型肠毒素SEK的双抗夹心酶联免疫吸附方法。将构建的原核表达载体pET-28a(+)-ΔNspSEK转化入BL 21(DE3)pLysS细胞中诱导表达,经Ni~(2+)-NTA亲和层析柱纯化获得重组SEK蛋白作为抗原。利用双抗夹心酶联免疫方法检测程序,确定抗SEK单克隆抗体及抗SEK多克隆血清的最佳稀释度,并使用该方法应用于检测SEK人工污染样品的加标回收率和茶多酚及乳酸链球菌素(Nisin)对7株sek阳性菌株的SEK蛋白分泌影响。结果表明,原核表达载体得到可溶性表达,重组SEK蛋白分子量约为27.7ku;建立的双抗夹心酶联免疫检测方法中,单克隆抗体最佳包被浓度为2.89μg/mL、抗血清的最佳稀释度为1:500,回归方程为y=0.2165x+0.1627,相关系数R~2=0.9993,最低检测限为0.1μg/mL;检测SEK人工污染脱脂奶、LB肉汤和牛肉糜中的加标回收率高达97%以上;并且,采用建立的方法测得茶多酚和Nisin的添加浓度在其MIC及以下浓度时,茶多酚对7株sek阳性菌株蛋白分泌抑制效果更明显。(本文来源于《现代食品科技》期刊2019年03期)
葡萄球菌肠毒素论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的为实现对5种经典肠毒素的准确、快速鉴定及分型,本研究基于ELISA和芯片技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA(Array-ELISA)检测方法。方法通过原核表达、亲和纯化制备SE蛋白,利用杂交瘤腹腔注射制备腹水,纯化SE单克隆抗体,通过ELISA对抗体的灵敏度、特异性进行评价,点制Array-ELISA阵列,评价Array-ELISA对SE检测的灵敏度和特异性。结果采用Array-ELISA,在PBS中SE的检测限除葡萄球菌肠毒素C(SEC)为10 ng/mL外,其余均为0.0001 ng/mL,液态牛奶中SE的检测限为(0.001~10)ng/mL。在PBS和牛奶中SE检测的特异性均为100%,各型SE之间无交叉反应。同时显示与肉毒毒素也无交叉反应。结论成功建立Array-ELISA检测方法,能够灵敏、准确鉴定同一份样本中5种经典SE。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
葡萄球菌肠毒素论文参考文献
[1].章海通,邢家溧,傅晓,王绍辉,承海.食源性金黄色葡萄球菌产肠毒素情况及耐药性分析[J].食品研究与开发.2019
[2].郑玉玲,欧阳譞,黄文华,刘鹏,孔德聪.金黄色葡萄球菌肠毒素阵列ELISA检测方法的建立及评价[J].细胞与分子免疫学杂志.2019
[3].陈镜如,梁惠,陈欣林,石明,黎诚耀.金黄色葡萄球菌肠毒素C促进异基因骨髓移植小鼠早期T细胞重建[J].实用医学杂志.2019
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[10].杨丹茹,赵燕英,唐俊妮.金黄色葡萄球菌肠毒素SEK的纯化及DAS-ELISA检测方法的建立与应用[J].现代食品科技.2019