高通量抗生素残留初筛试剂盒的研制及应用

高通量抗生素残留初筛试剂盒的研制及应用

论文摘要

以动物源性食品中常见的单一或配伍使用的抗生素为检测目标,开发基于微生物显色原理的高通量快速检测其残留的初筛试剂盒。选取嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus sterothermophilus CICC 10392)作为指示菌,优化其微胶囊包埋条件,并固定于96微孔板中,结合前期研究成果制成可同时对禽畜肉中常见的4类抗生素进行联合初筛的试剂盒,克服了因菌种活化耗时较长及液体菌种运输困难等问题。结果表明:以0.1 g/mL聚乙烯醇为载体、pH 6.0的硼酸-磷酸盐溶液为交联剂对初始吸光度(A600 nm)为0.8的指示菌进行包埋,其机械强度、细胞活性及检测效果最好;该试剂盒对四环素类检出限为40~60μg/kg,氨基糖苷类检出限为60~120μg/kg,大环内酯类检出限为60~100μg/kg,β-内酰胺类检出限为20~40μg/kg,四环素与氨基糖苷类配伍使用检出限为20~40μg/kg,β-内酰胺类与氨基糖苷类配伍使用检出限为10μg/kg,符合国内外对抗生素残留限量的要求;用色谱法对试剂盒检测的70份样品进行验证,无假阴性存在,说明该试剂盒结果可靠,可用于动物源性食品中抗生素残留的初筛检测。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 样品与菌种
  •     1.1.2 试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 菌悬液制备
  •     1.3.2 菌种微胶囊包埋方法确定
  •       1.3.2. 1 菌种包埋方法选择
  •       1.3.2. 2 菌种包埋条件优化
  •       1.3.2. 3 机械强度测试
  •       1.3.2. 4 菌种成活率测试
  •       1.3.2. 5 抗生素敏感性实验
  •     1.3.3 样品前处理
  •       1.3.3. 1 具体操作[15]
  •       1.3.3. 2 方法验证
  •     1.3.4 试剂盒操作及结果判定
  •     1.3.5 试剂盒检出限确定
  •       1.3.5. 1 单标抗生素检出限
  •       1.3.5. 2 配伍抗生素检出限
  •     1.3.6 试剂盒稳定性
  •     1.3.7 试剂盒的评价
  • 2 结果与分析
  •   2.1 菌株包埋方法的确定
  •   2.2 菌株包埋条件优化结果
  •   2.3 样品提取效果验证
  •   2.4 试剂盒检出限测定结果
  •   2.5 试剂盒稳定性测定结果
  •   2.6 试剂盒评价结果
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 范维,高晓月,李贺楠,郭文萍,陈淑敏,孙勇,李莹莹

    关键词: 高通量,抗生素残留,包埋固定,动物源性食品

    来源: 食品科学 2019年14期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 中国肉类食品综合研究中心北京食品科学研究院

    基金: “十三五”国家重点研发计划重点专项(2018YFC1603400),北京市优秀人才培养资助青年骨干个人项目(2017754154700G101)

    分类号: TS207.5

    页码: 333-338

    总页数: 6

    文件大小: 1509K

    下载量: 227

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