导读:本文包含了人细胞系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:人细胞系活化试验,皮肤致敏,小鼠局部淋巴结,溴脱氧尿嘧啶酶联免疫吸附试验
人细胞系论文文献综述
袁园[1]（2019）在《人细胞系活化试验方法建立及其用于测试化学物皮肤致敏性的研究》一文中研究指出研究背景:过敏性接触性皮炎(Allergic Contact Dermatitis,ACD)是一种皮肤接触致敏物质后引发的迟发型过敏反应。皮肤致敏性检测是皮肤接触类用品安全性评价的重要部分。2007年,美国联邦政府主导的21世纪毒理学计划在《21世纪的毒性测试:展望和策略》报告中,提出转变毒性测试策略的目标包括“要减少毒性测试所需要的时间和费用”和“将测试中使用的动物数量降到最低”。2013年,欧盟的化妆品指令第7次修正案发布了全面禁止所有化妆品成分进行动物试验的禁令。2017 年,REACH(Registration,Evaluation,Authorisation and restriction of Chemicals)法规也要求要使用计算机方法和体外方法作为皮肤致敏性检测的首要方法。随着国际监管加强和动物伦理原则的推行,在实验室建立可靠的皮肤致敏体外检测方法必不可少。研究目的:在实验室对人细胞系活化试验(human Cell Line Activation Test,h-CLAT)条件进行探索,开展方法研究,建立皮肤致敏的体外检测方法——人细胞系活化试验。采用建立的h-CLAT试验方法对化妆品皮肤致敏性进行检测,与小鼠局部淋巴结:溴脱氧尿嘧啶酶联免疫吸附试验(Local Lymph Node Assay:BrdU-ELISA,简写为LLNA:BrdU-ELISA)结果进行比较,验证h-CLAT方法用于染发类、防晒类、祛斑类化妆品皮肤致敏性检测的适用性。研究内容:1.参考OECD 442(E)推荐的方法在实验室内建立h-CLAT检测方法,使用OECD 442(E)附表2推荐的10种验证物质来验证所建立方法的可靠性。2.分别使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞术两种方法检测10种验证物质的细胞毒性并对检测结果进行一致性分析,验证在该实验中是否可以用方便经济的CCK-8法代替流式细胞术方法进行细胞毒性检测。3.使用h-CLAT方法对市售的2种染发类、3种防晒类和4种祛斑类化妆品以及2种染发剂原料样品进行检测。其中7种防晒类和祛斑类化妆品按照OECD442(B):LLNA:BrdU-ELISA的方法进行检测获得LLNA:BrdU-ELISA结果。2种染发类成品的LLNA:BrdU-ELISA结果通过本实验室之前检测获得,2种染发类原料的LLNA:BrdU-ELISA结果通过查阅文献获得。对h-CLAT和LLNA:BrdU-ELISA两种方法检测化妆品样品皮肤致敏性的结果进行统计学一致性检验,验证h-CLAT方法检测化妆品致敏性的适用性。研究结果:1.在实验室内建立了 h-CLAT检测方法,10种验证物质的检测结果均符合OECD 442(E)要求。2.CCK-8法和流式细胞术检测细胞毒性结果均符合OECD参考范围,两种方法的组内相关系数(Intra-group Correlation Coefficient,ICC)为0.993。3.h-CLAT检测方法和LLNA:BrdU-ELISA两种方法对8种样品的检测结果均为阳性,1种样品的检测结果均为阴性。对2种祛斑类化妆品,LLNA:BrdU-ELISA方法判定为阴性,h-CLAT方法判定为阳性。两种检测方法的Kappa值为0.42,一致性较好;Fisher精确概率法P值为0.27(а=0.05),说明两种检测方法的差异性不具有统计学意义。结论:1.10种验证物质结果均符合OECD参考值范围,验证了在本实验室内建立的h-CLAT检测方法的可靠性。2.h-CLAT方法和LLNA:BrdU-ELISA方法对化妆品致敏性检测结果的一致性较好,说明h-CLAT方法适用于本实验中所检测的化妆品样品。可以考虑使用h-CLAT方法作为测试手段,对化妆品进行致敏性初筛。(本文来源于《中国疾病预防控制中心》期刊2019-06-30）
袁园,阳晓燕,石莹,阮鸿洁,宋瑞霞[2]（2019）在《人细胞系活化试验用于皮肤致敏性测试的实验验证》一文中研究指出目的在实验室建立皮肤致敏的体外检测方法人细胞系活化试验(human Cell Line Activation Test,h-CLAT),并对染料前体、染发剂成品的皮肤致敏性进行检测。方法参考OECD 442(E)标准方法,用OECD 442(E)附表2推荐的10种验证物质建立方法,确定实验可靠性,对4种样品进行皮肤致敏性检测。分别使用CCK-8法和流式细胞术检测10种验证物质的细胞毒性并进行比较。结果 10种验证物质检测结果符合OECD 442(E)要求,4种样品的h-CLAT检测结果和LLNA方法结果一致。CCK-8法和流式细胞术检测细胞毒性结果均符合OECD参考范围,两种方法的组内相关系数(Intra-group Correlation Coefficient,ICC)为0. 993。结论在实验室内建立了可靠的h-CLAT检测方法,并且可以应用于部分染发类产品的致敏性检测。(本文来源于《环境卫生学杂志》期刊2019年01期）
陈田,马珅俊,杜军,章瑶[3]（2017）在《基于荧光定量的人细胞系激发试验评价皮肤致敏性的研究》一文中研究指出建立基于荧光定量(QPCR)的人细胞系激发试验(h-CLAT),探讨其在化学物和化妆品原料皮肤致敏性评价中的适用性。体外培养人急性单核细胞白血病细胞株THP-1,选用8种已知皮肤致敏特性的参照物处理THP-1细胞,通过QPCR检测CD86和CD54共刺激分子的m RNA水平,判定受试物是否具有潜在皮肤致敏性。同时对正在开发的两个化妆品新原料以及致敏物加标的一个植物提取物原料进行了预测。结果显示,当判断标准设置为当THP-1细胞存活率高于50%,MIF CD86大于等于120%和/或MIF CD54大于等于150%,h-CLAT能准确区分致敏物和非致敏物。此外,对致敏物加标的植物提取物原料也能提示其致敏风险。(本文来源于《日用化学品科学》期刊2017年10期）
柯逸晖,陈彧,程树军,徐嘉婷,谈伟君[4]（2016）在《直接多肽结合试验组合人细胞系活化试验预测皮肤致敏物的探讨》一文中研究指出目的建立直接多肽结合试验(DPRA)和人细胞系活化试验(h-CLAT)的皮肤致敏组合检测方法,对化学品及植物提取物的致敏性进行初筛。方法选择12种化学品和7种植物提取物为受试物,把不同受试物分别与两种肽(半胱氨酸肽和赖氨酸肽)共孵育24 h,采用高效液相色谱法分析反应后多肽消耗。同时将不同浓度的受试物与体外培养的人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)共孵育24 h,通过流式细胞仪检测暴露后细胞表面标志物CD86和CD54的变化。再进一步比较DPRA和h-CLAT预测结果的一致性。结果 DPRA方法和h-CLAT方法准确区分了12种化学品的皮肤致敏性,其中2种判定为阴性,10种判定为阳性,两种方法检测结果一致。DPRA对植物提取物致敏性的预测中,除绿茶提取物无法判定外,其余6种均为皮肤致敏疑似物质。h-CLAT预测中,除绿茶提取物、马齿笕提取物和人参果提取物为非致敏物,其余4种植物提取物为致敏物。DPRA与h-CLAT预测的一致性为0.57。结论 DPRA与h-CLAT的简单组合可以实现对单一化合物的准确预测,对于复杂混合物可实现初步预测,确认需要进一步组合其他方法。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2016年06期）
陈田,马珅俊,章瑶,杜军[5]（2016）在《基于Real-time PCR建立人细胞系激发试验(h-CLAT)评价化学物致敏性》一文中研究指出目的建立基于Real-time PCR方法的人细胞系激发试验(h-CLAT),探讨该方法在化妆品原料皮肤致敏评价中的应用,同时与基于流式细胞术的Draft OECDTG 442E方法进行比较。方法选用8个已知皮肤致敏特性的参照物(包括对苯二胺、苯乙醛、氯亚铂酸铵、咪唑烷基脲、硫酸镍、硫酸钴、十二烷基硫酸钠和乳酸)处理THP-1细胞24h后,用基于流式细胞术和Real-time PCR检测共刺激分子CD86和CD54的蛋白水平或者mRNA水平。通过比较实验组合对照组中两种共刺激分子的诱导表达改变,根据判断标准判定受试物是否具有皮肤致敏性。对于基于流式细胞术的方法,采用Draft OECD TG 442E中的判断标准(当细胞活力≥50%,RFI CD86>150和/或RFI CD54>200可判定为阳性);对于基于Real-time PCR的方法,则根据CD86和CD54的mRNA诱导表达倍数(Relative mRNA expression level,RMEL)制定判断标准。结果 1.根据DraftOECDTG 442E中的判断标准,基于流式细胞术的方法能够准确将致敏物与非致敏物分开;2.以细胞活力≥50%,RMELCD86>150和/或RMELCD54≥150来判定是否为致敏物时,能够准确将致敏物与非致敏物分开;3.在一个实验周期内,相对于Draft OECDTG 442E法,基于Real-time PCR的检测方法能够将检测通量提高一倍,而且对于操作者而言,后者在时间安排上更为灵活,为实验者提供较大便利;流式细胞学检测中有时会受到来自受试物的荧光干扰,而基于mRNA水平检测的方法则不会受到影响。结论基于Real-time PCR的h-CLAT方法既可以准确区分致敏物和非致敏物,又能够增加检测通量并便于操作,可用于化妆品原料皮肤致敏性的快速初筛。(本文来源于《2016（第二届）毒性测试替代方法与转化毒理学（国际）学术研讨会暨有害结局路径（AOP）与风险评估培训会议论文集》期刊2016-09-11）
陈田,马珅俊,章瑶,廖峰,杜军[6]（2016）在《人细胞系激发试验(h-CLAT)评价化学物致敏性的研究》一文中研究指出采用体外培养的人急性单核细胞白血病细胞株THP-1进行人细胞系激发试验(h-CLAT),探讨该方法在化妆品原料皮肤致敏评价中的应用。选用8个已知皮肤致敏特性的参照物处理THP-1细胞,根据共刺激分子CD86和CD54的诱导表达情况,判定受试物是否具有潜在皮肤致敏性。结果显示,当以致敏物处理细胞后,THP-1细胞CD86和/或CD54表达明显上调,而非致敏物处理后,CD86和CD54的表达变化不明显。以细胞活力≥50%,RFI CD86≥150和/或RFI CD54≥200来判定是否为致敏物。结果提示,h-CLAT能准确区分致敏物和非致敏物。因此,h-CLAT能够较准确地预测化学物的皮肤致敏性,可用于化妆品原料皮肤致敏性的快速初筛。(本文来源于《第十一届中国化妆品学术研讨会论文集》期刊2016-06-15）
田胜慧,柯军,杨立峰,翁银标,颜林[7]（2013）在《一种皮肤致敏体外替代方法介绍-人细胞系激活试验》一文中研究指出过敏性皮炎是由过敏原引起的皮肤病,主要是指人体接触到某些过敏原而引起皮肤红肿、发痒、脱皮等皮肤病症。目前,化学物致敏性评价主要依赖于动物实验。近年来,在动物福利和政府监管的推动下,采用体外培养细胞代替动物模型进行化学物致敏性的研究已成为趋势。人细胞系激活试验主要通过检测人THP-1细胞接触化学物后细胞表面标志物以及信号通路的变化判断其是否具有致敏性。该试验方法已被欧美和日本的多个实验室验证其可行性,但目前其临床应用价值还未被完全认可。随着研究的逐步深入,新的标志物和评定方法也在不断被开发和验证。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2013年12期）
游绍莉,刘鸿凌,荣义辉,朱冰,刘婉姝[8]（2011）在《人细胞系生物人工肝支持系统治疗慢加急性肝衰竭患者的初步研究》一文中研究指出目的利用自行构建的混合生物人工肝支持系统,探讨其治疗肝衰竭患者的安全性和有效性。方法采用转染人肝再生增强因子(hALR)的Hep G2细胞为生物材料构建生物反应器,利用慢加急性肝衰竭患者作为治疗对象,随机分组进行混合生物人工肝治疗及普通血浆置换治疗。结果治疗组6例患者中,4例经住院治疗1月后临床好转出院,1例在治疗结束20天后因肝性脑病死亡,1例出院后1月因肝肾综合征死亡,1例在恢复后1年因消化道出血死亡。对照组6例患者中存活2例,1例肝移植,3例因肝衰竭死亡。结论自行构建的混合生物人工肝支持系统功能良好,初步论证有一定的安全性和有效性。(本文来源于《第四届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、浙江省医学会肝病、感染病学学术年会论文汇编》期刊2011-10-28）
邓宇斌,李树浓,周平坤,Teyssier,Magali[9]（2001）在《辐射诱导人细胞系CEM、外周血单个核细胞DNA修复基因hHR21~(sp)的表达研究》一文中研究指出目的 研究辐射对人T淋巴细胞白血病细胞系 (CEM)、外周血单个核细胞的hHR2 1sp基因转录表达水平的影响及意义。方法 分别对人T淋巴细胞白血病细胞系CEM和正常人外周血单核细胞在UV或γ辐射后不同时间提取细胞总RNA ,通过RT PCR与hHR2 1sp 基因特异引物杂交 ,以 β actin为内参照放射影像密度扫描检测人T淋巴细胞白血病细胞系CEM、单核细胞DNA修复基因表达。结果 在UV 辐射、γ 辐射后早期 (3～ 6h) ,人T淋巴细胞白血病细胞系CEM和淋巴细胞hHR2 1sp基因的表达水平明显增加 ,照射后 6hhHR2 1sp基因的表达水平增加最多且UV辐射更明显 ,在晚期 (9h)降低。比较人细胞系CEM和淋巴细胞两者hHR2 1sp基因的表达水平 ,γ辐射 (3Gy)后淋巴细胞对hHR2 1sp基因表达高于人细胞系CEM ,且表达增加时间较长 ,达 9h ;而人细胞系CEM受到γ辐射后早期表达增加 ,在 6～ 9h后表达降低。结论 人T淋巴细胞白血病细胞系 (CEM)和人淋巴细胞的DNA修复基因hHR2 1sp基因在一定剂量辐射 (UV、γ辐射 )范围内其表达水平随辐射剂量增加而诱导表达水平增高 ,且对UV辐射更敏感 ;提示hHR2 1sp基因在人细胞系CEM细胞和人单核细胞在照射损伤后表达增加 ,可能是促进单核细胞损伤修复的原因之一。(本文来源于《中华放射医学与防护杂志》期刊2001年06期）
Suzki,M,刘晓秋[10]（2001）在《用PCC技术测定6种人细胞系经不同辐射类型照射后细胞杀伤和残留染色质断裂间的关系》一文中研究指出方法 :NB1RGB为正常人皮肤成纤维细胞系 ,HFL- III为正常胚胎肺成纤维细胞系 ,C32 TG为不含黑色素的黑素瘤细胞系 ,A172为恶性胶质瘤细胞系 ,Becker为脑星形细胞瘤细胞系 ,ONS76为脑神经胶质瘤细胞系。 6种细胞用2 0 0(本文来源于《国外医学(放射医学核医学分册)》期刊2001年04期）
人细胞系论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的在实验室建立皮肤致敏的体外检测方法人细胞系活化试验(human Cell Line Activation Test,h-CLAT),并对染料前体、染发剂成品的皮肤致敏性进行检测。方法参考OECD 442(E)标准方法,用OECD 442(E)附表2推荐的10种验证物质建立方法,确定实验可靠性,对4种样品进行皮肤致敏性检测。分别使用CCK-8法和流式细胞术检测10种验证物质的细胞毒性并进行比较。结果 10种验证物质检测结果符合OECD 442(E)要求,4种样品的h-CLAT检测结果和LLNA方法结果一致。CCK-8法和流式细胞术检测细胞毒性结果均符合OECD参考范围,两种方法的组内相关系数(Intra-group Correlation Coefficient,ICC)为0. 993。结论在实验室内建立了可靠的h-CLAT检测方法,并且可以应用于部分染发类产品的致敏性检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人细胞系论文参考文献
[1].袁园.人细胞系活化试验方法建立及其用于测试化学物皮肤致敏性的研究[D].中国疾病预防控制中心.2019
[2].袁园,阳晓燕,石莹,阮鸿洁,宋瑞霞.人细胞系活化试验用于皮肤致敏性测试的实验验证[J].环境卫生学杂志.2019
[3].陈田,马珅俊,杜军,章瑶.基于荧光定量的人细胞系激发试验评价皮肤致敏性的研究[J].日用化学品科学.2017
[4].柯逸晖,陈彧,程树军,徐嘉婷,谈伟君.直接多肽结合试验组合人细胞系活化试验预测皮肤致敏物的探讨[J].中国实验动物学报.2016
[5].陈田,马珅俊,章瑶,杜军.基于Real-timePCR建立人细胞系激发试验(h-CLAT)评价化学物致敏性[C].2016（第二届）毒性测试替代方法与转化毒理学（国际）学术研讨会暨有害结局路径（AOP）与风险评估培训会议论文集.2016
[6].陈田,马珅俊,章瑶,廖峰,杜军.人细胞系激发试验(h-CLAT)评价化学物致敏性的研究[C].第十一届中国化妆品学术研讨会论文集.2016
[7].田胜慧,柯军,杨立峰,翁银标,颜林.一种皮肤致敏体外替代方法介绍-人细胞系激活试验[J].中国比较医学杂志.2013
[8].游绍莉,刘鸿凌,荣义辉,朱冰,刘婉姝.人细胞系生物人工肝支持系统治疗慢加急性肝衰竭患者的初步研究[C].第四届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、浙江省医学会肝病、感染病学学术年会论文汇编.2011
[9].邓宇斌,李树浓,周平坤,Teyssier,Magali.辐射诱导人细胞系CEM、外周血单个核细胞DNA修复基因hHR21~(sp)的表达研究[J].中华放射医学与防护杂志.2001
[10].Suzki,M,刘晓秋.用PCC技术测定6种人细胞系经不同辐射类型照射后细胞杀伤和残留染色质断裂间的关系[J].国外医学(放射医学核医学分册).2001
标签：人细胞系活化试验; 皮肤致敏; 小鼠局部淋巴结; 溴脱氧尿嘧啶酶联免疫吸附试验;