鸡细小病毒和鸡新城疫病毒双重PCR检测方法的建立

论文摘要

旨在建立鸡细小病毒(ChPV)与鸡新城疫病毒(NDV)双重PCR检测方法,参考ChPV NS1基因和NDV F基因的保守区域,设计筛选、合成验证两对ChPV和NDV特异性引物,通过优化其反应体系,以及双重PCR的特异性、敏感性试验来评估建立的ChPV与NDV双重PCR检测方法。结果表明,建立的双重PCR同时扩增出687 bp ChPV和453 bp NDV片段,对ChPV与NDV的敏感性分别达到64 fg和25 fg,但对其他对照组病原体均无扩增,对ChPV与NDV混合感染的临床病料的检测结果与各病毒单项PCR检测结果相符。说明建立的ChPV与NDV双重PCR检测方法可用于临床上两种病毒混合感染的快速诊断。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 毒株和菌株
•     1.1.2 试剂
•     1.1.3 引物
•   1.2 方法
•     1.2.1 毒株DNA/RNA共抽提及RNA反转录
•     1.2.2 NDV和ChPV双重PCR反应条件的优化
•     1.2.3 NDV和ChPV双重PCR特异性试验
•     1.2.4 NDV和ChPV双重PCR敏感性试验
•     1.2.5 NDV和ChPV双重PCR临床样品检测
•     1.2.6 序列分析
• 2 结果
•   2.1 NDV和ChPV双重PCR反应条件的优化
•   2.2 NDV和ChPV双重PCR特异性试验
•   2.3 NDV和ChPV双重PCR敏感性试验
•   2.4 NDV和ChPV双重PCR临床样品检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 奉彬,谢芝勋,邓显文,张艳芳,谢丽基,谢志勤,范晴,曾婷婷,罗思思,黄娇玲,王盛,刘加波

关键词: 鸡细小病毒,鸡新城疫病毒,双重,特异性,敏感性

来源: 动物医学进展 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室

基金: 广西科技项目(AD17195083,AA17204057),“广西八桂学者”专项(2019-79),国家“万人计划”领军人才专项(W02060083)

分类号: S852.65

DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.10.001

页码: 1-5

总页数: 5

文件大小: 2877K

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