钙依赖蛋白激酶CPK14在花粉管生长中的功能分析

论文摘要

旨在揭示钙依赖蛋白激酶CPK14在花粉管极性生长中的生物学功能。利用基因芯片数据绘制花粉高量表达CPK的表达图谱。去除CPK14位于C端的自抑制区及Ca2+结合区,保留完整的激酶区及N端可变区,构建组成激活型（CA）的CPK14（CA-CPK14）。利用基因枪技术在烟草花粉中进行瞬时表达,比较分析全长CPK14、CA-CPK14及GFP对照之间的花粉管表型差异。通过CA-CPK14与GFP-RIC4ΔC（活性ROP1的标记物）共同表达试验,分析CA-CPK14对ROP1活性的影响。结果显示,CPK家族中存在8个花粉高量表达成员（其中包括CPK14）,它们在花粉中高量表达而在其他组织中表达较少。CPK14过量表达可以造成花粉管顶端的膨大,而持续激活且不受Ca2+调控的CA-CPK14则抑制花粉管萌发及生长。ROP1是花粉管生长的调控关键因子,CA-CPK14的表达可以抑制活性ROP1的标记物（GFP-RIC4ΔC）在花粉管顶端的积累与分布,说明CPK14在ROP1所介导的花粉管生长调控机制中发挥一定的作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 表达载体的构建
•     1.2.2 花粉管瞬时表达试验
•     1.2.3花粉管表型统计与定位分析
• 2 结果
•   2.1 CPK14在花粉中高量表达
•   2.2 持续激活的CPK14抑制花粉管的萌发与生长
•   2.3 持续激活的CPK14抑制ROP1的活性
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周利明,卢鑫蕊,马声葳,房玮

关键词: 花粉管,极性生长,钙依赖蛋白激酶,钙信号途径

来源: 生物技术通报 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学

单位: 华北理工大学生命科学学院

基金: 国家自然科学基金项目(31400168),河北省自然科学基金(C2014209216,C2018209112),国家重点实验室开放课题(SKLECRA2013OFP15)

分类号: Q943.2

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0219

页码: 55-61

总页数: 7

文件大小: 2123K

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