导读:本文包含了融合蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,基因,抗体,转染,细胞,马来,铜绿。
融合蛋白基因论文文献综述
接智慧,许文,高翔,吴建磊,张雪英[1]（2019）在《线粒体融合蛋白2基因与肿瘤发生和发展关系研究进展》一文中研究指出线粒体融合蛋白2(Mfn2)是一种由Mfn2基因编码的高度保守的跨膜叁磷鸟苷酶,广泛存在于人体多个器官组织,定位于细胞线粒体外膜,其具有促进线粒体融合和维持线粒体正常结构的功能,并参与信号转导、增殖及凋亡等细胞生物学过程。近年研究发现,Mfn2基因与肿瘤的发生、发展有密切关系,可能在肿瘤细胞增殖、凋亡及自噬等方面扮演着重要角色,Mfn2基因参与肿瘤发生、发展的机制已成为肿瘤研究领域的热点。本文就Mfn2基因与肿瘤细胞增殖、凋亡及自噬的关系及Mfn2基因在肿瘤中的表达和作用、目前针对Mfn2基因靶向治疗的临床转化研究相关进展加以综述,以期加深对Mfn2基因参与肿瘤生物学行为机制的认识。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2019年08期）
周玉真,刘思静,唐明圆,蒋宫羽,汪川[2]（2019）在《结核分枝杆菌基因Rv2660c、Rv2460c、Rv3875、Rv3804c细胞表位融合蛋白的表达及其免疫原性评价》一文中研究指出目的评价结核分枝杆菌基因Rv2660c、Rv2460c、Rv3875和Rv3804c的细胞表位融合蛋白的免疫原性,为研制新型多阶段结核疫苗提供可靠的靶抗原。方法将Rv2660c、Rv2460c、Rv3875和Rv3804c基因中的细胞表位串联构成融合抗原基因(命名为msv),克隆到原核表达载体pEASY-Blunt E1中,诱导表达后采用亲和层析纯化表达产物,经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用纯化的融合抗原蛋白免疫小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度;分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,采用淋巴细胞增殖法检测其免疫原性。结果成功构建了能表达融合抗原基因msv的原核表达质粒;SDS-PAGE和Western blot结果表明,表达产物亲和层析纯化后,获得相对分子质量为41.3×10~3的目的蛋白;ELISA检测免疫小鼠血清抗体滴度,结果表明特异性抗体效价约为1∶81 920;淋巴细胞增殖实验结果表明,抗原致敏的淋巴细胞经融合蛋白msv刺激后明显增殖。结论成功表达并纯化出融合蛋白msv,该融合蛋白可诱导小鼠特异性抗体表达和刺激细胞免疫应答,可作为结核疫苗的抗原组分。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2019年04期）
贾春翠[3]（2019）在《报告基因法检测重组人sgp130-Fc融合蛋白生物学活性》一文中研究指出重组人可溶性gp130-Fc融合蛋白(sgp130-Fc)是一种用于治疗溃疡性结肠炎的选择性IL-6反式信号传导抑制剂和抗炎生物药。目前其生物学活性测定方法是BAF3/gp130细胞增殖抑制法,此方法耗时较长、操作复杂,并且BAF3/gp130细胞对IL-6/sIL-6Rα复合物只是部分依赖性增殖(细胞培养密度过大会丧失这种依赖性),细胞培养的不确定性导致了活性检测的不稳定性,容易引起实验结果变异度大、重复性差。而基于药物作用机制的报告基因法(reporter gene assay,RGA)由于其简便性、特异性、高灵敏度和低变异度,在药物生物学活性检测领域得到越来越广泛的应用。本课题的目的是建立一种快速测定sgp130-Fc生物学活性的报告基因测活方法。根据sgp130-Fc的作用机制(特异性抑制IL-6反式信号通路),选择包含JAK/STAT3特异的DNA反应元件SIE、萤光素酶基因和潮霉素筛选标记基因的质粒载体,转染CHO-K1细胞并筛选对sgp130-Fc反应性好、可稳定传代的单克隆细胞株,建立报告基因测活方法并进行条件优化和方法学验证。本研究成功构建了报告基因细胞株CHO/SIE-Luc,并利用一种新型的数字PCR技术对基因修饰的稳定性进行了评价,结果显示,低、中、高代次细胞的萤光素酶基因相对拷贝数基本一致(0.093~0.095拷贝/拷贝GAPDH)。Sgp130-Fc可有效抑制IL-6/sIL-Rα复合物引起的CHO/SIE-Luc细胞中萤光素酶基因的表达,量效曲线符合四参数方程,R~2大于0.98。经验证,该方法仅针对IL-6反式信号传导通路;IC_(50)的日内和日间变异度均小于10%;回收率在94.1%-106.2%之间;相对生物学活性的测量值和真实值线性拟合的R~2大于0.99;不同代次细胞的量效曲线基本平行;与BAF3/gp130细胞增殖抑制法的检测结果具有较好的一致性(p=0.4960,t test,n=6)。本研究所建方法特异性好、准确稳定、快速简便,可用于sgp130-Fc的活性测定,为sgp130-Fc相关产品的开发和质量控制提供了重要参考。(本文来源于《中国食品药品检定研究院》期刊2019-06-01）
唐青蓝,李红梅,张礼林,王玉丰,颜礼完[4]（2019）在《小鼠FGF21基因克隆及his-mFGF21融合蛋白的诱导表达》一文中研究指出目的:对小鼠FGF21基因进行克隆并诱导表达FGF21融合蛋白。方法:以带有小鼠FGF21的T载体pMD19-T-mFGF21为模板特异性扩增FGF21基因片段,将扩增产物克隆至pET-28a(+),得到pET-28a(+)-mFGF21的重组子,并转化于大肠杆菌BL21(DE3),使用IPTG诱导融合蛋白的表达,纯化后采用Western Blot进行鉴定。结果:pET-28(+)-mFGF21重组质粒构建成功,表达出可溶性的his-mFGF21融合蛋白,经纯化后该蛋白his-mFGF21可与FGF21抗体特异性结合。结论:成功构建pET-28(+)-mFGF21重组子,并表达出his-mFGF21蛋白。(本文来源于《贵州医科大学学报》期刊2019年05期）
邓晓芬,杨晓佳,易天红,冯英,柯潇[5]（2019）在《融合蛋白基因与抗体基因电转染CHO-S细胞的条件摸索优化》一文中研究指出旨在对编码融合蛋白和抗体的重组质粒转染CHO-S细胞的转染条件进行摸索优化,提高外源基因的转染效率,从而增加外源蛋白的表达。应用Amaxa Nucleofector-II电转仪,从电转染程序、质粒用量及细胞用量叁方面着手,最终发现编码融合蛋白的重组质粒的最佳电转条件为:电转程序U-030,质粒用量20μg/孔,细胞用量1×10~7个/孔;编码抗体的重组质粒的最佳电转条件为:电转程序U-024,质粒用量15μg/孔,细胞用量1×10~7个/孔;实验结果进一步显示抗体重组质粒电转染CHO-S细胞的效果要优于融合蛋白重组质粒,利用高通量细胞筛选仪Clone Pix对转染后重组细胞的阳性克隆数进行统计,证实了该抗体重组质粒的转染效率更高。这为以后的抗体及融合蛋白重组质粒电转染CHO-S细胞提供了一定的数据支持,同时提示不同类型的细胞及外源基因,都需要设计相应的电转染实验进行条件优化,进而为获得高产稳定的生产用细胞株奠定基础。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年04期）
张明亮,闫新武,孙长江,顾敬敏,崔子寅[6]（2018）在《铜绿假单胞菌F_(190—342)-I_(21—83)基因的克隆及其融合蛋白的原核表达》一文中研究指出为了研究铜绿假单胞菌外膜蛋白F和I的重要表位,根据已公布的F和I基因序列设计2对特异性引物,以分离的水貂源铜绿假单胞菌ZHDL9基因组为模板,扩增重要的表位基因F_(190—342)(F1)和I_(21—83)(I2),并对得到的2段基因序列进行生物信息学分析。结果表明,PCR扩增所得F1和I2两段基因序列高度保守,不存在核苷酸的插入和缺失;通过融合PCR技术将得到的F1基因和I2基因无缝连接,得到651 bp的融合基因F1I2。将融合基因F1I2克隆至原核表达载体p ET-28a,成功构建了融合表达质粒p ET-28a-F1I2;将pET-28a-F1I2转化大肠杆菌BL21 (DE3),成功构建重组菌株BL21(pET-28a-F1I2),并对重组菌株进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,成功表达了融合蛋白F1I2,且融合蛋白能够被His镍柱纯化; Western Blotting检测表明,表达的融合蛋白F1I2与铜绿假单胞菌ZHDL9菌株感染的水貂血清具有较好的反应原性。(本文来源于《河南农业科学》期刊2018年12期）
程金章,杨景朴,仲炜,王海涛,赵胤[7]（2018）在《抗CD133单链抗体/白喉毒素DAB389融合蛋白的基因构建、表达、纯化及鉴定》一文中研究指出目的构建抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,在大肠杆菌里表达,并鉴定及纯化。方法采用PCR的方法,扩增融合基因DAB389-Linker-CD133(scFV),并插入到原核表达载体pET28a中,构建了重组表达载体pET28a-DAB389-CD133,融合蛋白在BL21(DE3)中表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定,通过Ni柱纯化目的蛋白,获得了纯度达95%的DAB389-Linker--CD133(scFV)融合蛋白。Western blot鉴定蛋白活性。流式细胞仪检测能否与CD133抗原特异性结合。结果扩增的片段与理论值一致,序列分析正确;纯化得到纯度为95%的重组蛋白。Western blot分析能特异性地与抗白喉抗体结合。流式细胞仪检测能与CD133抗原特异性结合。结论成功构建了抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,具有结合抗原和免疫毒素双重活性,为进一步靶向治疗奠定了基础。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2018年09期）
刘梅歌,李亚静,赵春维,肖丹青,董伟伟[8]（2018）在《突触融合蛋白结合蛋白1基因与癫痫性脑病的研究进展》一文中研究指出癫痫性脑病(Epileptic encephalopathy,EE)是一类由难治性癫痫极度异常脑电活动导致的脑部疾病。近年来随着分子遗传学的进步,越来越多的研究表明突触融合蛋白结合蛋白1(Synaptotagmin binding protein1, STXBP1)基因突变与EE有关。文章对EE的病因及病理生理学机制进行综述,从而提高临床医生对EE的认识,并探讨将STXBP1作为靶点治疗EE的可能性,为临床治疗EE提供依据和指导。(本文来源于《癫痫杂志》期刊2018年05期）
李杰,张星星,郭晶,孟庆玲,乔军[9]（2018）在《非洲猪瘟病毒p30-54融合蛋白基因的构建、表达及其多克隆抗体制备》一文中研究指出为了制备反应原性良好的非洲猪瘟病毒(ASFV)血清学诊断抗原,根据ASFV p30和p54基因序列,通过大肠杆菌密码子优化后分别体外合成全长的p30和p54基因,利用重迭延伸PCR(SOE-PCR)将2个基因片段串联,构建p30-54融合基因。将构建的融合基因片段克隆入p ET-28a(+)表达载体中,构建原核表达载体p ET-p30-54,转化至E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达,检测融合蛋白的反应原性,并制备抗该融合蛋白的多克隆抗体。SDS-PAGE检测结果显示,表达的p30-54融合蛋白分子质量为47. 1 ku; Western blot分析显示,该融合蛋白可被ASFV阳性血清特异性识别,表明其具有良好的反应原性。将p30-54融合蛋白用Ni-NTA亲和层析柱纯化后免疫小鼠,成功制备了抗ASFV p30-54融合蛋白多克隆抗体。(本文来源于《河南农业科学》期刊2018年09期）
郑亮,邹德华,程丽鑫,李兴志,张雅婷[10]（2018）在《猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建及融合蛋白的表达》一文中研究指出E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中,并将重组质粒命名为pEGFP-N1-E。将pEGFP-N1-E转染He La,利用Western Blot和免疫荧光技术检测pEGFP-N1-E的表达以及定位情况,结果显示pEGFP-N1-E在He La细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布。结果表明:pEGFP-N1-E已被成功构建,并且在He La细胞中正确表达。为后续研究关于E基因的功能及其在抗病毒中所发挥的作用等方面奠定了研究基础。(本文来源于《黑龙江八一农垦大学学报》期刊2018年04期）
融合蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的评价结核分枝杆菌基因Rv2660c、Rv2460c、Rv3875和Rv3804c的细胞表位融合蛋白的免疫原性,为研制新型多阶段结核疫苗提供可靠的靶抗原。方法将Rv2660c、Rv2460c、Rv3875和Rv3804c基因中的细胞表位串联构成融合抗原基因(命名为msv),克隆到原核表达载体pEASY-Blunt E1中,诱导表达后采用亲和层析纯化表达产物,经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用纯化的融合抗原蛋白免疫小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度;分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,采用淋巴细胞增殖法检测其免疫原性。结果成功构建了能表达融合抗原基因msv的原核表达质粒;SDS-PAGE和Western blot结果表明,表达产物亲和层析纯化后,获得相对分子质量为41.3×10~3的目的蛋白;ELISA检测免疫小鼠血清抗体滴度,结果表明特异性抗体效价约为1∶81 920;淋巴细胞增殖实验结果表明,抗原致敏的淋巴细胞经融合蛋白msv刺激后明显增殖。结论成功表达并纯化出融合蛋白msv,该融合蛋白可诱导小鼠特异性抗体表达和刺激细胞免疫应答,可作为结核疫苗的抗原组分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
融合蛋白基因论文参考文献
[1].接智慧,许文,高翔,吴建磊,张雪英.线粒体融合蛋白2基因与肿瘤发生和发展关系研究进展[J].新乡医学院学报.2019
[2].周玉真,刘思静,唐明圆,蒋宫羽,汪川.结核分枝杆菌基因Rv2660c、Rv2460c、Rv3875、Rv3804c细胞表位融合蛋白的表达及其免疫原性评价[J].四川大学学报(医学版).2019
[3].贾春翠.报告基因法检测重组人sgp130-Fc融合蛋白生物学活性[D].中国食品药品检定研究院.2019
[4].唐青蓝,李红梅,张礼林,王玉丰,颜礼完.小鼠FGF21基因克隆及his-mFGF21融合蛋白的诱导表达[J].贵州医科大学学报.2019
[5].邓晓芬,杨晓佳,易天红,冯英,柯潇.融合蛋白基因与抗体基因电转染CHO-S细胞的条件摸索优化[J].生物技术通报.2019
[6].张明亮,闫新武,孙长江,顾敬敏,崔子寅.铜绿假单胞菌F_(190—342)-I_(21—83)基因的克隆及其融合蛋白的原核表达[J].河南农业科学.2018
[7].程金章,杨景朴,仲炜,王海涛,赵胤.抗CD133单链抗体/白喉毒素DAB389融合蛋白的基因构建、表达、纯化及鉴定[J].中国实验诊断学.2018
[8].刘梅歌,李亚静,赵春维,肖丹青,董伟伟.突触融合蛋白结合蛋白1基因与癫痫性脑病的研究进展[J].癫痫杂志.2018
[9].李杰,张星星,郭晶,孟庆玲,乔军.非洲猪瘟病毒p30-54融合蛋白基因的构建、表达及其多克隆抗体制备[J].河南农业科学.2018
[10].郑亮,邹德华,程丽鑫,李兴志,张雅婷.猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建及融合蛋白的表达[J].黑龙江八一农垦大学学报.2018
论文知识图
