长链非编码RNA ZEB1-AS1促进食管鳞癌侵袭转移

论文摘要

背景与目的:长链非编码RNA（longnon-codingRNA,lncRNA）锌指E-盒结合同源异形盒1-反义链1（Zinc finger E-box binding homeobox 1 antisense 1,ZEB1-AS1）在多种肿瘤中高表达,与肿瘤患者临床病理学特征及预后相关,但其在食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中的作用及其机制尚不清楚。从细胞与分子生物学水平探讨lncRNA ZEB1-AS1在ESCC细胞侵袭转移中的作用。方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应（realtimefluorescencequantitativepolymerasechainreaction,RTFQ-PCR）方法检测9株ESCC细胞株中lncRNAZEB1-AS1的表达水平,筛选出一株高表达细胞株。采用小干扰RNA（small interference RNA,siRNA）转染Eca-109细胞,分成干扰组（siZEB1-AS1）、干扰对照组（siNC）和空白组（Eca-109）。采用RTFQ-PCR方法检测lncRNA ZEB1-AS1的表达水平,采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）实验检测细胞增殖能力情况,采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力情况,采用RTFQ-PCR方法和蛋白质印迹法（Westernblot）检测ZEB1的表达水平。结果:9株ESCC细胞株中,Eca-109细胞中lncRNA ZEB1-AS1表达水平最高。siRNA抑制lncRNA ZEB1-AS1表达,降至对照组的57%。与对照组细胞相比,lncRNA ZEB1-AS1不影响Eca-109细胞增殖,但是能显著促进Eca-109细胞迁移和侵袭。lncRNA ZEB1-AS1上调ZEB1 mRNA和蛋白的表达。结论:lncRNA ZEB1-AS1通过上调ZEB1促进ESCC迁移、侵袭,lncRNA ZEB1-AS1/ZEB1或许可以作为ESCC治疗的潜在靶点。

论文目录

• 1 方法
•   1.1 试剂
•   1.2 细胞及培养
•   1.3 细胞转染方法
•   1.4 CCK-8实验
•   1.5 实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）
•   1.6 蛋白提取及蛋白质印迹法（Western blot）检测
•   1.7 划痕实验
•   1.8 Transwell实验
•   1.9 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 9株ESCC细胞中lnc RNA ZEB1-AS1的表达水平
•   2.2 lnc RNA ZEB1-AS1不影响Eca-109细胞增殖
•   2.3 lnc RNA ZEB1-AS1促进Eca-109细胞迁移
•   2.4 lnc RNA ZEB1-AS1促进Eca-109细胞侵袭
•   2.5 lnc RNA ZEB1-AS1上调ZEB1的表达
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘芬,刘晓媛,高翔,葛晓松

关键词: 食管鳞癌,侵袭

来源: 中国癌症杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 江南大学附属医院肿瘤研究所,江南大学附属医院药剂科,江南大学附属医院肿瘤内科

基金: 国家自然基金青年项目（81502042）,江苏省自然基金青年项目（BK20140171）,无锡市“科教强卫工程”-无锡市医学重点人才（ZDRC008）,无锡市卫计委卫生科研项目（Q201731）

分类号: R735.1

DOI: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2019.12.002

页码: 927-933

总页数: 7

文件大小: 2957K

下载量: 140