导读:本文包含了蜕膜化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:小鼠,子宫内膜,细胞,基质,月经,苯并芘,线粒体。
蜕膜化论文文献综述
蒋莎,张杨,陈璐,李娜,赵颜[1]（2019）在《补肾活血法调节孕激素对不明原因复发性流产分泌晚期蜕膜化的影响》一文中研究指出目的:探讨补肾活血法对肾虚血瘀型不明原因复发性流产(Unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)患者分泌晚期血清孕激素(Progesterone,P)与蜕膜化因子泌催乳素(Prolactin,PRL)、胰岛素样生长因子结合蛋白-1(Insulin-Like Growth Factor Binding Protein 1,IGFBP-1)的作用及其可能机制。方法:收集30例已孕观察者[其中15例正常人工流产妇女(正常组)与15例URSA妊娠失败患者(URSA组)]和55例肾虚血瘀型URSA未孕观察者[随机分组为补肾活血法治疗组(35例)和阿司匹林对照组(20例),分别治疗4周]。运用RT-PCR法检测正常组和URSA组蜕膜组织中孕激素受体(Progesterone receptor,PR)、PRL、IGFBP-1 mRNA含量。采用ELISA法测定治疗组和对照组分泌晚期(月经周期第26天)血清中P、PRL、IGFBP-1的水平。结果:(1)URSA组PR、PRL、IGFBP-1 mRNA含量较正常组明显降低;(2)治疗组分泌晚期血清中P、PRL、IGFBP-1水平升高,且与对照组相比水平更接近于正常妇女水平。结论:(1)URSA分泌晚期血清P、蜕膜PR和PRL、IGFBP-1表达异常降低与URSA妊娠早期蜕膜化不足流产有关;(2)补肾活血法可以提高肾虚血瘀型URSA血清P、PRL、IGFBP-1水平为正常妊娠持续提供基础。(本文来源于《中华中医药学刊》期刊2019年10期）
焦熙尧,张斌,王浩洋,张静,周荣艳[2]（2019）在《气泡诱导小鼠子宫内膜蜕膜化研究》一文中研究指出子宫内注射气泡是一种新型的小鼠子宫内膜蜕膜化诱导方法,本研究以小鼠为研究对象,向子宫内注射气泡,构建气泡诱导的蜕膜化模型,以正常胚胎诱导的蜕膜为对照组,采集2种方式来源的蜕膜,通过形态学和HE染色,比较2种蜕膜的形态组织差异,并采用高通量转录组测序,筛选2种蜕膜间的差异表达基因。结果表明:由气泡诱导的蜕膜因缺乏滋养层的刺激,形态结构呈现异常增殖,其组织切片不能辨别出初级蜕膜区和次级蜕膜区,没有外胎盘锥的形成,并且与对照组相比有59个基因表达下调。表明气泡能够高效诱导蜕膜化反应,其诱导的蜕膜组织和正常胚胎诱导的蜕膜组织存在差异,属于异常的蜕膜组织,这为研究早期胚胎着床机制提供了新思路。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2019年05期）
金郁,计永胜,姚涌,汪学龙[3]（2019）在《弓形虫ROP16_(Ⅰ/Ⅲ)蛋白对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响》一文中研究指出目的探讨弓形虫ROP16_(Ⅰ/Ⅲ)蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入ROP16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)mRNA的表达,流式细胞术检测蜕膜细胞凋亡率的变化,并用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果提取的小鼠子宫基质细胞纯度为95%以上,在体外诱导蜕膜化后,PRL mRNA的表达随时间延长而显着升高(P<0.05),在诱导的蜕膜细胞中过表达ROP16_(Ⅰ/Ⅲ),相比于对照组,蜕膜细胞的凋亡率降低(P<0.01),凋亡蛋白Bax表达降低,Bcl-2蛋白表达上调。结论弓形虫ROP16_(Ⅰ/Ⅲ)蛋白会抑制蜕膜细胞的凋亡,可能会影响蜕膜细胞增殖与凋亡的平衡,从而影响胚胎的植入。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2019年10期）
王莉,侯俐,王海燕[4]（2019）在《叶酸缺乏孕鼠子宫内膜基因组甲基化模式改变及对基质细胞蜕膜化的抑制作用研究》一文中研究指出目的研究叶酸缺乏孕鼠子宫内膜基因组甲基化模式改变及对基质细胞蜕膜化的抑制作用。方法取30只性成熟SPF级小鼠,随机分为两组,实验组(15只)小鼠采用无叶酸饲料喂养,对照组(15只)小鼠给予正常饮食,均喂养4周。通过电化学发光法对小鼠血清叶酸含量进行检测,建立小鼠正常妊娠模型和人工诱导蜕膜化模型,检测子宫内膜蜕膜化的情况。通过免疫荧光法对蜕膜化分子标志物Desmin蛋白的表达水平进行检测,并用实时荧光定量PCR法对小鼠dt PRP-mRNA、Bmp2-mRNA的相对表达量进行检测。通过简化代表性亚硫酸氢盐测序法检测小鼠基因组甲基化模式。结果实验组小鼠血浆叶酸水平较对照组的水平明显下降(P <0. 01)。实验组小鼠蜕膜鼓包数目少于对照组,直径小于对照组(P <0. 05)。实验组小鼠人工诱导蜕膜化造模成功率仅为33. 33%(3/15),而对照组人工诱导蜕膜化成功率为100. 00%(15/15);诱导一侧宫角湿重轻于对照组(P <0. 01);经HE染色结果可见实验组小鼠无明显变化,而对照组小鼠诱导侧体积增大,且出现双核或多核的蜕膜细胞。实时荧光定量PCR法检测结果发现,实验组小鼠经人工诱导蜕膜化后,其蜕膜化分子标志物dt PRP-mRNA、Bmp2-mRNA的相对表达量明显低于对照组(P <0. 01)。体外功能实验结果发现,经激素作用3 d后,实验组小鼠基质细胞仍呈现成纤维细胞样,而对照组小鼠基质细胞形态改变,即由长梭形变为多角形,细胞增大明显。实时荧光定量PCR法检测结果发现,经激素诱导后,实验组小鼠基质细胞中dt PRP-mRNA、Bmp2-mRNA的相对表达量明显低于对照组(P <0. 01)。经简化代表性亚硫酸氢盐测序法检测结果发现,甲基化胞嘧啶mC多数处在启动子区或CpG岛(CGI)中的CG位点,部分mC处在非CG位点,即mCHG与m CHH(H代表T、C或A)。两组小鼠在妊娠第6～7天时不同类型m C分布比较并无显着差异;妊娠第8天时,实验组小鼠mCG在启动子区与CGI中的比率明显高于对照组,而mCHH在启动子区与CGI中的比率低于对照组。结论叶酸缺乏不仅可阻滞小鼠子宫内膜基质细胞的蜕膜化进程,而且可改变子宫内膜基因组甲基化模式,如各类型的mC分布与平均甲基化水平等,进一步对关键基因的表达及功能造成影响,提示叶酸缺乏可损害小鼠孕早期子宫内膜功能,这可能是叶酸缺乏抑制蜕膜化进程的潜在分子机制。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2019年11期）
王雨思[5]（2019）在《Nox4在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机理》一文中研究指出在哺乳动物妊娠过程中,子宫组织会发生广泛的重建以及内膜细胞的增殖和分化,即子宫蜕膜化。子宫蜕膜化是胚泡植入、胎盘形成以及妊娠维持的必备条件之一,子宫内膜基质细胞分化成专门的蜕膜细胞是胚胎植入和生存的关键,分化的基质细胞能够选择性地识别和应答发育受损的胚泡,蜕膜细胞保护胚泡免受机体内外界氧化应激的影响,控制随后的滋养层侵袭和胎盘形成,并调节特定的免疫细胞。前期已有报道,Nox4(NADPH Oxidase 4)在调节蜕膜化过程中发挥重要作用。Nox4是NADPH氧化酶Nox家族重要成员之一,NADPH氧化酶是催化分子氧还原成超氧化物的酶系,是氧化应激NADPH-ROS途径的一个重要组成部分。活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)是细胞新陈代谢的副产品,是来自分子氧的活性分子,主要由超氧阴离子(O_2~(?-))、羟基自由基(?OH)、过氧化氢(H_2O_2)等组成。Nox4主要产生O_2~(?-)和H_2O_2,Nox4与内质网、线粒体等细胞器有关。在健康的机体中,ROS和抗氧化剂保持平衡。当平衡受到ROS过度破坏时,会发生氧化应激。但过量的ROS会导致各种病理的发生,包括内皮功能障碍、动脉粥样硬化、高血压、糖尿病和急性呼吸窘迫综合征等。本研究对Nox4在早期妊娠小鼠子宫中的表达、功能和调节机理进行了研究。利用荧光定量方法对Nox4在小鼠早期妊娠子宫中的表达进行了研究。结果显示,在早期妊娠第4天的小鼠子宫中Nox4的表达要显着高于早期妊娠第1天的小鼠子宫,但在早期妊娠第7天时Nox4的表达要显着低于妊娠第5天。Nox4对子宫基质细胞增殖及细胞周期均无显着影响,用特异性干扰片段抑制Nox4的表达或添加重组蛋白后提高Nox4的表达均对细胞增殖及细胞周期无显着影响。用特异性干扰片段抑制Nox4表达可显着升高蜕膜化标志基因Prl8a2和Prl3c1的表达,而添加重组蛋白后可显着抑制蜕膜化标志基因Prl8a2和Prl3c1的表达。进一步研究显示,Nox4可作为孕酮的下游靶基因参与调节子宫基质细胞的分化。实验表明,添加孕酮后Prl8a2和Prl3c1的表达量显着上升,敲低Nox4后Prl8a2和Prl3c1表达量升高,添加Nox4重组蛋白后Prl8a2和Prl3c1的表达量下降。说明Nox4可介导孕酮对子宫基质细胞分化进行调节。ROS参与细胞增殖、分化、衰老和凋亡等生理和病理过程,本实验干扰Nox4后在子宫基质细胞中观察其ROS的产生情况。结果发现ROS产生量显着上升,O_2~(?-)是ROS的主要组成成分,检测发现,O_2~(?-)的产生量也呈现上升趋势。Nox4主要产生O_2~(?-)和H_2O_2,与细胞器有关(包括内质网、线粒体或细胞核),且内源性ROS主要来源于线粒体,MitoSox试剂盒可以反映线粒体中产生O_2~(?-)的情况,在干扰Nox4后线粒体中的O_2~(?-)含量呈上升趋势。JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞线粒体膜电位的变化。通过红色荧光到绿色荧光的转变可以检测到细胞膜电位的下降,同时也可以将红绿荧光的变化作为细胞凋亡早期的一个检测指标。本实验发现,干扰Nox4后,在子宫基质细胞中红/绿荧光比例下降,说明干扰Nox4后子宫基质细胞内线粒体膜电位下降。线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性指标,因此本实验检测了子宫基质中细胞凋亡的情况。利用流式细胞仪检测发现,子宫基质细胞中干扰Nox4后,发生早期凋亡的细胞明显增多。综上所述,Nox4可通过孕酮调节小鼠子宫基质细胞的分化,且在早期妊娠小鼠中ROS的表达产生影响。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
陈西华,曹惠子,关硕,陆超,贺斌[6]（2019）在《缺血再灌注对小鼠蜕膜化子宫内膜的作用》一文中研究指出目的以小鼠月经样模型为基础,探索缺血再灌注在月经发生中的作用。方法假孕NIH小鼠子宫诱导蜕膜化,完成蜕膜化后将小鼠分为对照组(n=8)、假手术组(n=8)与缺血再灌注组(n=10)。对照组小鼠无操作,假手术组仅实行开腹手术,而缺血再灌注组小鼠开腹后对单侧子宫角进行血管夹持手术阻断血流,30min后恢复血流,造成单侧子宫角内发生缺血再灌注,另一侧子宫角无操作。手术后观察阴道出血状况,且术后6h与24h取材进行大体观察与组织形态学观察,统计子宫内膜崩解的小鼠数量。结果处理后24h,对照组小鼠子宫内膜全部保持完好,无一例(0/8)发生内膜崩解;假手术组仅一例(1/8)发生内膜崩解;缺血再灌注组大部分小鼠(8/10)双侧子宫角的子宫内膜均发生崩解并伴随阴道出血现象。结论缺血再灌注能够直接导致绝大部分小鼠蜕膜化子宫内膜发生完全崩解。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2019年05期）
冯倩[7]（2019）在《Hmgb1在小鼠子宫内膜蜕膜化过程中的功能研究》一文中研究指出目的:哺乳动物的妊娠过程涉及到胚胎着床、胎盘形成、胚胎发育和分娩等多个环节,是一个极其精细且复杂的过程。胚胎着床后,位于系膜对侧胚胎周围的子宫内膜基质细胞进行增殖和分化,即蜕膜化(decidualization)。蜕膜细胞在子宫的横切面会形成两个明显的区域:围绕着胚胎的无血管的初级蜕膜区(primary decidualization zone,PDZ)和紧邻初级蜕膜区广泛分布血管的次级蜕膜区(secondary decidualization zone,SDZ)。基质细胞蜕膜化是胚胎着床过程中的关键环节。蜕膜化的机制目前依然尚未研究全面。高迁移率族蛋白B1(high motility group B1,Hmgb1)对于哺乳动物生命的存续是必须的。以往关于Hmgb1在妊娠中的作用研究集中在Hmgb1对囊胚发育的影响,Hmgb1在妊娠早期子宫中的作用及功能暂无研究。本课题组前期的表达谱测序发现Hmgb1在子宫内膜蜕膜化组织中表达上调。因此,本研究首先拟探讨Hmgb1与子宫内膜蜕膜化之间的关系。此外,Hmgb1在线粒体的质量控制(能量代谢系统、线粒体自噬以及线粒体融合/分裂)中发挥着重要的调控作用。而高能量驱动的线粒体活性在多倍体蜕膜细胞发育中发挥重要作用,以支持子宫内膜的分化和胚胎植入。线粒体功能异常导致的蜕膜细胞多倍化受损可能导致不孕。因此,本研究欲探讨的第二个问题,即Hmgb1在蜕膜化过程中是否调控线粒体质量控制。另外,Hmgb1在核内能够促进类固醇激素受体(ER/PR)等转录因子与靶DNA的结合,调控基因转录、表达及细胞分化等生命活动。雌激素受体(ERα和ERβ)和孕激素受体(PR-A和PR-B)在胚胎着床和蜕膜化中担负重要的角色。因此,本研究拟探讨第叁个问题:核内Hmgb1是否转录调控ER/PR应答基因而影响蜕膜化过程。被释放到胞外的Hmgb1可与多种受体如RAGE,TLR4,TLR9等相互作用调控免疫过程。蜕膜化过程中会有多种免疫细胞的参与。因此,本文拟探讨的第四个问题:释放到胞外的Hmgb1是否会调控免疫从而影响蜕膜化过程。本文研究了Hmgb1在围着床期的表达规律及其调控小鼠蜕膜化过程的分子机制,以全面了解Hmgb1在围着床期的作用,为蜕膜化的研究提供新的有力证据。方法:1.建立动物孕期模型:小鼠正常妊娠模型:8周龄性成熟昆明雌鼠(体重28-30g)与性成熟雄鼠合笼交配,次日早晨检查阴栓,见阴栓记为孕第一天(D1)。取小鼠妊娠D1,D4,D5,D6,D8子宫内膜组织材料(8只/天)。小鼠假孕模型:8周龄性成熟昆明雌鼠与结扎输精管雄鼠合笼交配,次日早晨检查阴栓,见阴栓记为假孕第一天(PD1)。取小鼠假孕PD1,PD4,PD5,PD6,PD8子宫内膜材料(8只/天)。小鼠延迟着床模型:妊娠D3小鼠晚上被切除双侧卵巢。在妊娠D4-D7早晨给予切除卵巢的小鼠皮下注射孕酮100μl(1mg/0.1ml玉米油)。妊娠D7天将小鼠分为两组:一组继续皮下注射孕酮100μl(1mg/0.1ml玉米油),记为延迟着床组(5只/组)。另一组皮下注射孕酮100μl(1mg/0.1ml玉米油)和雌二醇100μl(25ng/0.1mL玉米油),记为延迟着床激活组(5只/组)。D8脱颈处死小鼠,延迟组用生理盐水冲洗子宫后检测是否有延迟着床的胚胎,激活组尾静脉注射1%台盼蓝溶液,检测是否有着床的胚胎。人工诱导蜕膜化模型:8周龄性成熟昆明雌鼠与结扎输精管雄鼠合笼交配,次日早晨检查阴栓,见阴栓记为假孕第一天(PD1)。PD4清晨小鼠子宫一侧宫角注射玉米油5μl,对侧子宫注射等量PBS作为对照(8只/组)。至PD8早晨取子宫内膜材料。宫角注射:小鼠于假孕第四天(PD4)上午进行宫角注射Hmgb1抑制剂甘草酸,双侧子宫角一侧注射5μl甘草酸(glycyrrhizia acid,GA)+玉米油(Oil)混合液(5mM),对侧宫角注射5μl玉米油(含等量甘草酸溶剂DMSO),于PD8收集子宫内膜材料(5只/组)。另外5只PD4小鼠,一侧宫角注射5μl玉米油(含甘草酸溶剂DMSO),对侧宫角注射等量DMSO,PD8收集子宫材料(5只/组)。另外5只PD4小鼠一侧子宫角注射5μl PBS作为对照,对侧子宫角注射等量DMSO,于PD8收集子宫材料(5只/组)。2.细胞体外诱导蜕膜化模型:原代子宫内膜基质细胞培养液中加入最终浓度为10nM雌二醇(E_2)与1μM孕酮(P_4)诱导72h,对照组加入溶剂无水乙醇作为对照。3.Hmgb1的表达与蜕膜化的关系:(1)子宫内膜蜕膜化检测:观察围着床期小鼠蜕膜化时期(D5-D8)子宫外观。人工诱导蜕膜化后,对子宫称重,RT-qPCR检测蜕膜化标识分子dtprp的mRNA水平,以验证人工诱导蜕膜化是否成功。体外功能实验,诱导蜕膜化利用雌孕激素诱导小鼠原代子宫内膜基质细胞,采用RT-qPCR检测dtprp的mRNA水平。(2)Hmgb1在围着床期的表达:免疫组化(IHC)、原位杂交(ISH)、Western Blot、RT-qPCR检测在D1、D4、D5IS(着床点)、D5IIS(着床旁)、D6IS、D6IIS、D8IS天Hmgb1的表达情况;(3)Hmgb1在假孕期的表达:IHC、Western Blot、RT-qPCR检测在PD1、PD4、PD5、PD6、PD8天Hmgb1的表达情况;(4)Hmgb1在延迟着床模型的表达:IHC检测在延迟着床组与激活组Hmgb1的表达;(5)Hmgb1在人工诱导蜕膜化模型的表达:IHC、Western Blot、RT-qPCR检测在人工诱导蜕膜化组织(ID)以及对照组织(Vehicle)中Hmgb1的表达情况;(6)Hmgb1在原代子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化模型中的表达:免疫荧光鉴定原代细胞纯度;RT-qPCR检测dtprp的表达以鉴定诱导蜕膜化是否成功;检测诱导诱导蜕膜化组以及siRNA敲低Hmgb1组dtprp,hmgb1的mRNA水平。4.宫角注射Hmgb1抑制剂甘草酸,检测蜕膜化情况:观察宫角注射后小鼠子宫外观,统计子宫湿重。5.线粒体质量控制检测方法:(1)采用激光共聚焦检测线粒体形态,比较敲低Hmgb1的表达对线粒体形态学影响。细胞处理组分为5组:Vehicle、si-Nc、si-Hmgb1、si-Nc+E2+P4、si-Hmgb1+E2+P4。Mitotracker Red染色细胞线粒体,通过激光共聚焦观察线粒体碎片化程度。统计各组碎片化程度。(2)采用流式细胞术检测线粒体膜电位,评估敲低Hmgb1对线粒体功能的影响。细胞处理组分为5组:Vehicle、si-Nc、si-Hmgb1、si-Nc+E2+P4、si-Hmgb1+E2+P4。JC-1染色细胞,流式细胞仪检测红、绿荧光强度,用红/绿比值评估线粒体膜电位是否发生变化。(3)采用酶标仪检测ATP生成,评估敲低Hmgb1对线粒体功能的影响:细胞处理组分为5组:Vehicle、si-Nc、si-Hmgb1、si-Nc+E2+P4、si-Hmgb1+E2+P4。采用酶标仪检测ATP生成量。(4)采用流式细胞术检测活性氧(ROS)生成状况,评估敲低Hmgb1对线粒体功能的影响。细胞处理组分为5组:Vehicle、si-Nc、si-Hmgb1、si-Nc+E2+P4、si-Hmgb1+E2+P4。DCFH-DA探针染色细胞,流式细胞仪检测活性氧强度。6.细胞自噬的检测:(1)体内诱导蜕膜化模型,Western Blot检测各处理组线粒体相关因子及自噬相关因子的表达;(2)体外细胞实验,敲低Hmgb1后诱导蜕膜化,Western Blot、RT-qPCR检测各处理组线粒体相关因子及自噬相关因子的表达;(3)宫角注射甘草酸与玉米油模型,Western Blot、RT-qPCR检测各处理组线粒体相关因子及自噬相关因子的表达;透射电镜检测自噬小体。7.RNA-seq检测在蜕膜化过程中受Hmgb1调控的差异基因采用转录组测序法对宫角注射的正常组(PBS)-A1组、诱导蜕膜化组(Oil+DMSO)-A2组、溶剂对照组(DMSO)-A3组、抑制组(GA+Oil+DMSO)-A4组的子宫组织材料进行转录组测序,分析差异表达基因,对差异基因进行功能聚类(GO分析)。8.RNA-seq测序数据分析:(1)分析在蜕膜化过程中受Hmgb1调控与线粒体功能相关的差异基因;(2)分析在蜕膜化过程中受Hmgb1调控与ER/PR应答基因相关的差异基因;(3)分析在蜕膜化过程中受Hmgb1调控与免疫相关的差异基因。结果:1.Hmgb1对蜕膜化的影响:(1)Hmgb1在围着床期的表达规律:IHC结果显示:Hmgb1仅表达于D1腔上皮与腺上皮;D4天Hmgb1表达于腔上皮、腺上皮以及部分基质细胞中;Hmgb1高表达于D5IS初级蜕膜区以及D6IS、D8IS的次级蜕膜区,在D5IIS与D6IIS仅表达于腔、腺上皮。ISH结果显示:同IHC结果一致,Hmgb1于D1仅表达于腔上皮与腺上皮,D4表达于腔、腺上皮与部分基质细胞;Hmgb1在D5IS、D6IS、D8IS蜕膜区域高表达,D5IIS与D6IIS仅在腔上皮与腺上皮表达。Western Blot与RT-qPCR结果显示Hmgb1在着床点高表达。(2)Hmgb1在假孕期的表达规律:IHC结果显示:Hmgb1在PD1、PD4、PD5、PD6、PD8腔上皮与腺上皮表达,且PD5、PD6、PD8呈弱表达。Western Blot与RT-qPCR结果显示Hmgb1在PD5、PD6、PD8弱表达。(3)Hmgb1在延迟着床模型的表达规律:IHC结果显示,Hmgb1低表达于延迟组,高表达于激活组。(4)Hmgb1在诱导蜕膜化模型的表达:诱导蜕膜化组经dtprp鉴定为诱导蜕膜化成功模型,Hmgb1在诱导蜕膜化组呈强阳性表达。(5)抑制Hmgb1对体内蜕膜化的影响:宫角注射获取人工诱导蜕膜化组(Oil)、GA+Oil组、PBS组以及溶剂DMSO组,结果显示,与诱导蜕膜化组相比,GA+Oil组蜕膜化受到抑制。(6)敲低Hmgb1对体外诱导蜕膜化的影响:在原代子宫内膜基质细胞中加入siRNA敲低Hmgb1后诱导蜕膜化发现:Hmgb1敲低后蜕膜化标志物dtprp表达下降,表明敲低Hmgb1会阻碍蜕膜化进程;细胞仅诱导蜕膜化后Hmgb1表达升高。2.Hmgb1调控线粒体质量而影响蜕膜化进程:(1)Mitotracker Red染色细胞线粒体,采用激光共聚焦观察线粒体碎片化程度发现,与诱导组相比,敲低Hmgb1后诱导组线粒体碎片化程度增高,影响线粒体形态结构;(2)流式检测线粒体膜电位发现:与诱导组相比,敲低Hmgb1后诱导组线粒体膜电位降低,影响线粒体发挥正常功能;(3)酶标仪检测ATP生成发现:与诱导组相比,敲低Hmgb1后诱导组ATP生成减少,影响线粒体发挥正常功能;(4)流式细胞检测ROS生成发现:与诱导组相比,敲低Hmgb1后诱导组活性氧释放增多,影响线粒体发挥正常功能。4.Hmgb1调控细胞自噬过程进行线粒体质量控制,从而影响蜕膜化进程:(1)体内诱导蜕膜化模型,采用Western Blot检测发现,诱导组线粒体相关因子Drp1、Slp2表达上调,自噬相关因子Lc3b-Ⅱ表达上调;(2)体外细胞实验:与诱导组相比,敲低Hmgb1后诱导组,Western Blot检测线粒体相关因子Slp2表达降低,自噬相关因子Lc3b-Ⅱ表达降低;RT-qPCR检测线粒体相关因子slp2,dnm1l降低,自噬相关因子map1lc3b,atg5表达下降,sqstm1表达升高;(3)宫角注射玉米油人工诱导蜕膜化组(Oil)、注射GA+Oil组、注射PBS组以及注射溶剂DMSO组:Western Blot检测线粒体相关因子Slp2,GA+Oil组较诱导组(Oil)蛋白水平表达下降,自噬相关因子Lc3b-Ⅱ表达下降,p62表达升高;RT-qPCR检测线粒体相关因子slp2表达降低,自噬相关因子map1lc3b,atg5表达下降,sqstm1表达升高。(4)在诱导组(Oil)可观察到自噬小体,GA+Oil组可看到空泡化线粒体存在。5.对玉米油宫角注射人工诱导蜕膜化Oil(A2)、GA+Oil(A4)、注射PBS(A1)以及注射溶剂DMSO(A3)的子宫组织进行RNA-seq测序,结果共获得在蜕膜化过程中与Hmgb1相关的差异基因1505个,其中与线粒体功能和自噬相关的差异基因有32个;与转录调控ER/PR应答基因的差异基因有27个;与调控免疫相关的差异基因有19个。结论:1.Hmgb1在围着床期具有特定的时空表达特点,在胚胎着床过程中与蜕膜化相关;缺乏Hmgb1会抑制小鼠子宫内膜基质细胞的蜕膜化进程,从而影响妊娠结局。2.在蜕膜化过程中,Hmgb1通过调控胞质中线粒体自噬而进行线粒体质量控制;缺失Hmgb1则无法正常调控细胞自噬而造成线粒体损伤,线粒体无法发挥正常功能最终造成蜕膜化进程受阻。3.在蜕膜化过程中,核内Hmgb1通过调控ER/PR应答和免疫应答过程相关基因从而发挥调控细胞增殖与分化功能。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
王倩[8]（2019）在《组氨酸叁聚体核苷结合蛋白1（Hint1）在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的作用》一文中研究指出目的:胚胎植入,也可称胚胎着床,启动于囊胚和子宫上皮细胞发生黏附之后,成功的胚胎植入依赖于活化良好的囊胚和具有容受性的子宫之间的相互作用。随着胚胎黏附至子宫后,其周围的子宫内膜基质细胞进一步增殖并分化形成蜕膜细胞,为胚胎的发育提供合适的环境。据统计,约有20%的失败妊娠是由胚胎植入时蜕膜化进程异常而导致。因此,蜕膜化进程的正常进行对于妊娠的建立和维持至关重要。已有研究发现组氨酸叁聚体核苷结合蛋白1(Hint1)在基因转录途径和代谢的调节中起重要作用,但其在蜕膜化过程中的作用仍不清楚。为了探讨Hint1在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的作用。我们收集了昆明小鼠的正常妊娠、假孕和人工诱导蜕膜化的组织,采用免疫组化、Western blot、原位杂交和RT-qPCR的方法,探究Hint1在小鼠早期妊娠过程中的表达模式。分离并培养小鼠子宫内膜基质细胞,在体外诱导蜕膜化条件下siRNA干扰Hint1表达,采用Western blot、RT-qPCR和液相色谱-质谱联用法(LC-MS)方法,探究Hint1对子宫内膜基质细胞蜕膜化的调控作用。方法:(1)应用免疫组化、原位杂交、Western blot和RT-qPCR检测Hint1在早期妊娠、假孕和人工诱导蜕膜化模型小鼠子宫中的表达。(2)siRNA敲低分离的原代小鼠子宫内膜基质细胞中Hint1的表达,通过基质细胞体外功能试验检测Hint1对蜕膜化过程的影响。(3)LC-MS分析Hint1对基质细胞蜕膜化过程中脂质组学的影响。结果:(1)在妊娠的第一至第八天Hint1表达逐渐升高,且在胚胎植入部位的表达显着高于着床旁。(2)人工诱导蜕膜化模型的小鼠子宫内膜Hint1的表达显着高于未发生蜕膜化的对照子宫。(3)利用siRNA干扰小鼠子宫内膜基质细胞中Hint1的表达可显着影响体外诱导的蜕膜化过程及脂质代谢。结论:Hint1在基质细胞蜕膜化过程中表达升高,并可能与蜕膜化过程中基质细胞的脂质代谢相关。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
陆思宇[9]（2019）在《SKP2、TFEB在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用》一文中研究指出第一部分Skp2在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用目的:蜕膜细胞的增殖与凋亡的动态平衡是维持蜕膜化正常进行的关键。Skp2作为促进细胞从G1期向S期转换的重要调控因子,它可以使cyclin、CKI等靶蛋白泛素化,从而调节细胞周期,进而参与细胞增殖和凋亡的调控。研究发现,Skp2在多种癌症的发生过程中发挥重要作用,但其在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用尚不清楚。本研究拟在观察Skp2在围着床期小鼠子宫内膜表达规律的基础上,初步探讨Skp2在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用。方法:1.构建早孕小鼠正常妊娠模型与假孕模型并用免疫组化与Western blot检测Skp2的表达。2.构建早孕小鼠体内人工诱导蜕膜化模型并用免疫组化与Western blot检测蜕膜化诱导前后Skp2的表达。3.构建体外原代小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化诱导模型并用Western blot检测细胞诱导前后Skp2的表达。4.构建Skp2过表达的原代小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化诱导模型,Western blot检测蜕膜标志物BMP2、MMP2、HOXA10和Skp2在小鼠子宫内膜基质细胞中的蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:1.Western blot和免疫组化结果显示,随着妊娠天数的递增,Skp2在正常妊娠第5、6、7天(D5、D6、D7)的小鼠子宫内膜组织的蛋白表达显着低于正常妊娠第1天(D1);Skp2在正常妊娠D5、D6、D7子宫内膜着床点组织的蛋白表达明显低于D5、D6、D7的子宫内膜着床旁组织。2.Western blot和免疫组化结果显示,Skp2在假孕第4天(PD4)小鼠子宫内膜组织的蛋白表达显着高于PD6、PD7。3.Western blot和免疫组化结果显示,蜕膜化诱导侧子宫内膜组织Skp2蛋白表达明显低于未诱导侧子宫内膜组织。4.Western blot结果显示,原代小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化诱导后Skp2蛋白表达明显低于未诱导组,上调Skp2表达后,蜕膜标志物BMP2、MMP2、HOXA10表达紊乱。流式细胞术检测结果显示,上调Skp2表达后,细胞凋亡显着增加。结论:该研究初步揭示了Skp2参与调节早孕小鼠子宫内膜蜕膜化,其具体机制有待进一步研究。第二部分TFEB在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用目的:TFEB可通过调控自噬-溶酶体途径在诸多生理病理过程中影响细胞凋亡。在蜕膜化进程中,蜕膜细胞的增殖与退化同时并存,二者在动态平衡中协调蜕膜细胞的数量和滋养细胞的侵蚀,维持蜕膜化的正常进行。课题组前期发现FOXO3a可能通过细胞凋亡途径参与妊娠早期子宫内膜蜕膜化。作为可被FOXO3a负调控的下游分子TFEB是否同样参与妊娠早期子宫内膜蜕膜化尚不清楚。因此,本研究旨在分析TFEB在围着床期小鼠子宫内膜中的表达规律,初步探讨TFEB在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用。方法:1.构建早孕小鼠正常妊娠模型与假孕模型并用q PCR与Western blot检测TFEB的表达。2.构建早孕小鼠体内人工诱导蜕膜化模型并用q PCR与Western blot检测TFEB的表达。3.构建体外原代小鼠子宫内膜基质细胞人工诱导蜕膜化模型并用q PCR与Western blot检测TFEB的表达。结果:1.Western blot和Real-time PCR结果显示,随着孕期天数的增加,TFEB在D4、D5、D6的表达逐渐减少;Western blot、Real-time PCR和免疫组化的结果显示,TFEB在D5子宫内膜着床点组织的表达明显低于D5子宫内膜着床旁组织。2.Western blot和Real-time PCR结果显示,小鼠体内蜕膜化诱导侧子宫内膜组织TFEB表达明显低于未诱导侧子宫内膜组织。3.Western blot和Real-time PCR结果显示,原代小鼠子宫内膜基质细胞体外蜕膜化诱导后TFEB表达明显低于未诱导组。结论:本研究初步揭示TFEB可能与妊娠早期小鼠子宫内膜蜕膜化有关,但其具体调节作用有待后续进一步深入探讨。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
易婷[10]（2019）在《苯并芘暴露促进小鼠蜕膜化过程中基质细胞增殖并抑制分化》一文中研究指出目的:苯并芘(BaP)是一种重要的环境污染物,具有明显的生殖毒性。课题组前期的研究发现,孕早期BaP暴露损害小鼠子宫内膜形态并诱导蜕膜化缺陷。蜕膜化是子宫内膜基质细胞增殖分化形成大的上皮样蜕膜细胞的过程,为胚胎生长和胎盘形成提供空间。蜕膜化的正常进行与细胞周期调节密切相关,但关于BaP对早孕小鼠基质细胞蜕膜化过程中细胞周期的影响尚不清楚。本研究探讨了BaP对蜕膜化过程中基质细胞增殖分化的影响,为进一步研究BaP的生殖毒性提供实验依据。方法:前期实验结果证明0.2mg/kg/d BaP染毒影响了早孕小鼠子宫内膜容受性及蜕膜化过程,导致胚胎着床数下降,因此本实验采用0.2mg/kg/d BaP作为染毒剂量。首先建立BaP染毒孕鼠模型,从妊娠第1天(D1)至第8天(D8),每日给予灌胃处理,分别于孕6、7、8天收取子宫材料,进行以下实验:(1)HE染色观察蜕膜组织形态,Western blot检测蜕膜化标志物BMP2的表达。(2)免疫组化,Real-time PCR和Western blot的方法检测蜕膜组织的增殖(Ki67和PCNA),分化(Prl8a2和Prl3c1)以及多倍体化相关分子(CyclinD3,CDK6和p21)的表达。(3)流式细胞术检测蜕膜组织的DNA含量水平。(4)Western blot,免疫组化的方法检测G1/S转换的相关周期蛋白以及E2F/Rb信号通路相关因子的表达。(5)Western blot,Real-time PCR检测蜕膜组织G2/M期相关周期蛋白以及ATM/ATR激酶相关因子的表达。建立体外人工诱导蜕膜化基质细胞模型:通过分离小鼠基质细胞,免疫荧光检测基质细胞Vimentin的表达(鉴定基质细胞纯度),体外诱导蜕膜化,同时建立BaP染毒细胞模型,进行以下实验:(1)Real-time PCR的方法检测蜕膜细胞分化标志分子Prl8a2和Prl3c1的表达;Western blot检测增殖标志物PCNA的表达。(2)Western blot检测G1/S和G2/M相关细胞周期因子的表达。(3)流式细胞术检测蜕膜细胞的DNA含量。结果:(1)BaP暴露导致蜕膜组织BMP2表达下调,4N和>4N细胞数量减少,损害了小鼠蜕膜化过程。(2)BaP暴露导致增殖标志分子Ki67和PCNA上调,分化标志分子Prl8a2和Prl3c1下调,引起蜕膜化过程基质细胞的增殖分化失衡。(3)BaP处理下调CyclinD3,CDK6和p21,影响蜕膜多倍体化相关因子的表达。(4)BaP处理上调CyclinA(E)/CDK2,CyclinD1/CDK4,和E2F/Rb信号通路相关分子的表达,促进G1/S进程,导致细胞增殖。(5)BaP处理上调CyclinB1/CDK1和pHH3的表达,抑制ATM/ATR激酶的表达,促进G2/M进程。(6)体外诱导基质细胞蜕膜化实验中,证实了基质细胞分离成功以及蜕膜化诱导成功;在BaP处理后Prl8a2和Prl3c1下调;与对照组相比,细胞周期蛋白改变与体内实验基本一致,并且流式细胞术检测结果显示BaP处理组4N和>4N细胞数量下降。结论:由上述的实验结果得出结论:苯并芘暴露促进蜕膜化过程中基质细胞增殖,抑制细胞分化,减少蜕膜多倍体形成,损害小鼠基质细胞蜕膜化过程,提示基质细胞增殖分化平衡失调可能是BaP导致蜕膜化缺陷的重要机制。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
蜕膜化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
子宫内注射气泡是一种新型的小鼠子宫内膜蜕膜化诱导方法,本研究以小鼠为研究对象,向子宫内注射气泡,构建气泡诱导的蜕膜化模型,以正常胚胎诱导的蜕膜为对照组,采集2种方式来源的蜕膜,通过形态学和HE染色,比较2种蜕膜的形态组织差异,并采用高通量转录组测序,筛选2种蜕膜间的差异表达基因。结果表明:由气泡诱导的蜕膜因缺乏滋养层的刺激,形态结构呈现异常增殖,其组织切片不能辨别出初级蜕膜区和次级蜕膜区,没有外胎盘锥的形成,并且与对照组相比有59个基因表达下调。表明气泡能够高效诱导蜕膜化反应,其诱导的蜕膜组织和正常胚胎诱导的蜕膜组织存在差异,属于异常的蜕膜组织,这为研究早期胚胎着床机制提供了新思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蜕膜化论文参考文献
[1].蒋莎,张杨,陈璐,李娜,赵颜.补肾活血法调节孕激素对不明原因复发性流产分泌晚期蜕膜化的影响[J].中华中医药学刊.2019
[2].焦熙尧,张斌,王浩洋,张静,周荣艳.气泡诱导小鼠子宫内膜蜕膜化研究[J].河北农业大学学报.2019
[3].金郁,计永胜,姚涌,汪学龙.弓形虫ROP16_(Ⅰ/Ⅲ)蛋白对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响[J].安徽医科大学学报.2019
[4].王莉,侯俐,王海燕.叶酸缺乏孕鼠子宫内膜基因组甲基化模式改变及对基质细胞蜕膜化的抑制作用研究[J].临床和实验医学杂志.2019
[5].王雨思.Nox4在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机理[D].吉林大学.2019
[6].陈西华,曹惠子,关硕,陆超,贺斌.缺血再灌注对小鼠蜕膜化子宫内膜的作用[J].生殖医学杂志.2019
[7].冯倩.Hmgb1在小鼠子宫内膜蜕膜化过程中的功能研究[D].重庆医科大学.2019
[8].王倩.组氨酸叁聚体核苷结合蛋白1（Hint1）在小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化中的作用[D].重庆医科大学.2019
[9].陆思宇.SKP2、TFEB在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用[D].重庆医科大学.2019
[10].易婷.苯并芘暴露促进小鼠蜕膜化过程中基质细胞增殖并抑制分化[D].重庆医科大学.2019
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