熔解曲线结合RT-PCR在餐饮食品中对5种致病菌的检测

论文摘要

建立快速检测餐饮食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7及副溶血性弧菌5种致病菌的实时聚合酶链式反应体系（real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）。通过增菌时间的比较,调整RT-PCR反映体系中的退火温度,建立5种致病菌相同的检测体系。试验结果表明,5个目标菌达到检测灵敏度的最短增菌时间范围为2 h～8 h,5种致病菌的试验灵敏度范围为7.4×10 CFU/mL～2.4×103CFU/mL。5种目标菌的熔解温度Tm值分别为沙门氏菌87.32℃,金黄色葡萄球菌79.57℃,单核增生李斯特氏菌82.02℃,大肠埃希氏菌O157:H7 82.24℃,副溶血性弧菌87.15℃。试验建立的RT-PCR快速检测反应体系,与常规微生物检测方法相比,有效地缩短了检测时间,且灵敏度与特异性均能满足检测要求。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株
•     1.1.2 主要试剂
•     1.1.3 引物
•     1.1.4 主要仪器
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 致病菌梯度培养
•     1.2.2 DNA模板提取
•     1.2.3 RT-PCR体系的建立
•     1.2.4 RT-PCR反应特异性
• 2 结果与分析
•   2.1 RT-PCR体系的建立
•   2.2 致病菌增菌时间
•   2.3 RT-PCR反应灵敏度
•   2.4 RT-PCR反应体系中引物的特异性
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 姚艳玲,刘骆强,管佳丽

关键词: 实时聚合酶链式反应,熔解曲线,沙门氏菌,金黄色葡萄球菌,单核增生李斯特氏菌,大肠埃希氏菌,副溶血性弧菌

来源: 食品研究与开发 2019年04期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 嘉兴市食品药品检验检测院

基金: 嘉兴市科技计划项目(2017BY18070)

分类号: TS207.4

页码: 142-148

总页数: 7

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