导读:本文包含了嗜热脂肪酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:遗传稳定性,毕赤酵母,脂肪酶,重组菌
嗜热脂肪酶论文文献综述
钱忠英,李杨,蔡海莺,冯凤琴[1]（2019）在《疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶基因在毕赤酵母工程菌中的遗传稳定性》一文中研究指出【背景】重组工程菌的传代稳定性是保证外源蛋白高效稳定表达的前提,是决定工业化生产能力的关键因素之一。【目的】对异源的疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶基因在毕赤酵母重组工程菌中的遗传稳定性进行研究。【方法】将工程菌连续传代15次,取第1、5、10、15代作为受检代次,结合重组菌的菌落及菌体形态、水解酶活、目的基因片段、外源基因拷贝数等指标综合评价其遗传稳定性。【结果】传代过程中重组菌的菌落和菌体形态、目的蛋白分子量、目的基因序列均保持一致。目的基因的整合拷贝数经5次传代后发生一定损失,但随后稳定为7左右,而脂肪酶的相对酶活则提高至90%以上。【结论】适量的整合拷贝数更有利于该脂肪酶基因在毕赤酵母重组菌中的表达,经综合评价此工程菌的遗传稳定性良好,应用于工业化大规模生产是可行的。(本文来源于《微生物学通报》期刊2019年11期）
蔡海莺,Dumba,Trish,张婷,来佳,赵敏洁[2]（2018）在《毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶》一文中研究指出疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶TLL是一种热稳定、具有位置专一性等良好属性和应用前景的脂肪酶,已成功在多种宿主中实现重组表达。本研究构建含前导肽的TLL脂肪酶毕赤酵母重组工程菌,在摇瓶水平对该重组工程菌的培养和诱导条件进行优化,通过单因素试验,得到的最佳发酵条件:1.5%(体积分数)甲醇,pH 7.0,质量分数0.5%玉米油和0.1%阿拉伯胶,该条件下摇瓶发酵最高酶活为2 265.3 U/mL。以甲醇为唯一碳源进行高密度发酵,202 h后菌体OD600值达到最高282,对应发酵上清液的最高酶活为22 561.4 U/mL。参考摇瓶优化结果,采用辅助碳源与甲醇共诱导高密度发酵,培养和诱导208 h后,最终菌体OD600值达到362,对应发酵上清液的最高酶活为24 522.6 U/mL,较以甲醇为唯一碳源的对应值分别提高了28.37%和10.87%。另外,最高酶活较摇瓶水平发酵的最高酶活2 265.3 U/mL提高10.83倍,表明高密度发酵和共诱导是大幅提高酵母表达重组TLL蛋白的重要手段。(本文来源于《中国食品学报》期刊2018年07期）
蔡海莺,张婷,Dumba,Trish,赵敏洁,李杨[3]（2018）在《疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达和性质鉴定》一文中研究指出通过密码子优化改造编码sn-1,3位置专一性疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)基因,同时通过重迭PCR技术合成该基因,并将其克隆到巴斯德毕赤酵母的表达载体p PIC9K中。结果表明,TLL脂肪酶被高效胞外表达,在摇瓶中发酵168 h得到的发酵液的上清脂肪酶表达量达到0.1 mg/m L,对应的p NPP水解酶活达到312.72U/m L。与对应的原始编码基因重组菌酶活(179.42 U/m L)相比,密码子优化后酶活提高74.29%,表明密码子优化策略成功提高了TLL在巴斯德毕赤酵母中的重组表达。比较毕赤酵母来源的重组TLL与商业化的米曲霉酶学性质发现它们具有相似的最适p H和温度耐受范围。另外,它们在有机溶剂耐受性、表面活性剂和金属离子效应以及位置选择性方面均较为相似,表明毕赤酵母来源的重组TLL同样具有商业化应用的潜力。(本文来源于《中国食品学报》期刊2018年06期）
尤逊[4]（2018）在《疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的优化表达及生物柴油催化新工艺的初探》一文中研究指出随着石油的短缺和对环境保护意识的重新重视,通过植物油和短链醇类的转酯反应所生产的生物柴油(脂肪酸甲酯),被认为是石化柴油最重要的替代品之一。到目前为止,商业生物柴油主要是由化学方法产生的,过度的能源消耗和环境污染是其主要的缺点。在非水介质中,脂肪酶(EC 3.1.1.3)表现出了新的酯交换特性,使其成为催化制备生物柴油的生物催化剂之一。与化学方法相比,酶法具有能量消耗低、产物回收简单、二次污染小等优点,表现出了极大的优势。但是脂肪酶的生产成本限制了酶法催化生物柴油在工业化上的应用,为了使酶法制备生物柴油在经济上比化学法更具竞争力,构建一株稳定、表达量高的脂肪酶工程菌株,并实现其高水平生产对其工业应用至关重要。嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)中提取的脂肪酶TLL具有较高的稳定性,对有机溶剂具有耐受性,且在非水介质中具有较高的转酯催化效率。TLL脂肪酶被认为是一种优秀的生物柴油转酯催化剂。在本研究中,我们首先实现了疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)脂肪酶(以下简称TLL)的基因结构改造、基因剂量提升和密码子优化等手段,提高了TLL脂肪酶在毕赤酵母体系中的表达能力,酶活达到了432 U/mL,蛋白含量达到了1.58 mg/mL。通过14 L发酵罐发酵,进一步获得了875 U/mL,3.22 mg/mL的液体脂肪酶酶液,然后使用高效表达重组子发酵获得的液体TLL脂肪酶催化油脂与醇类进行生物柴油催化反应,经过TLL脂肪酶的酶学性质和生物柴油催化反应参数的探索,使用液体TLL脂肪酶的转酯率达到了96%。直接使用液体脂肪酶催化生物柴油转酯反应的策略有效的提升了TLL脂肪酶的回收能力,减少了因固定化过程带来的成本二次增加,为大规模工业生产提供了一种具有可行性的新工艺,为实现进一步酶法制备生物柴油产业化打下了坚实的基础。(本文来源于《武汉轻工大学》期刊2018-05-01）
蔡海莺,张婷,罗洁,张琪,葛展榜[5]（2017）在《五肽前导肽增强疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母的重组表达和蛋白折迭研究》一文中研究指出脂肪酶前导肽可作为分子伴侣影响其成熟蛋白的许多性质。然而,前导肽作用机制可能不同。本研究的主要目的是通过研究疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)五肽前导肽对其在毕赤酵母重组表达中的影响确定前导肽的作用,探讨其可能的作用机制与疏水性的关系。不含前导肽TL基因、含前导肽PTL基因和kTL基因被放克隆到表达载体pPIC9K分别获得到pP-TL、pP-PTL和pP-kTL。以PP-PTL质粒为模板,利用定点突变获得PTL-P和PTL-VP前导肽变体,并用于在毕赤酵母中重组表达。测定脂肪酶酶活、热稳定性和分子动力学模拟。重组菌脂肪酶活性GS-PTL平均水平达到434.32 U/mL,高于GS-TL 377.71 U/mL。修饰肽重组菌株的发酵结果表明,GS PTL VP变胞外脂肪酶酶活可达到483.29 U/mL,提高了11.27%,GS PTL相比(434.32 U/mL)。进一步对脂肪酶稳定性、前导肽变体的分子动力学模拟表明,PTL和前导肽变体PTL-VP的RMSD相似。本研究表明,前导肽"SPIRR"序列有利于提高TLL在毕赤酵母中的重组表达。此外,该前导肽的功能被确定为其疏水性相关,表明前导肽可能有助于协助疏水核心的形成,促进蛋白质的折迭过程。本研究表明其他脂肪酶前导肽也可能有助于提高脂肪酶重组表达、结构折迭和酶学性质改善。(本文来源于《2017中国食品科学技术学会第十四届年会暨第九届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2017-11-08）
蔡祥海[6]（2017）在《嗜热脂肪酶/酯酶的酶库构建、性质表征及其催化应用研究》一文中研究指出本研究致力于新型脂肪酶/酯酶基因开发,通过对微生物基因组数据库进行筛选、分析,得到具有高催化活性的脂肪酶/酯酶。基于开发和实际应用的目的,将重组酶应用于生物催化研究。从臭豆腐卤液中分离得到可以产脂肪酶的野生菌株,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌。该脂肪酶(命名为LipBA)基因包含645个核苷酸,编码214个氨基酸,属于脂肪酶1.4家族。通过克隆重组脂肪酶质粒,将脂肪酶基因全长克隆到大肠杆菌表达系统以及枯草芽孢杆菌表达系统。克隆的重组菌都顺利表达了该外源脂肪酶基因,两者中酶活较高的是大肠杆菌表达系统。大肠表达后的蛋白经镍柱纯化得到纯酶,蛋白电泳检测显示重组蛋白大小约为22 kDa,与氨基酸序列猜测的大小相同。脂肪酶LipBA最适pH和最适温度分别为9.0和40℃,在偏碱性缓冲液pH 7.0-11.0内相对稳定。水解棕榈酸对硝基苯酯的比活为1750±153 U/mg,Km和Vmax值分别为1.04±0.06 mM和119.05±7.16μmol/(mL·min)。酶学性质尤其是有机溶剂耐受性和热稳定性方面,对于非水相催化非常有利,为脂肪酶LipBA的后续催化反应提供了研究基础。将固定化脂肪酶LipBA用于有机相合成生物柴油,最适反应条件(反应温度,反应时间,有机溶剂和不同油脂)被研究确定。与此同时,并以LipBA的冻干细胞作为全细胞催化剂,用于催化脂肪酸肉桂酯类化合物的合成,最优反应条件为:以正己烷为有机溶剂,乙酸乙烯酯为酰基供体,在40℃条件下,反应4 h后100 mM肉桂醇转化率达到93%。同时,本论文还对不同碳链长度酰基供体对底物肉桂醇的转化率进行了研究。在胜利油田附近土壤筛选到了一种可以产酯酶的原始菌株,鉴定并命名为PseudomonassynxanthaPS1。通过同源性分析和简并引物PCR,我们得到酯酶EstPS1基因全长1923个核苷酸,编码640个氨基酸。氨基酸序列分析显示该酶在N-端含有24个氨基酸的信号肽,C-端含有357-640位氨基酸的自转运结构域(Autotransporter domain)。EstPS1与Pseudomonas fluorescens A506来源的酯酶 EstA 具有最高相似性,为88%,属于酯酶EC 3.1.1.1家族。EstPS1对不同碳链长度的对硝基苯酯底物有很好的水解效果,其中对短链底物的水解活性要明显高于长链底物。酯酶EstPS1的最适温度和最适pH分别为60℃和8.0。该酶在不同温度情况下表现出极佳的热稳定性,温度60,70,80,90和100℃下的活性半衰期分别为14h,2h,31min,10min和1min。为了研究自转运结构域对该酶性质及稳定性的影响,去除自转运结构域的酯酶EstPS1△AT被构建克隆,并成功表达。自转运结构域能显着促进酯酶的胞外分泌,EstPS1△AT的酶活和胞外蛋白分泌率均显着下降。酯酶EstPS1能降解广谱范围的拟除虫菊酯类农药化合物,对不同化合物的水解活性与该农药的结构有一定关系。上述实验结果表明EstPS1具有优良的酶学性质和广泛的水解底物谱。本课题并对Geobacillus sp.基因组数据库分析,成功克隆构建数十株脂肪酶/酯酶重组菌并在大肠杆菌中实现可溶表达,将这些脂肪酶/酯酶基因与NCBI数据库上已报道的脂类水解酶的氨基酸序列比对,其同源性在60%至95%之间。以叁丁酸甘油酯平板进行活性筛选,筛选到水解活性高的重组酶EstGSU753用于后续催化合成香料酯研究。(本文来源于《华东理工大学》期刊2017-03-28）
黄奎[7]（2016）在《疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母表面展示》一文中研究指出疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)是一种耐热性好、位置特异性和区域选择性较强的脂肪酶,在洗涤剂、化妆品、生物化工等领域有良好的应用前景。但目前商品化的TLL多是固定化酶,在经分离纯化获得游离酶蛋白后还需要固定化,因而价格偏高,限制了广泛应用。酵母表面展示技术是近年研究热点之一,借助基因工程方法将细胞壁蛋白与酶蛋白的融合,从而实现在标准发酵过程中,将外源蛋白固定于酵母细胞表面,类似于酶的固定化。毕赤酵母表面展示系统是发展迅速且应用前景广阔的真核表达系统,它不仅具有分子遗传操作简单的优点,同时能够在强诱导性启动子AOX1的作用下实现高密度表达。因此,将TLL展示在毕赤酵母表面为寻求性价比更高的疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶催化剂提供了良好的思路。目前对疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的研究相比其它脂肪酶而言比较少,在TLL1(GenBank:ABV69591.1)和TLL2(NCBI Accession:O59952)这两个基因上也只有少数研究报道。本课题首先将TLL1优化后的基因,分别以带自身信号肽序列片段和不带自身信号肽序列片段的形式,与毕赤酵母内源壁蛋白Gcw51p、Gcw61p的基因串联,构建了pPIC9k-sTLL1-GCW61、pPIC9k-TLL1(Δsig)-GCW61、pPIC9k-sTLL1-GCW51和pPIC9k-TLL1(Δsig)-GCW51四种展示表达质粒。然后将这四种质粒转入毕赤酵母GS115,从而构建出四种相应的高水解酶活的重组表面展示菌株。然后将所得四种菌株进行摇瓶水平发酵,并对脂肪酶表达情况进行了研究。结果表明,疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶成功在毕赤酵母表面展示,并表现出一定水解活力,具体为GS115/pPIC9k-s TLL1-GCW61,205.24U/g;GS115/pPIC9k-TLL1(Δsig)-GCW61,118.69U/g;GS115/pPIC9k-sTLL1-GCW51,97.33U/g;GS115/pPIC9k-TLL1(Δsig)-GCW51,26.50U/g。初步得出结论:(1)该展示系统有效,(2)对于TLL,锚定蛋白Gcw61p展示效果好于锚定蛋白Gcw51p,(3)对于TLL,带目的基因自身信号肽的酶活高于不带目的基因自身信号肽的。其次将TLL2做目的基因,构建了GS115/pPIC9k-TLL2-GCW61和GS115/pPIC9k-TLL2-GCW51展示表达菌株,其酶活为172.34U/g和84.19U/g。由于酶活未有提高,故改用本实验室构建并改造后的PHKA-AOX高分泌表达质粒作展示表达质粒,并通过叁丁酸甘油酯平板初筛和摇瓶水平复筛,筛选出GS115/PHKA-AOX-TLL2-GCW61展示表达菌株,其摇瓶发酵144h后,菌体酶活最高可达1964.76U/g。然后对GS115/PHKA-AOX-TLL2-GCW61进行了免疫荧光标记,进一步确证脂肪酶被展示在细胞表面。其发酶液经真空冷冻干燥后,用于该脂肪酶酶学性质的研究。其最适底物为对硝基苯酚己酸酯,最适作用温度为55℃,最适作用pH为9.0,在70℃中保存90min,酶活力仍保存70%以上,具有较高耐热的特性。Ca~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)对酶有强烈的激活作用,Cu~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)、K~+、Li~+、Na~+、Co~(2+)对酶有强烈抑制作用,Ba~(2+)、Mg~(2+)、Ni~(2+)对酶影响不大。本课题所构建的展示TLL2全细胞催化剂,具高酶活、耐碱性和热稳定高等特点,这为疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在工业上广泛应用奠定一定基础,也为其他脂肪酶的工业化应用提供解决思路。(本文来源于《华南理工大学》期刊2016-12-25）
吴欣玮,郑仁朝,郑裕国[8]（2016）在《嗜热踝节菌脂肪酶(TTL)的重组表达及催化合成普瑞巴林手性中间体》一文中研究指出以催化合成普瑞巴林中间体(3 S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸为目标,通过基因挖掘得到来源为嗜热踝节菌的脂肪酶氨基酸序列,构建了基因工程菌Escherichia coli BL21/p ET28b-TTL,在16℃成功诱导表达了嗜热踝节菌脂肪酶TTL。分离纯化得到TTL电泳纯酶,其最适反应温度为50℃,在50℃的半衰期为14.5 d,表明TTL具有良好的热稳定性;TTL最适p H为8.0,在p H 7.0~8.5时稳定性好。TTL在50℃、p H 8.0条件下,催化100 mmol/L外消旋2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯水解转化率达42%以上,产物的对映体过量值(e.e.值)>94%。这表明TTL在化学-酶法合成普瑞巴林中具有较大应用潜力。(本文来源于《生物加工过程》期刊2016年05期）
郑仁朝,黎小军,郑裕国[9]（2015）在《疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶Lip分子改造及催化合成普瑞巴林中间体》一文中研究指出(3S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基已酸是神经病理性疼痛和癫痫治疗首选药物普瑞巴林的关键手性中间体。本研究通过基因挖掘,从疏绵状嗜热丝孢菌基因组中获得一个能够高选择性拆分外消旋2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯(CNDE)合成(3S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸的脂肪酶Lip。(本文来源于《2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集》期刊2015-08-21）
李秀鹏[10]（2015）在《无孢黑曲霉SH-2菌株改造及疏棉状嗜热丝孢菌耐热脂肪酶表达的研究》一文中研究指出疏棉状嗜热丝孢菌耐热脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase)是重要的工业酶,具有良好的耐热性和脂肪酶特性,在油脂化学品加工业、食品加工业和生物表面活性剂等领域广泛应用。该酶的传统表达方法是通过疏棉状嗜热丝孢菌内分泌得到,由于产物量少、杂质多、纯化困难等原因,限制了其工业化应用。丝状真菌具有强大的胞外蛋白分泌能力广泛用于同源或异源蛋白的表达,是优良的蛋白表达宿主和重要的工业酶制剂生产菌株。黑曲霉(Aspergillus niger)具有较好的的安全性(Generally Recognized as Safe)、蛋白翻译后加工修饰功能和高效的蛋白表达和分泌系统,使得其成为理想的同源或外源蛋白表达宿主。本研究采取的基础菌株SH-2来源于高产糖化酶的CBS 513.88,具有不产孢子、菌丝粗短、发酵粘度小的特点。野生型无孢黑曲霉SH-2分泌表达的糖化酶总量达到20 g/L,这些蛋白的大量表达不利于目的蛋白产量的提高及目的蛋白下游分离纯化等,因此本研究通过利用双向筛选标记pyr G连续敲除黑曲霉菌株SH-2多拷贝糖化酶基因,提高目的蛋白的表达量,为该菌株成为高效表达同源或异源蛋白的菌株打下基础。同时通过密码子优化、使用强启动子、降低蛋白反馈抑制及构建不同的嗜热脂肪酶(Tll)表达载体,来提高Tll在改造过的黑曲霉SH-2中的表达量。将构建好的不同的Tll表达载体分别转化进入多拷贝糖化酶基因敲除菌株SH-2中,转化子发酵液单位酶活最高为150 U/m L,层析后耐热脂肪酶转化子蛋白量为0.83 g/L,较野生型SH-2中表达的耐热脂肪酶转化子层析后蛋白量(0.426g/L)高出一倍。为之后的发酵中试和提高蛋白表达量的研究奠定了基础。(本文来源于《华南理工大学》期刊2015-06-01）
嗜热脂肪酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶TLL是一种热稳定、具有位置专一性等良好属性和应用前景的脂肪酶,已成功在多种宿主中实现重组表达。本研究构建含前导肽的TLL脂肪酶毕赤酵母重组工程菌,在摇瓶水平对该重组工程菌的培养和诱导条件进行优化,通过单因素试验,得到的最佳发酵条件:1.5%(体积分数)甲醇,pH 7.0,质量分数0.5%玉米油和0.1%阿拉伯胶,该条件下摇瓶发酵最高酶活为2 265.3 U/mL。以甲醇为唯一碳源进行高密度发酵,202 h后菌体OD600值达到最高282,对应发酵上清液的最高酶活为22 561.4 U/mL。参考摇瓶优化结果,采用辅助碳源与甲醇共诱导高密度发酵,培养和诱导208 h后,最终菌体OD600值达到362,对应发酵上清液的最高酶活为24 522.6 U/mL,较以甲醇为唯一碳源的对应值分别提高了28.37%和10.87%。另外,最高酶活较摇瓶水平发酵的最高酶活2 265.3 U/mL提高10.83倍,表明高密度发酵和共诱导是大幅提高酵母表达重组TLL蛋白的重要手段。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
嗜热脂肪酶论文参考文献
[1].钱忠英,李杨,蔡海莺,冯凤琴.疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶基因在毕赤酵母工程菌中的遗传稳定性[J].微生物学通报.2019
[2].蔡海莺,Dumba,Trish,张婷,来佳,赵敏洁.毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶[J].中国食品学报.2018
[3].蔡海莺,张婷,Dumba,Trish,赵敏洁,李杨.疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达和性质鉴定[J].中国食品学报.2018
[4].尤逊.疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的优化表达及生物柴油催化新工艺的初探[D].武汉轻工大学.2018
[5].蔡海莺,张婷,罗洁,张琪,葛展榜.五肽前导肽增强疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母的重组表达和蛋白折迭研究[C].2017中国食品科学技术学会第十四届年会暨第九届中美食品业高层论坛论文摘要集.2017
[6].蔡祥海.嗜热脂肪酶/酯酶的酶库构建、性质表征及其催化应用研究[D].华东理工大学.2017
[7].黄奎.疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母表面展示[D].华南理工大学.2016
[8].吴欣玮,郑仁朝,郑裕国.嗜热踝节菌脂肪酶(TTL)的重组表达及催化合成普瑞巴林手性中间体[J].生物加工过程.2016
[9].郑仁朝,黎小军,郑裕国.疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶Lip分子改造及催化合成普瑞巴林中间体[C].2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集.2015
[10].李秀鹏.无孢黑曲霉SH-2菌株改造及疏棉状嗜热丝孢菌耐热脂肪酶表达的研究[D].华南理工大学.2015