论文摘要
为研究盐泽螺旋藻(Spirulina subsalsa)藻蓝蛋白裂合酶CpcS的催化功能,首先通过PCR技术从S. subsalsa FACHB351基因组DNA中扩增藻蓝蛋白裂合酶的编码基因SscpcS,构建表达质粒pCDFDuet-SscpcS,然后再与脱辅基蛋白和色素合成酶表达质粒pETDuet-SscpcB-Ssho1::SspcyA共同转入大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG(Isopropyl β-D-Thiogalactoside,异丙基硫代半乳糖苷)诱导重组合成藻蓝蛋白。PCR产物测序表明SscpcS扩增成功;双酶切检测和SDS-PAGE电泳分析表明质粒pCDFDuet-SscpcS构建成功,且能表达目的蛋白。重组藻蓝蛋白PCB-CpcB细胞产物为深蓝色;纯化后的色素蛋白展现620 nm的最大吸收峰和646 nm的最大荧光发射峰;色素蛋白通过锌离子染色,在紫外线照射下展现明显荧光。该研究成功克隆源自盐泽螺旋藻的藻蓝蛋白裂合酶SsCpcS的编码基因,其表达产物SsCpcS能有效催化藻蓝蛋白的生物合成。此研究为S. subsalsa藻蓝蛋白的重组合成及抗氧化试剂的研制奠定基础,也为探明盐泽螺旋藻中CpcS的催化机理提供科学依据。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 盛怡,李慧敏,伍贤军,杨红,朱咏莉,李萍萍
关键词: 盐泽螺旋藻,裂合酶,藻蓝蛋白,重组表达,生物合成
来源: 农业现代化研究 2019年06期
年度: 2019
分类: 农业科技,经济与管理科学,基础科学
专业: 生物学
单位: 南京林业大学生物与环境学院,南京林业大学江苏省南方现代林业协同创新中心
基金: 国家自然科学基金项目(41977354),江苏省自然科学基金青年基金(BK20150884),江苏省高校优势学科建设工程项目(PAPD)~~
分类号: Q78
DOI: 10.13872/j.1000-0275.2019.0099
页码: 1048-1055
总页数: 8
文件大小: 2604K
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- [1].CPCS系列低相对分子质量聚季铵盐黏土防膨剂的研制[J]. 油田化学 2009(03)