导读:本文包含了型磷酸酶的抑制亚基论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Ⅰ型磷酸酶的抑制亚基-1,HeLa细胞,增殖,细胞周期
型磷酸酶的抑制亚基论文文献综述
曾麒燕,黄毓,曾麟杰,贺菽嘉,张红[1]（2009）在《Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用》一文中研究指出PPI1(Inhibitor-1of protein phosphatase 1)是Ⅰ型磷酸酶的抑制亚基之一,其活化依赖于35位苏氨酸蛋白激酶(PKA)的磷酸化而发挥抑制作用。本研究目的在于探讨PPI1持续活化型突变体的表达对人宫颈癌细胞株增殖的影响及其可能的作用机制。利用PPI1野生型和活化型突变体表达质粒分别转染HeLa细胞,首先通过H3TdR掺入实验、迁移实验观察PPI1基因对HeLa细胞增殖能力的影响,研究结果表明:在活化型突变体表达的HeLa细胞株中,细胞3H掺入量和迁移能力明显受抑。其次通过流式细胞术、Giemsa染色法分析PPI1对HeLa细胞的细胞周期的影响;FACS分析表明HeLa细胞G2/M期比例明显升高;经脱氧胸苷同步化后,该组细胞进入有丝分裂期明显滞后。最后利用Western blot分析PPI1对MAPK信号转导通路的影响,Western blot分析显示该组细胞的ERK磷酸化水平明显下降。研究表明PPI1活化型突变体的表达可抑制人宫颈癌细胞株的增殖,这与其诱导HeLa细胞G2/M期停滞、有丝分裂的进入延缓有关,其中涉及到MAPK信号转导通路的活化受抑制。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2009年05期）
曾麒燕,秦雪,张红[2]（2007）在《Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响》一文中研究指出背景与目的:Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1(inhibitor-1 of protein phosphataseⅠ,PPI1)依赖于35位苏氨酸的磷酸化而发挥抑制作用。本研究目的在于观察PPI1野生型和持续活化型突变体的表达对宫颈癌细胞株的凋亡及凋亡刺激敏感性的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:通过Lipofectamine介导,用PPI1野生型和持续活化型突变体表达质粒分别转染HeLa细胞,以未转染的及转染空载体的HeLa细胞为对照组,用RT-PCR和Western blot鉴定目的蛋白的表达;通过克隆形成实验观察PPI1对细胞克隆形成能力的影响,用Hoechst33258荧光染色、亚二倍体分析法分析PPI1对HeLa细胞凋亡的影响,用流式细胞术分析转染PPI1后的HeLa细胞对肿瘤坏死因子(tumor-necrosis factor,TNF)凋亡刺激的敏感性,用Western blot分析PPI1对凋亡相关蛋白表达及MAPK信号转导通路的影响。结果:PPI1野生型和持续活化型突变体在HeLa细胞中能够有效表达。荧光染色和亚二倍体分析均表明PPI1持续活化型突变体的表达使细胞凋亡增多,并能明显抑制HeLa细胞的克隆形成能力。Western blot分析表明,PPI1持续活化型突变体可使促凋亡分子P53、P27、BAK表达上调,而抗凋亡分子Bcl-2和Bcl-xL的表达下调。流式细胞术分析表明PPI1持续活化型突变体表达的HeLa细胞在TNF-α刺激后细胞凋亡率为19.06%,而对照组为2.67%和1.89%。Westernblot分析表明,TNF刺激后,在JNK信号转导通路中,该组细胞JNK的磷酸化程度比对照组明显增强,而且持续的时间也较长;对于p38信号转导通路,则在TNF刺激30min后,p38出现磷酸化,而其他组均无。结论:PPI1持续活化型突变体的表达可诱导宫颈癌细胞株的凋亡,并能明显增强HeLa细胞对TNF凋亡刺激的敏感性,其中涉及到JNK、p38信号转导通路的活化增强。(本文来源于《癌症》期刊2007年11期）
曾麒燕[3]（2004）在《Ⅰ型磷酸酶的新型抑制亚基(IPP-2)的抗肿瘤作用及机制研究》一文中研究指出我们利用cDNA文库大规模测序和EST同源比较的方法,从正常人骨髓基质细胞中分离到一种新型全长基因,全长为1 637 bp,含348 bp编码区,编码116个氨基酸,同源性比较提示属于Ⅰ型磷酸酶的抑制亚基IPP-1(inhibitor of protein phosphatase 1)家族,因此将该新基因命名为IPP-2。首先,我们构建了人野生型IPP2(wt)和突变活化型IPP2真核表达载体(shI-1)。其次将野生型、活化(本文来源于《第八届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集》期刊2004-06-24）
曾麒燕[4]（2004）在《Ⅰ型磷酸酶的新型抑制亚基（IPP2）的抗肿瘤作用及其机制研究》一文中研究指出蛋白质磷酸化和去磷酸化几乎调节着重要生命活动的所有过程，包括细胞增殖、分化、发育、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢、肿瘤发生，而且蛋白磷酸化也是胞浆内信息和核内信息调控的必经环节。过去对蛋白质可逆性磷酸化的研究主要集中在蛋白激酶(protrin kinase，PK)的调控方面。现在认为蛋白磷酸酶(protein phosphatase，PP)和PK一样受到严密调控，同样起重要的作用。 Ⅰ型蛋白磷酸酶(PP1)，通过去磷酸化蛋白调节机体代谢、细胞分化以及信号转导等。它由催化亚基和调节亚基组成，后者决定磷酸酶的底物特异性，活性以及亚细胞定位。目前已发现多个PP1的抑制蛋白，其中Ⅰ型磷酸酶抑制因子(IPP1)是第一个发现调节蛋白磷酸酶活性的内源性分子，它特异性抑制Ⅰ型磷酸酶活性，在骨骼肌、脑、脂肪组织、肾脏等高表达。蛋白激酶A(PKA)磷酸化IPP1的35位苏氨酸，为IPP1发挥其抑制磷酸酶的功能所必须，引起广泛的细胞应答如影响细胞周期、基因表达、糖代谢以及脂类代谢、突触可塑性等。可见，IPP把蛋白激酶和蛋白磷酸酶连接起来，调节细胞的信号转导。 免疫组化表明在肝癌细胞、恶性成骨瘤和软组织瘤，骨肉瘤、恶性皮肤纤维瘤、脂肪肉瘤中，PP1表达上调，PP1活性也随之升高，表明PP1的过表达可加速恶性肿瘤的生长。而用PP1的抑制剂冈田酸和花萼海绵诱癌素A可增强TNF诱导的凋亡并引起PP1、PP2A羧基末端修饰如去甲基化；周期肽nodularin和微囊藻素LR可诱导人乳腺癌细胞MEF—7以caspase-3依赖的方式凋亡。PP1与细胞周期的关系较为密切：在G1期和S期，PP1存在于胞浆；在G2期则部分向核内聚集；在M期与染色体紧密结合并能促进有丝分裂的完成。PP1基因的突变、反义寡核苷酸或PP1的抑制剂可通过影响纺锤体组装，诱导有丝分裂停滞而延迟有丝分裂进程；或使染色体过度凝集导致姊妹染色体分离异常最终导致多倍体生成而抑制细胞生长。表明PP1、PP2A可维持正常的有丝分裂。第二军医大学博士学位论文中文摘要 我们利用cDNA文库大规模测序和EST同源比较的方法，从正常人骨髓基质细胞中分离到一种新型全长基因，全长为1637bp，含348bp编码区，编码116个氨基酸，与其他分子的同源性比较，提示其可能属于I型磷酸酶的抑制亚基Ippl(inhibitor of protein pho印hatasel)家族，尤其在N端功能区与人Ippl高度同源，因此将该新基因命名为IppZ(inhibitor ofprotein phosphataseZ)。 本课题以人宫颈癌细胞HeLa为实验模型，研究了IPPZ对其生长的影响，并探讨其相关作用机制。具体包括:l)筛选稳定表达IPPZ的野生型和持续活化型的HeLa细胞株;2)稳定表达IPPZ的野生型和持续活化型的HeLa细胞株的增殖和迁移实验;并通过荷瘤裸鼠体内实验观察其对HeLa细胞生长的体内抑制作用3)FACS分析其细胞周期的变化;4)利用W七stem blot和免疫共沉淀等方法分析其细胞周期调控蛋白的变化5)进一步探讨了相关的信号传导途径。 我们构建了人野生型IPPZ真核表达载体(IPPZ/WT)和突变活化型IPPZ真核表达载体(IPPZ/SHI一2)。该型为短片段持续活化型，编码第8一60位氨基酸，其中第40位苏氨酸突变为天冬氨酸。 为了研究IPPZ对HeLa细胞生长的影响，我们将IPPZ的野生型、活化型及对照空质粒分别转染HeLa细胞，获得稳定表达细胞株，Rl’- PCR及W七stem blot证实其基因转染成功。利用3H一TdR掺入法、软琼脂克隆形成实验和迁移实验对其生长、迁移能力进行分析，结果表明，与对照组相比，转染IPPZ活化型的HeLa细胞(HeLa一IPPZ/S Hl一2)的生长受到显着抑制，其克隆形成能力和迁移能力均显着下降。然后，观察了IPPZ在体内的抑瘤效果，将稳定转染的HeLa细胞在裸鼠体内进行了致瘤性观察，结果表明，HeLa一I即2/SHI一2和HeLa一IPPZ/WT的致瘤性明显下降，而且前者的抑瘤效果更显着。此外，应用在体电脉冲技术(i n vivoelectroporation)将真核表达质粒进行裸鼠瘤体内基因导入，结果表明，IPPZ活化型(IPPZ/SHI一2)基因治疗组的荷瘤裸鼠的生存期明显延长。表明，IPPZ对HeLa细胞的生长具有体内外抑制作用. 为了阐明IPPZ对HeLa细胞的生长抑制作用的机制，本研究对工PPZ瞬时表达和稳定表达的HeLa细胞均进行了细胞周期分析。结果表明IPPZ活化型(IPPZ/SHI一2)的瞬时表达可导致HeLa细胞GZ/M期细胞比例升高。对IPPZ稳定表达的HeLa细胞，我们首先采用血清饥饿法，分析恢复血清后的细胞周期的第二军医大学博士学位论文中文摘要进程。结果显示，在72小时内，HeLa-IPPZ/S Hl一2所经历的周期次数较其他组少，而且从总的趋势看，HeLa一IPPZ/S Hl一2的G2/M期细胞比例升高(尤其在恢复血清后的12小时内)，S期比例降低。HeLa-IPPZ/WT在72小时内的周期次数介于HeLa一IPPZ/SHI一2与对照组之间。表明IPPZ的活化型(IPPZ/SHI一2)和野生型 (IPPZ/WT)的稳定表达均可影响HeLa细胞的细胞周期进程，使细胞周期时间延长，因而可导致HeLa细胞增殖缓慢，但前者对细胞周期进程的影响更强，因而解释了在裸鼠的体内致瘤实验中IPPZ/S Hl一2的抑瘤作用更强的原因。此外由于IPPZ/SHI一2的稳定表达还可使HeLa细胞的(本文来源于《第二军医大学》期刊2004-05-01）
型磷酸酶的抑制亚基论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景与目的:Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1(inhibitor-1 of protein phosphataseⅠ,PPI1)依赖于35位苏氨酸的磷酸化而发挥抑制作用。本研究目的在于观察PPI1野生型和持续活化型突变体的表达对宫颈癌细胞株的凋亡及凋亡刺激敏感性的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:通过Lipofectamine介导,用PPI1野生型和持续活化型突变体表达质粒分别转染HeLa细胞,以未转染的及转染空载体的HeLa细胞为对照组,用RT-PCR和Western blot鉴定目的蛋白的表达;通过克隆形成实验观察PPI1对细胞克隆形成能力的影响,用Hoechst33258荧光染色、亚二倍体分析法分析PPI1对HeLa细胞凋亡的影响,用流式细胞术分析转染PPI1后的HeLa细胞对肿瘤坏死因子(tumor-necrosis factor,TNF)凋亡刺激的敏感性,用Western blot分析PPI1对凋亡相关蛋白表达及MAPK信号转导通路的影响。结果:PPI1野生型和持续活化型突变体在HeLa细胞中能够有效表达。荧光染色和亚二倍体分析均表明PPI1持续活化型突变体的表达使细胞凋亡增多,并能明显抑制HeLa细胞的克隆形成能力。Western blot分析表明,PPI1持续活化型突变体可使促凋亡分子P53、P27、BAK表达上调,而抗凋亡分子Bcl-2和Bcl-xL的表达下调。流式细胞术分析表明PPI1持续活化型突变体表达的HeLa细胞在TNF-α刺激后细胞凋亡率为19.06%,而对照组为2.67%和1.89%。Westernblot分析表明,TNF刺激后,在JNK信号转导通路中,该组细胞JNK的磷酸化程度比对照组明显增强,而且持续的时间也较长;对于p38信号转导通路,则在TNF刺激30min后,p38出现磷酸化,而其他组均无。结论:PPI1持续活化型突变体的表达可诱导宫颈癌细胞株的凋亡,并能明显增强HeLa细胞对TNF凋亡刺激的敏感性,其中涉及到JNK、p38信号转导通路的活化增强。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
型磷酸酶的抑制亚基论文参考文献
[1].曾麒燕,黄毓,曾麟杰,贺菽嘉,张红.Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用[J].基因组学与应用生物学.2009
[2].曾麒燕,秦雪,张红.Ⅰ型磷酸酶抑制亚基-1对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响[J].癌症.2007
[3].曾麒燕.Ⅰ型磷酸酶的新型抑制亚基(IPP-2)的抗肿瘤作用及机制研究[C].第八届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集.2004
[4].曾麒燕.Ⅰ型磷酸酶的新型抑制亚基（IPP2）的抗肿瘤作用及其机制研究[D].第二军医大学.2004
标签：Ⅰ型磷酸酶的抑制亚基-1; HeLa细胞; 增殖; 细胞周期;