间接竞争酶联免疫吸附测定水产品中的组胺残留

论文摘要

本文通过制备特异性识别组胺衍生物的多克隆抗体,建立了针对水产品中组胺的间接竞争酶联免疫吸附分析方法（ic-ELISA）。以组胺等为反应原料经三步化学反应合成组胺半抗原,采用活泼酯法将组胺半抗原分别与牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联作为包被原和免疫原,用紫外扫描法进行鉴定,结果显示组胺半抗原与载体蛋白偶联成功。通过免疫新西兰大白兔制备组胺抗血清,采用辛酸-硫酸铵方法纯化血清获得了相应的特异性多克隆抗体。通过对ic ELISA系列反应条件的摸索,确定了各组分的最适工作条件。试验结果表明:该方法对于组胺的IC50为0.91 ng/mL,与组氨酸、N-酰基组氨酸、3-甲基组胺等多种类似物及其衍生物均无交叉反应,方法特异性良好;线性检测范围为0.1～8.1 ng/mL,检出限为0.10 ng/mL;按照10、20、30 ng/g的添加量添加组胺至鱼、虾和贝类样品中,测得其回收率为98.9%～130.1%。方法检测的准确性好灵敏度高,适用于实际水产样品中组胺的检测。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 组胺检测半抗原的合成路线
•   1.3 组胺检测人工抗原的合成与鉴定
•   1.4 动物免疫及抗血清的制备
•   1.5 标准品的酰化过程
•   1.6 ic-ELISA操作步骤
•   1.7 组胺检测标准曲线绘制
•   1.8 组胺ic-ELISA方法特异性分析
•   1.9 实际样品的检测
• 2 结果与分析
•   2.1 半抗原的设计、合成与鉴定
•   2.2 人工抗原的鉴定
•   2.3 标准曲线的绘制
•   2.4 特异性分析
•   2.5 实际样品的检测
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 袁利鹏,刘波

关键词: 组胺,酰化,酶联免疫吸附测定,水产品

来源: 现代食品科技 2019年07期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 广东农工商职业技术学院热带农林学院

基金: 广东省自然科学基金项目(2015A030313793),国家级星火计划项目(2015GA780082),广东农工商职业技术学院重点课题(xyzd1606),广东省教育厅高职食品加工技术专业领军人才项目

分类号: TS254.7

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.7.041

页码: 291-295

总页数: 5

文件大小: 254K

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