导读:本文包含了片段分离论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献，主要关键词:基因,片段,基因组,水稻,病毒,扁桃,菖蒲。
片段分离论文文献综述写法
董梅,姚学君,马永法[1]（2019）在《江苏省新型布尼亚病毒分离株全长S片段基因特征分析》一文中研究指出目的分析江苏省新型布尼亚病毒(SFTSV)分离株全长S片段基因的特征,为SFTSV监测和防控提供依据。方法通过GenBank获取江苏省上传的SFTSV毒株全长S片段基因序列信息,通过构建系统进化树鉴定基因型,分析各毒株间核苷酸和氨基酸序列的同源性。结果获取江苏省上传的35株SFTSV毒株基因信息,毒株分离年份为2010—2014年,主要为人源毒株,有28株,占80.00%。基因亚型主要为C4和C2,分别有16和14株,分别占45.71%和40.00%。35株SFTSV毒株全长S片段基因核苷酸序列同源性百分比为94.38%～100.00%,氨基酸序列同源性百分比为89.42%～100.00%;35株毒株与各亚型参考毒株间核苷酸序列同源性百分比为94.11%～100.00%,氨基酸序列同源性百分比为89.18%～100.00%;人源毒株与宿主动物分离株间核苷酸和氨基酸同源性为94.74%～99.91%和91.42%～99.80%。结论江苏省SFTSV分离株序列间亲缘性较近,其核苷酸和氨基酸高度同源。(本文来源于《预防医学》期刊2019年01期）
吴桂叶,刘慧南,刘崇峻,宋振国,朱阳戈[2]（2018）在《片段组装技术研发铜钼分离高效抑制剂》一文中研究指出铜钼分离药剂是实现铜钼分离的核心,常用的铜钼分离抑制剂主要有硫化钠、硫氢化钠、诺克斯试剂、巯基乙酸钠及氰化物等,存在用量大、成本高、环境污染严重、适用性差等问题。针对这一问题,利用基于片段的分子组装技术,采用筛选确定先导化合物、先导化合物片段拆分再组装调控的方法,结合计算机辅助分子技术研发高效抑制剂BK511。MS软件计算该药剂与黄铜矿的相互作用能显着大于硫化钠、巯基乙酸钠等,且与辉钼矿的相互作用能大于零,实现选择性高效抑铜浮钼。铜钼矿山工业应用表明,BK511对铜抑制能力强,用量少,可以替代硫氢化钠(硫化钠),药剂用量为硫氢化钠用量的10%~20%,可大幅降低药剂成本,并显着改善车间操作环境,工业应用中可以大幅度降低选矿厂尾水中的硫化物含量。(本文来源于《矿产保护与利用》期刊2018年03期）
陈婷婷,余曦瑶,任燕萍,罗淑萍,郭淑朋[3]（2017）在《不同长度AlsCBF基因启动子片段分离及瞬时表达分析》一文中研究指出CBF基因在冷驯化过程中发挥重要的作用。本研究依据已克隆的新疆野扁桃(Amygdalus ledebouriana Schleche)CBF基因启动子顺式作用元件的分布,构建ACpro-P1(1 110 bp)、ACpro-P2(923 bp)、ACpro-P3(654 bp)和ACpro-P4(350 bp)4个5'缺失植物表达载体;利用烟草叶片注射法瞬时表达分析后进行GUS组织染色分析和定量分析。结果显示这4个片段均具有诱导型启动子活性,启动子Als CBF在-1 391~-1 110 bp之间并无与低温、高盐、干旱叁类逆境密切相关的启动子元件;-1 110~-654 bp之间存在大量与低温响应相关的启动子元件;-1 110~-923 bp之间存在能够响应高盐胁迫的元件,而-923~-350 bp之间可能存在一些负调控元件,降低了启动子对高盐的响应;-923~-654 bp之间存在大量与干旱胁迫有关的响应元件。研究结果为进一步分析Als CBF的功能奠定基础。(本文来源于《分子植物育种》期刊2017年12期）
赵莉佩[4]（2017）在《中国不同地区球形孢子丝菌临床分离株的扩增片段长度多态性分析及表型特征研究》一文中研究指出背景:孢子丝菌病是由双相型真菌申克孢子丝菌复合体(Sporothrix schenckii complex)感染引起的常见深部真菌病,在世界各地广泛流行,可累及皮肤甚至造成系统性感染,迁延不愈。最近分子生物学研究发现申克孢子丝菌是由6个亲缘种构成的复合体,包括狭义的申克孢子丝菌(Sporothrix schenckii sensu stricto)、巴西孢子丝菌(Sporothrix brasiliensis)、球形孢子丝菌(Sporothrix globosa)、卢艾里孢子丝菌(Sporothrix luriei)、墨西哥孢子丝菌(Sporothrix mexicana)和苍白球孢子丝菌(Sporothrix pallida)。球形孢子丝菌是我国孢子丝菌病的主要优势菌种,然而我国不同地区来源的临床菌株表型仍存在差异,且部分研究表明存在一定的遗传变异性,因此深入研究球形孢子丝菌是否存在基因型、表型特征、药物敏感性等的差异具有重要意义。目的:对我国不同地区孢子丝菌病的临床分离株进行种系发生分析及表型特征分析,利用扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)研究我国不同地区来源的球形孢子丝菌临床分离株基因多态性,并探讨其与临床分型、地理来源、药物敏感性及菌株生长速度的相关性。方法:1.收集2009年至2013年来自中国8个不同省市孢子丝菌病的225株临床分离株及患者临床资料。对所有临床分离株的钙调蛋白(CAL)基因片段进行扩增并测序,将CAL序列上传至Genbank数据库进行比对,利用MEGA 6.0软件,采用Neighbor-Joining法进行系统进化分析构建种系发生树。2.通过限制性内切酶组合Eco RⅠ和Saq AⅠ,对AFLP分析中各实验步骤进行优化,并用64对引物进行筛选,选取1对DNA多态性较好的引物;采用优化后的AFLP反应体系,对225株临床分离株进行AFLP分析,利用NTSYS-pc version 2.10对结果进行聚类分析。3.将225株临床分离株接种于马铃薯琼脂培养基(PDA)中,分别置于30℃、35℃和37℃温箱中,于7天、14天、21天分别观察菌落直径,计算生长速度;同时将临床分离株进行碳源同化实验。4.参照Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI)颁布的微量液基稀释法M38-A2方案,选用临床分离株的菌丝相,对来源于不同AFLP基因型别,分别包括Ⅰ型(n=10)、Ⅱ型(n=10),Ⅲ型(n=2)、Ⅳ型(n=9)、Ⅴ型(n=4)、Ⅵ型(n=2)、Ⅶ型(n=3)、Ⅷ型(n=3),共43株临床分离株进行体外药物敏感性实验,检测的抗真菌药物包括氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、泊沙康唑、卡泊芬净、阿巴康唑。结果:1.建立球形孢子丝菌AFLP反应的最佳体系:约1000ng模板DNA经限制性内切酶Fast Digest Eco RⅠ与Fast Digest Saq AⅠ(各1U),37℃酶切5min;取8μl酶切液加入1μl Eco RⅠ接头、1μl Saq AⅠ接头、T4DNA连接酶2.5U,25℃连接1h;20μl扩增体系,取稀释20倍的连接产物5μl,加入Mg2+2m M、Taq酶1U、d NTPs 0.2m M each、引物0.1μM;20μl扩增体系,取稀释20倍的预扩增产物5μl,加入Mg2+1m M、Taq酶1.5U、d NTPs 0.15m M each、引物0.06μM。选择性扩增引物采用E4:GACTGCGTACCAATTCACT,M1:GATGAGTCCTGAGTAACAA效果较好。2.通过对225株临床分离株的CAL基因序列鉴定,结果显示所有菌株均为球形孢子丝菌,系统进化树显示各地区的球形孢子丝菌可分为3个Subgroup(命名为globosaⅠ,globosaⅡ,globosaⅢ),globosaⅠ最常见,首次发现globosaⅢ。AFLP聚类分析可得到8个区分明显的型别(命名为I至Ⅷ),其中Ⅰ型(23%)、Ⅱ型(41%)和Ⅳ型(22%)最为常见。来自长春的临床分离株主要分为Ⅱ型(35/60)和Ⅳ型(25/60),四平的临床分离株主要聚类于Ⅱ型(23/31),吉林市的临床分离株(18/20)和白城的临床分离株(12/13)以Ⅰ型为主,Ⅲ型(n=2)和Ⅷ型(n=3)全部为松原的临床分离株。AFLP基因分型和地理来源之间存在一定的相关性,但并未发现与临床分型的相关性。3.所有球形孢子丝菌在PDA上于30℃培养21天后,菌落直径达16~42mm,于35℃培养21天后,菌落直径达3~15mm,而大部分临床分离株(218/225)在37℃呈限制性生长(菌落直径达1.5~5.5mm),少数(7/225)不能生长;所有球形孢子丝菌临床分离株均能同化蔗糖不能同化棉子糖;对于球形孢子丝菌的菌丝相,特比萘芬表现最好的抗真菌活性,MIC值为0.03~8μg/ml,GM值为0.05μg/ml;其次为泊沙康唑、阿巴康唑、卡泊芬净,MIC值分别为0.5~>16μg/ml、4~16μg/ml、0.25~>16μg/ml,GM值分别为2.99μg/ml、8.26μg/ml、9.55μg/ml;而伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、氟康唑的MIC值均较高,分别为1~>16μg/ml、8~>16μg/ml、>16μg/ml、>64μg/ml。统计学分析显示,每种抗真菌药对不同临床分型、不同基因型别、不同地理来源的球形孢子丝菌的MIC值无明显差异。结论:1.球形孢子丝菌为我国孢子丝菌病的主要致病菌种。2.在种系发生上,球形孢子丝菌可进一步分为3个亚组。我国globosaⅠ最常见,首次发现globosaⅢ。3.采用AFLP方法,利用Eco RⅠ-ACT/Saq AⅠ-CAA引物可将球形孢子丝菌分为8个主要基因型别。孢子丝菌病的临床分型与AFLP基因分型无相关性。4.中国南北区域的球形孢子丝菌AFLP基因分型有明显的地域分布特征,其中吉林省的基因分型与省内城市分布有一定的相关性。5.大部分球形孢子丝菌在37℃呈限制性生长,仅有少数不能生长;球形孢子丝菌能同化蔗糖,不能同化棉子糖;八种抗真菌药物中,特比萘芬的抗真菌活性最高,其次为泊沙康唑、阿巴康唑、卡泊芬净,而伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、氟康唑的MIC值均较高。球形孢子丝菌对药物的敏感性与孢子丝菌病致病的临床分型、菌株的基因分型、地理来源无关。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-11-01）
陶磊[5]（2017）在《论分离DNA片段基因检测法的专利适格性》一文中研究指出基因检测在医疗领域的应用关乎人的生存发展,关于基因检测的专利适格性的争论往往来源于基因检测本身特性和对社会公共利益的影响这两方面。2013年的 Association for Molecular Pathology v.Myriad Genetics 案(以下简称 Myriad案)就是体现这种矛盾的典型。美国联邦最高法院在Myriad案中否定了分离DNA片段的专利适格性,而对于cDNA,肯定了其专利适格性。但遗憾的是,美国联邦最高法院的判决中明确指出判决不涉及方法的专利适格性,留下了值得探讨的问题——基因检测法的专利适格性。本文的研究内容从美国联邦最高法院对Myriad 一案的判决出发,以分析基因检测的专利适格性。从法律角度以及公共政策角度出发,归纳审理过程中对基因相关专利适格性的分析思路,结合以往相关判例形成的专利适格性判断原则,利用Myriad案后美国专利商标局(USPTO)发布最新的审查指南中的判断专利适格性的标准,叁者形成关于专利适格性的判断系统,利用这个系统以研究基因检测法的专利适格性。通过美国基因检测专利适格性的标准的启示,对于我国专利适格性的审查,首先要界定适格的基因检测方法与在我国属于非适格专利主题的疾病诊断方法的区别,再从公共利益角度对我国基因检测法专利适格的条件进行分析,得出Myriad案对我国基因专利适格性判断标准的启示和自己的建议。利用上述法律、判例和审查标准,本文认为应当以从叁个方面的因素考虑,得出对于基因检测法适格性的判断:(1)被检测基因片段的来源,即自然分离的DNA和人工合成的cDNA的适格性,这一点Myriad案后美国给出的答案是自然分离的DNA具有适格性,人工合成的cDNA的适格性。对于我国的审查标准而言,从公共政策角度,应当限制被检测基因片段适格范围(2)基因检测法的技术特征,对于改进了技术特征的检测法应当认为具有适格性。而对于相同技术特征的检测法应用于不同于基因,从公共利益出发,考虑适当限制授予其专利。(3)基因检测的应用领域,即讨论了基因检测法落入疾病诊断方法的范畴的条件。(本文来源于《厦门大学》期刊2017-06-30）
江彤,何志龙,张享享,夏伟伟,李祥宇[6]（2017）在《南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物S7片段的克隆及其S7-1基因编码蛋白的原核表达》一文中研究指出为探讨南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的种群变异并获得S7-1原核表达蛋白,采用RT-PCR技术扩增SRBSDV安徽分离物S7片段,并进行克隆、测序及序列分析,再利用特异性引物扩增该分离物S7-1基因并克隆到原核表达载体p ET-GST上,重组质粒p ET-S7-1转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导及Ni~(2+)-NTA亲和柱纯化融合蛋白,再进行Western blot检测。结果显示,SRBSDV安徽分离物S7片段与其它SRBSDV各个分离物S7片段的序列相似性极高,达99.3%~99.9%,而与斐济病毒属Fijivirus其它种之间的序列相似性较低,为35.5%~73.3%。SRBSDV安徽分离物与其它SRBSDV各个分离物聚成1个单独的分支,彼此间亲缘关系较近。试验获得了分子质量约为68 k D的S7-1融合蛋白,且GST单抗能够与S7-1融合蛋白发生特异性反应,表明本研究得到的融合蛋白确为靶标蛋白。(本文来源于《植物保护学报》期刊2017年03期）
丁青,刘月鹏,朱晓鹏,吴科榜,罗素兰[7]（2017）在《菖蒲芋螺不同大小基因组DNA片段的分离制备》一文中研究指出使用常规酚/氯仿抽提法(CTAB法)、离心柱法和磁珠吸附法,分别从菖蒲芋螺毒腺、肌肉及肝胰脏中提取基因组DNA,利用普通琼脂糖凝胶电泳与脉冲场电泳(PFGE)对基因组DNA片段进行分离,并检测提取DNA的大小和分布范围,同时,对脉冲场电泳条件进行了优化。结果表明,3种方法均可提取基因组DNA,其中CTAB法和离心柱法提取的毒腺DNA纯度高,产率大,可用于后续实验,而磁珠法产率适中且纯度不高,但离心柱法的DNA片段较小,大多在9 kb以下,而CTAB法提取的DNA片段较大,获得的20 kb以上的大片段量较多,更适合于大片段基因组文库的构建。3种芋螺组织中,肝胰脏产率最高但片段弥散有降解,毒腺DNA片段较大且集中,产率也较高,而肌肉的DNA片段产率最低且片段较小。因此,用CTAB法提取菖蒲芋螺毒腺的DNA更适合构建大片段基因组DNA文库。筛选高质量的菖蒲芋螺的DNA,利用优化的脉冲场电泳条件进行分离回收,获得了不同大小片段的DNA,为后续菖蒲芋螺不同载体系统的基因组文库构建奠定了基础。(本文来源于《热带生物学报》期刊2017年03期）
潘伟,万振江,卢晓霞[8]（2017）在《具抗病毒黄精寡糖核心片段的分离纯化与四糖结构》一文中研究指出寡糖极性大、异构体多、结构复杂,对其研究尤其是对天然来源寡糖的分离纯化与结构确认具有重要的理论和临床应用价值.以传统中药百合科黄精属植物多花黄精为原料,从分离纯化出的具有抗病毒活性的核心寡糖片段出发,制备了聚合度单一的黄精四糖,并以UV、IR、NMR、ESI-MS n、HPLC、GC-MS等多种手段对其组成与结构进行充分解析.结果表明四糖虽然聚合度单一,但仍存在多种同分异构体,且以直链结构的四糖为主,其中→2)-β-D-Fruf以及(2→1)-β-D-Fruf的含量最多,2→6)-β-D-Fruf较低,并且有的同分异构体具有典型的β-D-Fruf-(2→1)-α-D-Glcp结构,但含量甚微.本研究从具抗病毒活性的黄精寡糖分离纯化获得黄精四糖并阐明结构,可为进一步构建活性寡糖小分子和指导多糖类化合物新药设计奠定基础.(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2017年01期）
张玲,王艳芳,麦迪,张伟,胡振林[9]（2017）在《红花二氢吡啶二羧酸合酶基因片段的分离及表达分析》一文中研究指出目的克隆红花Carthamus tinctorius赖氨酸合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶(dihydrodipicolinate synthase,DHDPS)基因并研究其在不同发育时期红花籽粒中的表达量。方法根据红花转录组文库注释信息筛选出与红花DHDPS(Ct DHDPS)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花总RNA的反转录产物为模板,采用RT-PCR技术克隆Ct DHDPS基因片段,连接p EASY-T1克隆载体,经PCR和酶切鉴定,筛选阳性克隆并测序。同时利用荧光定量PCR技术对其在红花籽粒不同发育时期基因表达量进行分析。结果分离到长度为396 bp的Ct DHDPS基因片段,系统发育树分析表明该基因与其他物种的DHDPS基因具有较高的同源性。结论克隆了Ct DHDPS基因的核心片段,根据Ct DHDPS基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行基因表达量分析,Ct DHDPS基因在红花品种川红1号初花后14 d表达量最高。(本文来源于《中草药》期刊2017年02期）
江彤,单文书,夏伟伟,张享享,蒋西子[10]（2017）在《南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物S5片段的克隆及S5-2基因的原核表达》一文中研究指出【目的】探讨南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)安徽分离物(SRBSDVAn Hui-HN2)的遗传特性,并获得原核表达的P5-2蛋白。【方法】RT-PCR扩增SRBSDV S5片段,克隆、测序并进行序列分析。将S5-2基因插入原核表达载体,重组载体转化大肠埃希菌并用IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化融合蛋白,SDS-PAGE分析P5-2蛋白的表达情况。【结果】SRBSDV-An Hui-HN2 S5片段全长3 167 bp,包含S5-2基因全长612 bp,编码204个氨基酸。序列比对结果显示,SRBSDV-An Hui-HN2 S5片段与其他SRBSDV分离物S5片段的序列相似性极高,达99.0%~99.7%,而与斐济病毒属(Fijivirus)其他成员S5片段的序列相似性较低,仅为38.0%~71.3%;构建的S5片段系统发育树表明SRBSDV和RBSDV聚成1个分支,其中6个SRBSDV分离物聚成1个亚分支。原核表达获得相对分子质量约为47 000的重组蛋白,Western blot分析显示,GST单抗能够与重组融合蛋白发生特异性反应。【结论】SRBSDV各分离物之间亲缘关系非常近,而与Fijivirus其他成员亲缘关系较远,原核表达获得的融合蛋白为靶标蛋白。(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2017年01期）
片段分离论文开题报告范文
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
铜钼分离药剂是实现铜钼分离的核心,常用的铜钼分离抑制剂主要有硫化钠、硫氢化钠、诺克斯试剂、巯基乙酸钠及氰化物等,存在用量大、成本高、环境污染严重、适用性差等问题。针对这一问题,利用基于片段的分子组装技术,采用筛选确定先导化合物、先导化合物片段拆分再组装调控的方法,结合计算机辅助分子技术研发高效抑制剂BK511。MS软件计算该药剂与黄铜矿的相互作用能显着大于硫化钠、巯基乙酸钠等,且与辉钼矿的相互作用能大于零,实现选择性高效抑铜浮钼。铜钼矿山工业应用表明,BK511对铜抑制能力强,用量少,可以替代硫氢化钠(硫化钠),药剂用量为硫氢化钠用量的10%~20%,可大幅降低药剂成本,并显着改善车间操作环境,工业应用中可以大幅度降低选矿厂尾水中的硫化物含量。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
片段分离论文参考文献
[1].董梅,姚学君,马永法.江苏省新型布尼亚病毒分离株全长S片段基因特征分析[J].预防医学.2019
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