氨基酰化酶论文_朱振亚,白成玲,王磊,王旭东,郭利妍

导读:本文包含了氨基酰化酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:氨基,杆菌,氨基酸,密码子,基因,核糖体,性质。

氨基酰化酶论文文献综述

朱振亚,白成玲,王磊,王旭东,郭利妍[1](2019)在《氧化石墨烯-氨基酰化酶/聚偏氟乙烯复合膜的制备及特性》一文中研究指出通过静电吸附法成功制备了氧化石墨烯-氨基酰化酶(GO-acylase)颗粒。将GO和GO-acylase颗粒分别添加到聚偏氟乙烯(PVDF)铸膜液中,通过相转化法制备了GO/PVDF和GO-acylase/PVDF复合膜。结果显示,GO-acylase/PVDF复合膜的粗糙度最低(Ra=8.21nm),表面最平滑。GO/PVDF和GO-acylase/PVDF复合膜的接触角较小(73.72°和71.31°),说明复合膜的亲水性优于纯PVDF膜。由于GO的添加会增强溶质和非溶质之间的转化过程,从而导致GO/PVDF复合膜的纯水通量最大(69.0L/(m~2 h))。经过测定,GO-acylase/PVDF复合膜的生物活性在4℃下可以持续4周左右。研究结果表明,GO-acylase/PVDF复合膜的成功制备为抗生物污染膜的研发提供了新思路。(本文来源于《复合材料学报》期刊2019年11期)

黄驿胜,王竞枫,林枫,叶启文,李林立[2](2018)在《氨基酰化酶-1在肝癌组织中的表达及其临床意义》一文中研究指出目的探究氨基酰化酶-1(ACY-1)在肝细胞癌(肝癌,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织中的ACY-1 mRNA表达进行检测;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肝癌和癌旁标本中ACY-1蛋白的表达,同时结合免疫组化的方法分析了ACY-1蛋白的表达与HCC的关系。结果 qRT-PCR和Western blot结果表明癌旁组织中ACY-1的mRNA和蛋白的表达高于肝癌组织。免疫组化结果与Western blot结果一致。另外,通过对ACY-1免疫组化结果与临床病理参数分析发现,ACY-1蛋白表达与AFP水平密切相关。结论 ACY-1可能与肝癌的发生发展密切相关。(本文来源于《实用医药杂志》期刊2018年03期)

胡礼珍[3](2017)在《TIR区密码子选择对D-氨基酰化酶表达影响的研究》一文中研究指出D-缬氨酸,化学名为D-2-氨基-3-甲基丁酸,是合成抗生素、生理活性肽、农药等多种产品的重要原料,广泛应用于医学、生物和农业等研究领域,D-缬氨酸应用带动了其制备技术研究的发展。D-型氨基酸的制备方法主要有两类:一是利用酶或化学不对称合成,二是通过化学法外消旋后进行手性拆分。N-酰基-D-氨基酸酰胺水解酶(D-氨基酰化酶,3.5.1.81)催化的手性拆分是目前制备D-型氨基酸的主要途径。不同来源的D-ANase对不同底物的催化效率差别较大,其最适作用底物一般为D-Met、D-Leu及D-Phe的N-酰基衍生物,但是对于手性合成领域中作为重要有机手性源的D-缬氨酸的N-酰基衍生物,部分D-ANase转化效率较低。以D-缬氨酸作为衡量指标,Alcaligenes属来源的D-氨基酰化酶活力最高。将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于PCR技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-trx-dan,转化进E.coli BL21(DE3)中进行融合表达。经SDS-PAGE、Western-blot和活性测定,D-ANase可在大肠杆菌中进行高效表达。利用CLC Main Workbench 6预测非融合表达载体pET-dan转录mRNA的TIR区二级结构,统计起始密码子ATG下游连续四个氨基酸同义密码子替换后144种序列的ΔG值、ATG区域以及RBS区域形成的双键数量。挑选出ΔG值高、中、低叁组序列,每组各6个,构建非融合表达载体并检测外源蛋白的表达和D-ANase活性。ΔG绝对值低组可明显的外源蛋白表达,也能检测到较高的菌体内酶活,为工业化应用奠定良好基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-06-01)

陶金,倪孟祥[4](2016)在《粪产碱杆菌D-氨基酰化酶的分离纯化及发酵条件优化》一文中研究指出采用热激法将含粪产碱杆菌D-氨基酰化酶基因载体的质粒导入大肠杆菌,筛选重组子,对该工程菌产生的D-氨基酰化酶用Ni 2+柱进行分离纯化;通过单因素实验优化D-氨基酰化酶的发酵条件。结果表明,纯化后的D-氨基酰化酶比活力为456.71U·mg-1,纯化回收率为50%,纯化倍数为12.4倍;最佳发酵条件为:37℃通气培养至菌体浓度OD600值为0.6时,加入0.5mmol·L-1诱导剂IPTG诱导5h,在此条件下,D-氨基酰化酶酶活力为90.9U·mL-1。(本文来源于《化学与生物工程》期刊2016年04期)

张媛媛,张彬[5](2016)在《米曲霉氨基酰化酶的纯化及粗酶性质研究》一文中研究指出利用硫酸铵分级盐析法从米曲霉L-09中提取氨基酰化酶,比活力为56.01 U/mg,纯化倍数为2.06,酶活力回收率为80%。详细研究该粗酶的酶学性质。结果表明,经盐析法提纯的粗酶最适pH为7,最适反应温度为55℃,在55℃下热稳定性良好。溶液中的金属离子对酶活力有很大影响。其中,高浓度的Fe~(2+)、Mn~(2+)和Ca~(2+)对酶活力有抑制作用,低浓度的Co~(2+)离子对酶活力有激活作用。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2016年02期)

梁一茹,吴起,林贤福[6](2015)在《氨基酰化酶催化多米诺反应合成螺环化合物》一文中研究指出螺环化合物是一种由单个原子连接两个双环的有机化合物,许多天然产物分子以及药物中都含有螺环结构。而具有吲哚结构的螺环化合物在医药、农药、染料和精细化工等方面具有重要的应用价值。由于螺环化合物重要的生物活性,用化(本文来源于《2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集》期刊2015-08-21)

刘建,李明堂,李洪广,孙立志[7](2015)在《新型D-氨基酰化酶的特性及固定化酶的研究》一文中研究指出本文研究了一株具有N-酰基酰化酶(DAA)生产能力的细菌,通过对其酶学特性及固定化酶用于D-氨基酸的生产进行了研究。显示此酶的最适温度为37℃,最适p H7.4,1mmol/L以下的Ca Cl2,Cd Cl2,Co Cl2,Cu Cl2,Fe Cl2,Hg Cl2,Mn Cl2,Zn Cl2对酶的活性没有影响,在20mmol/L的EDTA条件下仍可保持65%的酶活性。底物特异性显示酶的最佳底物是N-乙酰-D-苯丙氨酸,50mmol/L以上的N-乙酰-D-苯丙氨酸显着抑制酶的活性。利用海藻酸钠固定酶后,在30℃条件下,使用50mmol/L的N-酰基-D-苯丙氨酸底物进行的降解实验显示水解率可以达到84%,转化批次达到6次以上,活性保持达到70小时以上。(本文来源于《长春理工大学学报(自然科学版)》期刊2015年02期)

侯欣彤,董媛,林瑞东,于梁,任媛媛[8](2014)在《来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达》一文中研究指出将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于聚合酶链反应(PCR)技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-dan,转化进E.coil BL21(DE3)中进行融合表达.经SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和活性测定发现,D-ANase可在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白可达到菌体总蛋白的69.2%,密码子优化后基因构建的工程菌发酵活性为96 U/mL,重组蛋白经超声细胞破碎及Ni2+柱亲和层析纯化,比活可达1692.3 U/mg,纯度可达95%以上.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2014年08期)

郑文宾,郑仁朝,郑裕国[9](2014)在《D-氨基酰化酶的研究进展》一文中研究指出D-氨基酰化酶是一类能特异性水解D-氨基酸N-酰基衍生物生成D-氨基酸的重要水解酶。随着D-氨基酸在医药、食品以及饲料等行业的需求量不断增大,深入研究D-氨基酰化酶具有十分重要的意义。本文从D-氨基酰化酶的分类、酶学性质、分子结构及催化机理等方面进行了综述,并对D-氨基酰化酶在工业上的应用前景进行展望。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2014年03期)

侯欣彤[10](2014)在《来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因工程菌的构建与酶学性质的研究》一文中研究指出D-缬氨酸,化学名为D-2-氨基-3-甲基丁酸,是合成抗生素、生理活性肽、农药等多种产品的重要原料,广泛应用于医学、生物和农业等研究领域,D-缬氨酸应用带动了其制备技术研究的发展。D-型氨基酸的制备方法主要有两类:一是利用酶或化学不对称合成,二是通过化学法外消旋后进行手性拆分。 N-酰基-D-氨基酸酰胺水解酶(D-氨基酰化酶,3.5.1.81)催化的手性拆分是目前制备D-型氨基酸的主要途径。不同来源的D-ANase对不同底物的催化效率差别较大,其最适作用底物一般为D-Met、D-Leu及D-Phe的N-酰基衍生物,但是对于手性合成领域中作为重要有机手性源的D-缬氨酸的N-酰基衍生物,部分D-ANase转化效率较低。以D-缬氨酸作为衡量指标,Alcaligenes属来源的D-氨基酰化酶活力最高。将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于PCR技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-trx-dan,转化进E.coli BL21(DE3)中进行融合表达。经SDS-PAGE、Western-blot和活性测定,D-ANase可在大肠杆菌中进行高效表达,目的蛋白能够达到菌体总蛋白的64%,密码子优化菌株的发酵酶活为96U/mL;去掉融合标签,直接利用T7启动子表达的D-ANase,D-ANase表达量占菌体总蛋白的53%,密码子优化菌株的发酵酶活为52U/mL,密码子未优化菌株的发酵酶活为39U/mL。利用CLC Main Workbench6预测非融合表达载体pET-dan转录mRNA的TIR区二级结构,统计起始密码子ATG下游连续四个氨基酸同义密码子替换后144种序列的ΔG值、ATG区域以及RBS区域形成的双键数量。挑选出ΔG值高、中、低叁组序列,每组各6个,构建非融合表达载体并检测外源蛋白的表达和D-ANase活性。ΔG绝对值低组可明显的外源蛋白表达,也能检测到较高的菌体内酶活。进一步的酶学性质研究表明,Alcaligenes A-6的D-ANase对D-氨基酸的酰基衍生物具有较好的立体选择性,对D-丙氨酸、D-亮氨酸、D-甲硫氨酸、D-苯丙氨酸、D-色氨酸、D-缬氨酸的底物有活性。以N-乙酰-DL-缬氨酸为底物,底物浓度10mmol/L,55℃、pH7.0~pH8.0时酶的催化效率最高;D-ANase固定化可更加高效的利用工程菌发酵得到的酶活力,经过十批次连续拆分N-乙酰-DL-缬氨酸,酶活还保留有原酶活的78%,为工业化应用奠定良好基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2014-06-01)

氨基酰化酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探究氨基酰化酶-1(ACY-1)在肝细胞癌(肝癌,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织中的ACY-1 mRNA表达进行检测;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肝癌和癌旁标本中ACY-1蛋白的表达,同时结合免疫组化的方法分析了ACY-1蛋白的表达与HCC的关系。结果 qRT-PCR和Western blot结果表明癌旁组织中ACY-1的mRNA和蛋白的表达高于肝癌组织。免疫组化结果与Western blot结果一致。另外,通过对ACY-1免疫组化结果与临床病理参数分析发现,ACY-1蛋白表达与AFP水平密切相关。结论 ACY-1可能与肝癌的发生发展密切相关。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

氨基酰化酶论文参考文献

[1].朱振亚,白成玲,王磊,王旭东,郭利妍.氧化石墨烯-氨基酰化酶/聚偏氟乙烯复合膜的制备及特性[J].复合材料学报.2019

[2].黄驿胜,王竞枫,林枫,叶启文,李林立.氨基酰化酶-1在肝癌组织中的表达及其临床意义[J].实用医药杂志.2018

[3].胡礼珍.TIR区密码子选择对D-氨基酰化酶表达影响的研究[D].吉林大学.2017

[4].陶金,倪孟祥.粪产碱杆菌D-氨基酰化酶的分离纯化及发酵条件优化[J].化学与生物工程.2016

[5].张媛媛,张彬.米曲霉氨基酰化酶的纯化及粗酶性质研究[J].食品研究与开发.2016

[6].梁一茹,吴起,林贤福.氨基酰化酶催化多米诺反应合成螺环化合物[C].2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会论文摘要集.2015

[7].刘建,李明堂,李洪广,孙立志.新型D-氨基酰化酶的特性及固定化酶的研究[J].长春理工大学学报(自然科学版).2015

[8].侯欣彤,董媛,林瑞东,于梁,任媛媛.来源于AlcaligenesA-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达[J].高等学校化学学报.2014

[9].郑文宾,郑仁朝,郑裕国.D-氨基酰化酶的研究进展[J].基因组学与应用生物学.2014

[10].侯欣彤.来源于AlcaligenesA-6的D-氨基酰化酶基因工程菌的构建与酶学性质的研究[D].吉林大学.2014

论文知识图

氨基酰化酶Ⅰ扩散进入大孔型胶囊...麸皮含量对米曲霉产氨基酰化酶...pH对固定化细胞氨基酰化酶的影...尿素含量对米曲霉产氨基酰化酶...Co2+对氨基酰化酶活力的影响温度对固定化菌体氨基酰化酶的...

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