导读:本文包含了缺氧预处理论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:心肌,细胞,活性氧,线粒体,激酶,凋亡,脑损伤。
缺氧预处理论文文献综述
罗芳,韩超,容倩胄[1]（2019）在《麝香保心丸预处理对缺氧复氧心肌细胞的保护作用研究》一文中研究指出目的研究麝香保心丸预处理对缺氧复氧心肌细胞的保护作用。方法 60例行冠状动脉介入治疗(PCI)的急性心肌梗死患者,根据PCI术前处理方法不同分为A组(31例)和B组(29例)。A组患者PCI术前给予常规处理联合麝香保心丸预处理, B组患者PCI术前仅予以常规处理。观察比较两组入院时及术后3 d的心肌标志物水平;入院时及术后3 d氧化应激指标及炎症指标水平;治疗效果;心功能及N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平。结果术后3 d,两组患者肌酸激酶(CK)、肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平均低于入院时,差异具有统计学意义(P<0.05);A组患者CK、cTnT、CK-MB水平分别为(94.52±12.02)U/L、(0.24±0.06)ng/ml、(21.01±5.20)U/L,均低于B组的(98.50±13.20)U/L、(0.25±0.10)ng/ml、(22.21±6.20)U/L,但差异无统计学意义(P>0.05)。术后3 d,两组患者血清超氧化物歧化酶(SOD)水平高于入院时, C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)水平低于入院时,差异具有统计学意义(P<0.05);A组患者SOD水平(110.23±8.02)μU/L高于B组(105.30±9.20)μU/L,CRP、IL-6水平分别为(7.23±1.55)mg/ml、(47.30±5.20)pg/ml,低于B组的(8.50±2.20)mg/ml、(51.00±6.20)pg/ml,差异具有统计学意义(P<0.05)。A组患者治疗总有效率96.77%高于B组的79.31%,差异具有统计学意义(P<0.05)。术后12个月随访, A组患者左室射血分数(LVEF)、室壁运动指数(WMI)、NTproBNP水平分别为(58.41±5.20)%、(1.15±0.25)、(68.32±8.02)pg/ml, B组患者LVEF、WMI、NT-proBNP水平分别为(55.80±6.30)%、(1.25±0.35)、(72.33±10.20)pg/ml,比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在心肌梗死患者再灌注治疗前使用麝香保心丸预处理,不显着增加对心肌细胞的保护作用,但可减少心肌耗氧量、减轻炎症反应、提高近期治疗效果,对远期心功能无明显的改善作用。(本文来源于《中国现代药物应用》期刊2019年21期）
王剑冰,杨威,赵明博,汪义淇,迟海洋[2]（2019）在《Tempol预处理在大鼠窒息后心跳骤停全脑缺氧缺血脑损伤模型中的保护作用及机制研究》一文中研究指出目的研究Tempol预处理在大鼠窒息后心跳骤停法制备全脑缺血缺氧脑损伤模型中的保护作用及机制。方法取30只雄性SD大鼠,随机分为对照组(6只)、常规复苏组(12只)与Tempol预处理组(12只)。常规复苏组与Tempol预处理组均构建缺血缺氧脑损伤模型,Tempol预处理组在气管夹闭前5 min给予100 mg/kg Tempol,常规复苏组和对照组给予等量生理盐水。取叁组大鼠脑内海马组织,行苏木精-伊红染色,观察细胞组织形态学改变;在自主循环恢复后6 h、12 h、24 h采用免疫组化法测定大鼠血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况。结果对照组皮层和海马区脑组织细胞轮廓清晰,结构未见异常,海马CA1区中VEGF与HIF-1α表达较弱。相比常规复苏组,Tempol预处理组海马组织损伤范围较小,程度较轻,水肿明显改善。Tempol预处理组在自主循环恢复后6 h、12 h、24 h海马组织中VEGF较常规复苏组显着升高,自主循环恢复后12 h、24 h时HIF-1α的表达较常规复苏组显著升高(P <0. 05)。结论 Tempol预处理具有减轻缺氧缺血脑损伤大鼠海马组织损伤程度,缓解水肿和炎症的作用,其作用机制可能与激活VEGF、HIF-1α表达存在密切关系。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2019年20期）
张伟,宋强,高成杰[3]（2019）在《不同浓度和时间七氟烷预处理对缺氧小鼠脑损伤的影响及可能机制研究》一文中研究指出目的研究不同浓度和时间七氟烷预处理对缺氧小鼠脑损伤的影响及可能机制。方法取40只C57BL/6J雄性小鼠,随机分为对照组(正常小鼠)、模型组(建立缺氧小鼠模型)、实验1组(建立缺氧小鼠模型+2%七氟烷预处理30 min)、实验2组(建立缺氧小鼠模型+4%七氟烷预处理30 min)、实验3组(建立缺氧小鼠模型+2%七氟烷预处理60 min),每组各8只。建立缺氧模型24 h后,观察各组小鼠脑组织海马CA1区形态学改变,比较各组血清乳酸脱氢酶(LDH)活性、脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛含量、脑组织血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)的水平。结果经光镜下观察可见小鼠脑组织海马CA1区细胞水肿、固缩,且实验1、2、3组小鼠病理改变较模型组均明显减轻。模型组血清LDH活性较对照组明显升高(P <0. 05)。实验1、2、3组血清LDH活性较模型组均明显下降(P <0. 05),且以实验3组最为明显。模型组脑组织丙二醛含量较对照组明显升高,实验1、2、3组脑组织丙二醛含量较模型组均显着下降(P <0. 05)。模型组和实验1、2组脑组织GPx活性较对照组均显着下降,实验3组脑组织GPx活性较模型组明显升高(P <0. 05)。模型组和实验1、2、3组脑组织SOD活性较对照组均显着下降,且实验1、2、3组脑组织SOD活性较模型组均显着下降(P <0. 05)。模型组脑组织VEGF和EPO的水平较对照组均明显升高(P <0. 05)。实验1、2、3组脑组织VEGF和EPO的水平较对照组和模型组均明显下降(P<0. 05),且以实验3组最为明显。结论通过七氟烷预处理可有效缓解缺氧导致的脑组织损伤,其作用机制可能与抑制氧化应激、调节抗缺氧蛋白合成密切相关,且2%七氟烷预处理60 min的效果更加明显。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2019年20期）
江宁彬[4]（2019）在《联合单肺缺氧预处理和改良肺复张对单肺通气手术患者的肺保护作用》一文中研究指出背景单肺通气(one-lung ventilation,OLV)指只利用一侧肺(非手术侧)进行通气的方法,其主要目的是实现肺隔离,为手术操作提供良好视野,是目前大部分胸科手术中必不可少的组成部分,且随着胸外科手术种类和术式的日益进展,单肺通气技术也面临着越来越大的挑战。单肺通气在围术期容易发生低氧血症和肺损伤,影响患者的预后。我们可采取多种方法纠正低氧血症,但仍有部分患者会出现顽固性低氧血症。另外,单肺通气不可避免会造成各种肺损伤,诱发白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)等炎症因子大量激活,因而会持续加重肺损伤。目前临床上并没有针对预防单肺通气低氧血症和肺损伤的规范性肺保护流程,而本团队前期研究发现,在单肺通气手术中分别实施单肺缺氧预处理或改良肺复张,均可达到肺保护作用,主要表现在预防低氧血症、减轻肺损伤、降低炎症因子的表达、改善患者围术期氧合等方面。目的观察单肺通气手术中联合采用单肺缺氧预处理和改良肺复张两种措施后能否达到迭加的肺保护作用。方法将120例择期左或右侧OLV胸科手术成年患者随机分A组、B组、A+B组、C组,每组30例。丙泊酚靶控诱导并维持麻醉,插入双腔支气管导管(double-lumen endobronchial tube,DLT)后行机械通气。A组为缺氧预处理组,开始铺巾时,钳夹DLT非通气侧Y型接头叁次,使DLT气管腔与大气相通,每次OLV1min,恢复双肺通气(two-lung ventilation,TLV)1min;B组为改良肺复张组,在机械通气VT 10ml/kg,RR12次/min五个循环后,再做手控涨肺;A+B组同时采用A组和B组的操作,方法同前;C组为对照组。记录术前、预处理前后、OLV20min后、涨肺前后、TLV20min后、拔管后30min、术后6h和术后1d各时间点的血流动力学、氧合指标和炎症因子如白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-ct)等数据。结果1、一般情况相比较:四组患者术前基本情况、肺功能检查、麻醉时间、OLV时间差异无统计学意义(P>0.05),C组术后住院天数大于其他叁组(P<0.01),其余叁组差异无统计学意义(P>0.05)。2、氧合指数的比较:①A组和A+B组患者在OLV期间的OI均高于C组和B组(P<0.01);②术后C组OI最低,而A+B组OI高于A组和B组的(P<0.05)。3、炎症因子的比较:①四组患者术后IL-6均先上升后回降,术后C组的IL-6均高于另外叁组(P<0.01),A+B组最低(P<0.01),A组和B组相比较差异无统计学意义(P>0.05);②术后一天C组TNF-α高于其他三组,A+B组的最低(P<10.05),其余两组差别无统计学意义(P>0.05)。4、循环和proBNP的比较:围术期B组和A+B组循环更稳定,C组和A组术后的proBNP高于B组和A+B组(P<0.01)结论1、单肺缺氧预处理能使患者在OLV期间维持更好的氧合;改良肺复张在涨肺期间能维持更平稳的血流动力学;两者均能减低术后炎症因子水平,改善氧合。2、联合单肺缺氧预处理和改良肺复张,能更大程度改善患者围术期氧合和减低IL-6及TNF-α水平,减少术后肺部并发症,对肺保护有迭加效应。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-05-24）
刘围围[5]（2019）在《缺氧预处理心肌细胞源外泌体circHIPK3调控氧化应激状态下心肌微血管内皮细胞凋亡与增殖的实验研究》一文中研究指出研究背景:心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)通过循环相互连接,在心肌细胞(cardiomyocytes,CMs)之间形成连续的内皮,对调节和维持心脏功能起着不可或缺的作用。心肌梗死后局部氧化应激环境下,心肌微血管内皮细胞凋亡、坏死,增殖和迁移受限,严重破坏微血管的完整性,使得冠脉再通后心肌细胞水平灌注不充分,促使原本存活的心肌细胞凋亡或坏死,在多种病理生理作用下出现心脏结构和功能的改变,最终导致患者出现心功能不全和心源性死亡。近年来,细胞旁分泌效应在改善心肌梗死局部微环境、修复梗死心肌中发挥着举足轻重的作用,其中外泌体(exosomes)是旁分泌途径发挥作用的主要物质,已经成为血管再生和心脏修复的关键调节剂。Exosomes富含非编码RNA(non-coding RNAs,ncRNAs)、蛋白质、细胞因子等生物活性物质,能够介导细胞与细胞之间的信息交流,其中外泌体源circRANs因具有更好的保守性及稳定性而备受关注。研究表明心肌细胞可通过释放exosomes(CMs-exosomes)至周围接触细胞(成纤维细胞,内皮细胞等),通过细胞间交互作用调控靶细胞的生物学活性,但具体机制不明。本课题前期研究发现,缺氧预处理(Hypoxic preconditioning,HPC)心肌细胞exosomes可通过传递高表达的circHIPK3减少小鼠心梗面积,增加梗死边界区新生血管密度。而目前,关于缺氧预处理心肌细胞源exosomal circHIPK3调控氧化应激状态下CMECs凋亡、增殖及迁移的机制研究尚未见报道。因此本研究拟在前期研究的基础上,进一步在体外建立急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)氧化应激微环境,探讨缺氧预处理心肌细胞源exosomal circHIPK3对氧化应激环境下CMECs凋亡、增殖及迁移的调控作用及其相关机制。第一部分缺氧预处理CMs-exosomes对氧化损伤CMECs的功能研究目的:观察常氧及缺氧预处理CMs-exosomes对氧化损伤CMECs的作用。方法:1、CMs培养:双酶消化法联合差速贴壁法及添加溴脱氧尿苷(BrdU)纯化法体外分离培养小鼠CMs,免疫荧光(immunofluorescence,IF)鉴定CMs心肌肌钙蛋白T(cTnT)分子的表达;2、CMs缺氧预处理时间确立:Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测HPC不同时间(0 h、6 h、12 h、18 h、24 h)对CMs细胞活性的影响。3、CMECs培养:酶消化法联合差速贴壁法诱导培养实验所需的CMECs,IF鉴定CMECs细胞标志物vWF、CD31。4、Exosomes提取鉴定:超速离心法(ultracentrifugation,UC)提取常氧心肌细胞exosomes(Normal exosomes,Nor-exos)与缺氧预处理心肌细胞exosomes(Hypoxic exosomes,HPC-exos)。Western Blot检测exosomes表面标志蛋白CD9、HSP70及Alix的表达,透射电镜(transmission electron microscope,TEM)观察exosomes形态;纳米颗粒追踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)分析exosomes群体特征。5、建立CMECs的体外氧化应激模型:以不同浓度的H_2O_2(50μM、100μM、200μM、300μM)处理CMECs 3h探索H_2O_2模拟氧化应激微环境的最佳浓度,以200μM的H_2O_2处理CMECs不同时间(1 h、2 h、3 h、4 h),设常氧状态CMECs为对照组,采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测不同浓度H_2O_2及处理不同时间对CMECs凋亡的影响,探讨体外建立氧化应激微环境的最佳浓度及时间。6、Exosomes内化验证:以红色荧光染料Dil标记exosomes并与CMECs共培养不同时间(4 h、8 h、12 h),IF观察CMECs摄取exosomes的情况。确定最佳的共培养时间作为后续exosomes处理CMECs的条件;FCM检测不同浓度exosomes(0μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL及400μg/mL)与CMECs共培养8h后对氧化应激微环境CMECs增殖的影响。7、Exosomes抗氧化应激效应:为验证Nor-exos及HPC-exos对氧化应激状态下CMECs凋亡、增殖与迁移的影响,实验分为5组:(1)Normal(Nor)组;(2)H_2O_2组;(3)exos-depleted组;(4)Nor-exos组;(5)HPC-exos组。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞膜内侧磷脂酰丝氨酸(PS)外翻情况;2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针检测细胞活性氧(reactive oxygen spieces,ROS)的释放;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达量;Tunel染色检测细胞DNA片段化。采用FCM检测细胞周期,EdU染色检测细胞DNA复制活性与增殖能力;Western Blot检测增殖相关蛋白PCNA、CyclinD1、P21的表达。采用Transwell细胞迁移实验检测CMECs的体外迁移能力。结果:1、原代CMs呈细小圆形,1天后镜下观察部分细胞已贴壁,2天后细胞呈叁角形、梭形、多边形和不规则形等,并且存在细胞的自发性搏动。IF鉴定cTnT呈阳性表达。2、CCK-8结果显示,缺氧预处理12 h CMs的细胞活性显着上调(P<0.05)。3、酶消化法联合差速贴壁法诱导培养的CMECs 2天已贴壁,3~4天后生长较快,胞质伸展,6天后细胞呈不规则、梭形生长,铺路石样排列。IF观察细胞表面分子vWF与CD31均呈阳性表达。4、UC法分别提取Nor-exos及HPC-exos,Western Blot结果显示exosomes表面标记蛋白CD9、Alix、HSP70均呈阳性表达;TEM观察见大小不一,呈圆形或双凹圆盘状有脂质膜包裹的囊泡状小体;NTA结果显示Nor-exos与HPC-exos的颗粒大小均为151 nm。5、FCM结果显示,200μM H_2O_2处理CMECs 3 h组的早期凋亡率显着上调(P<0.05),且坏死率无明显变化(P>0.05),因此选取200μM H_2O_2 3 h组作为诱导CMECs氧化应激微环境的最佳处理条件。6、Dil标记exosomes与CMECs共培养8 h后,荧光显微镜观察发现绝大部分exosomes被CMECs摄取。FCM结果显示与0μg/m L、100μg/m L、200μg/m L组相比,300μg/m L exosomes处理细胞8 h,可使CMECs增殖率达最高(P<0.05),与300μg/m L组相比,400μg/m L组细胞增殖率无显着差异(P>0.05)。最终选取300μg/m L exosomes与CMECs共培养8 h为后续实验处理条件。7、与Nor组相比,H_2O_2可显着诱导CMECs凋亡及抑制CMECs的增殖及迁移(P<0.05)。与H_2O_2组相比,Nor-exos组与HPC-exos组细胞凋亡减少,细胞增殖及迁移增加(P<0.05),且HPC-exos较Nor-exos具有更好抗凋亡、促增殖的保护作用(P<0.05)。小结:在氧化应激条件下,Nor-exos及HPC-exos均可抑制CMECs的凋亡、促进CMVEC的增殖及迁移,发挥CMECs的保护作用,但HPC-exos的效果更加显着。第二部分HPC-exosomal circ HIPK3靶向抑制miR-29a调控氧化应激状态下CMECs的凋亡、增殖及迁移目的:探讨HPC-exosomal circ HIPK3调控氧化应激微环境下CMECs凋亡、增殖及迁移效应。方法:1、HPC-exos中circ HIPK3的相对表达情况:采用q RT-PCR检测Nor-exos与HPC-exos中circ HIPK3的表达量;Nor-exos和HPC-exos处理CMECs后细胞内circ HIPK3的表达是否有变化,实验分为4组:(1)Nor组;(2)H_2O_2组;(3)Nor-exos组;(4)HPC-exos组。采用q RT-PCR检测各组中circ HIPK3的表达量。2、circ HIPK3感染复数的确立:采用慢病毒转染的方法,过表达或沉默CMECs或CMs中circ HIPK3,实验分组:CMECs:MOI=10、MOI=50、MOI=100;CMs:MOI=50、MOI=100、MOI=200,采用q RT-PCR检测转染效率。3、验证HPC-exos主要通过传递circ HIPK3发挥抗细胞凋亡、促细胞增殖与迁移效应,实验分为8个组:(1)H_2O_2组;(2)Lentiviral vector(LV)组;(3)LV-circ HIPK3组;(4)LV-si-circ HIPK3组;(5)HPC-exos组;(6)LV-exos组;(7)LV-si-HIPK3 m RNA-exos组;(8)LV-si-circ HIPK3-exos组。采用q RT-PCR检测不同处理组CMECs中circ HIPK3的表达情况。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针检测ROS的释放,Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达量;Tunel染色检测细胞DNA片段化。采用FCM检测细胞周期,Ed U染色检测细胞DNA复制活性与增殖能力;Western Blot检测增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1、P21的表达量。采用Transwell细胞迁移实验检测CMECs的体外迁移能力。4、circ HIPK3与miR-29a相关性验证:采用q RT-PCR检测(1)H_2O_2组、(2)LV组、(3)LV-circ HIPK3组、(4)LV-si-circ HIPK3组中circ HIPK3、miR-29a的表达;采用荧光素酶报告实验、Ago2免疫共沉淀实验验证circ HIPK3与miR-29a的结合;采用RNA FISH实验检测circ HIPK3与miR-29a在细胞中的定位。5、氧化应激状态下CMECs中miR-29a相对表达量:实验分为2组,正常CMECs组(control组)与H_2O_2处理的CMECs组(H_2O_2组),采用q RT-PCR检测氧化应激状态下CMECs中miR-29a的表达量。6、miR-29a对氧化应激微环境CMECs的作用验证:以ribo FECT?CP转染试剂转染miR-29a及其阴性对照物至氧化应激状态下CMECs,观察miR-29a对氧化应激状态下CMECs凋亡、增殖与迁移的影响。实验分组:(1)H_2O_2组;(2)miR-29a mimics组;(3)MNC(mimics negative control)组;(4)miR-29a Inhibitors组;(5)INC(inhibitor negative control)组。通过Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,DCFH-DA荧光探针检测ROS的释放,Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达量;Tunel染色检测细胞DNA片段化。采用FCM检测细胞周期,Ed U染色检测细胞DNA复制活性与增殖能力;Western Blot检测增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1、P21的表达量。采用Transwell细胞迁移实验检测CMECs的体外迁移能力。7、HPC-exos介导miR-29a调控CMECs凋亡、增殖与迁移的作用:实验分组:(1)H_2O_2组;(2)HPC-exos组;(3)HPC-exos+miR-29a mimics组;(4)HPC-exos+MNC组;(5)HPC-exos+miR-29a Inhibitors组;(6)HPC-exos+INC组。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;DCFH-DA荧光探针检测ROS的释放;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达量;Tunel染色检测细胞DNA片段化。采用FCM检测细胞周期,Ed U染色检测细胞DNA复制活性与增殖能力;Western Blot检测增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1、P21的表达量。采用Transwell小室细胞迁移实验检测细胞的体外迁移能力。结果:1、q RT-PCR结果显示缺氧预处理CMs-exosomes内cric HIPK3表达量明显高于常氧CMs-exosomes(P<0.05)。在氧化应激的基础上,Nor-exos与HPC-exos处理CMECs后细胞内的circ HIPK3的表达也明显上调(P<0.05),且HPC-exos的作用更加明显(P<0.05)。2、q RT-PCR结果显示,慢病毒转染CMECs时,MOI=50的转染效率最高,转染CMs时,MOI=100的转染效率最高。因此选择MOI=50作为转染CMECs的最佳MOI,MOI=100作为转染CMs的最佳MOI。3、q RT-PCR结果显示,与H_2O_2组相比,LV-circ HIPK3组、HPC-exos组circ HIPK3表达明显上调(P<0.05),LV-si-circ HIPK3组circ HIPK3表达显着下调(P<0.05)。与HPC-exos组相比,LV-si-HIPK3 m RNA-exos组circ HIPK3表达无明显差异(P>0.05),LV-si-circ HIPK3-exos组circ HIPK3表达显着下调(P<0.05)。FCM、Western Blot与Tunel结果显示,与H_2O_2组相比,LV-circ HIPK3组、HPC-exos组细胞PS外翻减少(P<0.05),细胞内ROS的释放减少(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量降低、Bcl-2表达量升高(P<0.05),细胞DNA片段化减少(P<0.05),LV-si-circ HIPK3组细胞PS外翻增加(P<0.05),细胞内ROS的释放增加(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量增多、Bcl-2表达量减少(P<0.05),细胞DNA片段化增加(P<0.05)。与HPC-exos组相比,LV-si-HIPK3 m RNA-exos组细胞PS外翻,细胞内ROS的释放,Bcl-2、Bax及Cleaved caspase3表达量,细胞DNA片段化均无明显差异(P>0.05),LV-si-circ HIPK3-exos组细胞PS外翻减少(P<0.05),细胞内ROS的释放减少(P<0.05),Bax及Cleaved caspase3表达量减少、Bcl-2表达量增加(P<0.05),细胞DNA片段化减少(P<0.05)。与H_2O_2组相比,LV-circ HIPK3组、HPC-exos组细胞G0/G1期比例降低、S+G2/M期比例升高(P<0.05),细胞增殖能力明显增强(P<0.05),PCNA与Cyclin D1的表达量均明显增多、P21的表达量明显减少(P<0.05),细胞迁移数目均明显增多(P<0.05),LV-si-circ HIPK3组G0/G1期比例升高、S+G2/M期比例降低(P<0.05),细胞增殖能力明显减弱(P<0.05),PCNA与Cyclin D1的表达量均明显减少、P21表达量明显增多(P<0.05),细胞迁移数目明显减少(P<0.05)。与HPC-exos组相比,LV-si-HIPK3 m RNA-exos组细胞G0/G1期比例与S+G2/M期比例,细胞增殖能力,P21、PCNA、Cyclin D1表达量,细胞迁移数目均无显着变化(P>0.05),LV-si-circ HIPK3-exos组细胞G0/G1期比例升高、S+G2/M期比例降低(P<0.05),细胞增殖能力显着减弱(P<0.05),PCNA与Cyclin D1的表达量显着减少、P21表达量显着增多(P<0.05),细胞迁移数目显着减少(P<0.05)。4、q RT-PCR结果显示,与H_2O_2组相比,LV-circ HIPK3组的circ HIPK3的相对表达量明显上调(P<0.05),LV-si-circ HIPK3的circ HIPK3相对表达量明显下调(P<0.05),但miR-29a的相对表达量均无明显变化(P>0.05)。荧光素酶报告实验结果显示,circ HIPK3与miR-29a可以结合。RNA FISH实验结果显示,circ HIPK3与miR-29a共定位于细胞胞质。Ago2共沉淀实验结果显示,circ HIPK3与miR-29a、Ago2可形成叁元复合物。5、q RT-PCR结果显示,与control组相比,H_2O_2组miR-29a的相对表达量明显增高(P<0.05)。6、与H_2O_2组相比,miR-29a mimics组细胞PS外翻增多(P<0.05),细胞内ROS的释放增多(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量增多、Bcl-2表达量减少(P<0.05),细胞DNA片段化增加(P<0.05)。miR-29a Inhibitors组细胞PS外翻减少(P<0.05),细胞内ROS的释放减少(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量减少、Bcl-2表达量增多(P<0.05),细胞DNA片段化减少(P<0.05)。与H_2O_2组相比,miR-29a mimics组细胞G0/G1期比例升高,S+G2/M期比例降低(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),PCNA与Cyclin D1的表达均明显降低、P21表达明显升高(P<0.05),细胞迁移数目明显减少(P<0.05),miR-29a Inhibitors组细胞G0/G1期比例降低,S+G2/M期比例降低升高(P<0.05),细胞增殖能力增强(P<0.05),PCNA与CyclinD1的表达均明显升高、P21表达明显降低(P<0.05),细胞迁移数目均明显增多(P<0.05)。7、与H_2O_2组相比,HPC-exos组细胞PS外翻减少(P<0.05),细胞内ROS的释放减少(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量减少、Bcl-2表达量增多(P<0.05),细胞DNA片段化减少(P<0.05)。与HPC-exos组相比,HPC-exos+mimics组细胞PS外翻增多(P<0.05),细胞内ROS的释放增多(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量增多、Bcl-2表达量减少(P<0.05),细胞DNA片段化增加(P<0.05)。HPC-exos+Inhibitors组细胞PS外翻减少(P<0.05),细胞内ROS的释放减少(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量减少、Bcl-2表达量增多(P<0.05),细胞DNA片段化减少(P<0.05)。与H_2O_2组相比,HPC-exos组细胞G0/G1期降低、S+G2/M期比例升高(P<0.05),细胞增殖能力增强(P<0.05),PCNA、Cyclin D1的表达均明显升高、P21表达明显降低(P<0.05),细胞迁移数目均明显增多(P<0.05)。与HPC-exos组相比,HPC-exos+mimics组细胞G0/G1期比例升高,S+G2/M期比例降低(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),PCNA、Cyclin D1的表达均明显降低、P21表达明显升高(P<0.05),细胞迁移数目显着减少(P<0.05),HPC-exos+Inhibitors组细胞G0/G1期比例降低,S+G2/M期比例升高(P<0.05),细胞增殖能力增强(P<0.05),PCNA、Cyclin D1的表达均明显升高、P21表达明显降低(P<0.05),细胞迁移数目均明显增多(P<0.05)。小结:HPC-exosomal circ HIPK3通过调控miR-29a的作用从而抑制氧化损伤CMECs的凋亡,并促进其增殖、迁移。第叁部分HPC-exosomal circ HIPK3靶向抑制miR-29a调控IGF-1、VEGFA介导氧化应激状态下CMECs的凋亡、增殖及迁移目的:探讨HPC-exosomal circ HIPK3靶向抑制CMECs中miR-29a,促进下游IGF-1与VEGFA表达,调控氧化应激微环境下CMECs凋亡、增殖与迁移效应。方法:1、miR-29a与IGF-1相关性验证:采用荧光素酶报告实验验证miR-29a与IGF-1的结合;以ribo FECT?CP转染试剂转染miR-29a及其阴性对照物至氧化应激状态下CMECs,实验分组:(1)H_2O_2组;(2)miR-29a mimics组;(3)MNC组;(4)miR-29a Inhibitors组;(5)INC组。采用q RT-PCR检测各组miR-29a、IGF-1的相对表达情况;Western Blot检测IGF-1的蛋白表达量。2、miR-29a与VEGFA相关性验证:采用荧光素酶报告实验验证miR-29a与VEGFA的结合;以ribo FECT?CP转染试剂转染miR-29a及其阴性对照物至氧化应激状态下CMECs,实验分组:(1)H_2O_2组;(2)miR-29a mimics组;(3)MNC组;(4)miR-29a Inhibitors组;(5)INC组。采用q RT-PCR检测各组VEGFA的相对表达情况;Western Blot检测各组VEGFA的蛋白表达量。3、HPC-exos通过传递circ HIPK3调控miR-29a对氧化应激状态下CMECs凋亡、增殖与迁移的影响:实验分组:(1)HPC-exos组;(2)LV-si-circ HIPK3-exos(si-circ-exos)组;(3)si-circ-exos+mimics组;(4)si-circ-exos+MNC组;(5)si-circ-exos+Inhibitors组;(6)si-circ-exos+INC。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;DCFH-DA荧光探针检测ROS的释放;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3的表达量;Tunel染色检测细胞DNA片段化。采用FCM检测细胞周期,Ed U染色检测细胞DNA复制活性与增殖能力;Western Blot检测增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1、P21、IGF-1及VEGFA的表达量。采用Transwell小室细胞迁移实验检测细胞的体外迁移能力。结果:1、荧光素酶报告实验结果显示,miR-29a与IGF-1具有结合位点。q RT-PCR结果显示,与H_2O_2组相比,miR-29a mimics组miR-29a的表达量明显增高,IGF-1的表达量明显降低(P<0.05),miR-29a Inhibitors组miR-29a的表达量明显降低,IGF-1的表达量明显升高(P<0.05)。Western Blot结果显示,与H_2O_2组相比,miR-29a mimics组IGF-1的表达量明显下调(P<0.05),miR-29a Inhibitors组IGF-1的表达量明显上调(P<0.05)。2、荧光素酶报告实验结果显示,miR-29a与VEGFA具有结合位点。q RT-PCR结果显示,与H_2O_2组相比,miR-29a mimics组VEGFA的表达量明显降低(P<0.05),miR-29a Inhibitors组VEGFA的表达量明显升高(P<0.05)。Western Blot结果显示,与H_2O_2组相比,miR-29a mimics组VEGFA的表达明显下调(P<0.05),miR-29a Inhibitors组VEGFA的表达量明显上调(P<0.05)。3、与HPC-exos组相比,si-circ-exos组细胞PS外翻增多(P<0.05),细胞内ROS的释放增加(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量增多、Bcl-2、IGF-1表达量减少(P<0.05),细胞DNA片段化增多(P<0.05)。与si-circ-exos组相比,si-circ-exos+mimics组细胞PS外翻增多(P<0.05),细胞内ROS的释放增多(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量增多、Bcl-2与IGF-1表达量减少(P<0.05),细胞DNA片段化增多(P<0.05)。si-circ-exos+Inhibitors组细胞PS外翻减少(P<0.05),细胞内ROS的释放减少(P<0.05),Bax与Cleaved caspase3表达量减少、Bcl-2与IGF-1表达量增多(P<0.05),细胞DNA片段化减少(P<0.05)。与HPC-exos组相比,si-circ-exos组细胞G0/G1期升高、S+G2/M期比例降低(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),PCNA、Cyclin D1与VEGFA的表达量均明显降低、P21表达量明显升高(P<0.05),细胞迁移数目明显减少(P<0.05)。与si-circ-exos组相比,si-circ-exos+mimics组细胞G0/G1期比例升高、S+G2/M期比例降低(P<0.05),细胞增殖能力减弱(P<0.05),PCNA、Cyclin D1与VEGFA的表达量均明显降低、P21表达量明显升高(P<0.05),细胞迁移数目显着减少(P<0.05),si-circ-exos+Inhibitors组细胞G0/G1期比例降低、S+G2/M期比例升高(P<0.05),细胞增殖能力增强(P<0.05),PCNA、Cyclin D1与VEGFA的表达量均明显升高,P21表达量明显降低(P<0.05),细胞迁移数目均明显增多(P<0.05)。小结:在氧化应激微环境中,HPC-exosomal circ HIPK3靶向抑制miR-29a调节IGF-1、VEGFA的表达,从而抑制CMECs的凋亡、促进CMECs的增殖及迁移。结论:1、缺氧预处理心肌细胞可释放保护性的外泌体抑制氧化损伤心肌微血管内皮细胞的凋亡,并促进其增殖与迁移。2、缺氧预处理心肌细胞源外泌体发挥保护作用的潜在机制可能是通过传递circ HIPK3,竞争性结合miR-29a,调节IGF-1与VEGFA的表达,从而发挥作用。(本文来源于《遵义医科大学》期刊2019-05-01）
余美林,顾云霞,张静,胡衍辉,刘琴[6]（2019）在《PKC信号通路在七氟醚预处理减轻心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用》一文中研究指出目的探讨PKC信号通路在七氟醚预处理减轻心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法取对数生长期H9c2心肌细胞,随机分成5组。空白对照组(Sham组)不进行任何处理;缺氧/复氧组(H/R组)细胞缺氧2 h后复氧1 h;七氟醚预处理延迟性保护组(SWOP组)2.5%七氟醚预处理20 min后同H/R组;PKC信号通路抑制剂组(CHE组)培养基内加入终浓度为10μmol/L白屈菜赤碱培养1 h后,再同H/R组;CHE+SWOP组2.5%七氟醚预处理前15 min在培养基内加入终浓度为10μmol/L白屈菜赤碱,再同H/R组。取缺氧复氧末的心肌细胞,检测心肌细胞存活率,检测还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,荧光探针二氢乙啶测定心肌细胞内活性氧自由基(ROS)含量,Western blot法检测抗氧化应激相关蛋白Nrf2及凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果与Sham组比较,H/R组H9c2心肌细胞的存活率均降低,GSH值减少,MDA、ROS、Nrf2及Caspase-3值增加(P<0.05)。与H/R组相比,SWOP组细胞存活率增加,GSH、Nrf2值增加,MDA、ROS、Caspase-3值降低(P<0.05);CHE组细胞存活率降低,GSH、Nrf2值降低,MDA、ROS、Caspase-3值增加(P<0.05);与SWPO组相比,CHE+SWOP组心肌细胞存活率降低,Nrf2、GSH值降低,MDA、ROS、Caspase-3值增加(P<0.05)。结论七氟醚预处理可减轻心肌细胞缺氧复氧损伤,PKC信号通路可能参与了心肌细胞缺氧复氧时抗氧化应激的保护作用。(本文来源于《广东医学》期刊2019年07期）
熊超,刘力,冯建国,魏继承[7]（2019）在《七氟醚预处理对H9C2心肌细胞缺氧/复氧后转录沉默信息调节器3的表达及乙酰化水平的影响》一文中研究指出目的探究七氟醚预处理对大鼠H9C2心肌细胞缺氧/复氧后,对转录沉默信息调节器3(SIRT3)的表达及细胞蛋白乙酰化的影响。方法将大鼠H9C2心肌细胞随机分为对照组、缺氧/复氧组和七氟醚预处理组。低氧培养箱构建缺氧/复氧模型:对照组心肌细胞无任何处理;缺氧/复氧组心肌细胞缺氧2 h/复氧2 h;七氟醚预处理组心肌细胞在缺氧/复氧前予以2.5%七氟醚预处理1 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测各组细胞存活率;采用JC-1荧光探针检测线粒体膜电位;采用Western blotting法检测细胞整体蛋白及线粒体蛋白乙酰化水平、SIRT3表达及线粒体自噬水平的变化。结果缺氧/复氧组较对照组心肌细胞SIRT3(0.78±0.04 vs 1.04±0.06)表达减少,细胞整体蛋白(1.72±0.06 vs 0.98±0.03)及线粒体蛋白(0.96±0.03 vs 0.45±0.03)乙酰化水平升高(P<0.05);同时心肌细胞存活率[(48.2±0.4)%vs 100%]、线粒体膜电位(1.72±0.14 vs 2.83±0.11)下降,线粒体自噬水平升高(P<0.05);与缺氧/复氧组相比,七氟醚预处理组心肌细胞SIRT3表达增加(0.93±0.03 vs 0.78±0.04),细胞整体蛋白(1.34±0.05 vs 1.72±0.06)及线粒体蛋白(0.65±0.04 vs 0.96±0.03)乙酰化水平降低(P<0.05);同时心肌细胞存活率[(65.80±1.53)%vs(48.20±0.40)%]及线粒体膜电位(2.33±0.12 vs 1.72±0.14)升高,线粒体自噬激活水平降低(P<0.05)。结论七氟醚预处理可以增加SIRT3表达,降低心肌细胞缺氧/复氧损伤后蛋白的乙酰化水平,可能是七氟醚预处理对心肌细胞保护作用的潜在分子机制。(本文来源于《山东大学学报(医学版)》期刊2019年03期）
刘中[8]（2019）在《吗啡预处理诱导的血清外泌体对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用与机制》一文中研究指出背景与目的心肌在缺血基础上血流再灌注后损伤进一步加重,称为心肌缺血再灌注(ischemic reperfusion,I/R)损伤,常发生于心脏手术中,不但降低再灌注治疗的临床疗效,而且可能进一步加重心肌损伤和增加心力衰竭发生率,严重影响患者的心脏功能。而心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤是在体外研究心肌I/R损伤的理想模型,可以直接观察损伤的心肌细胞形态、代谢、功能等变化,普遍应用于I/R损伤的分子机制研究。外泌体(exosome)是新近发现的一种囊泡样小体,具有双层膜结构,其中包含丰富的蛋白质、脂类、微小RNA(micro RNA,mi RNA)等,可传输多种信号分子,是实现细胞间物质交换及信息传递的重要媒介。mi RNA是新发现的一类内源性小分子非编码RNA,可通过其下游的靶基因和信号通路,调控心肌细胞的凋亡过程,在心肌I/R损伤中发挥重要作用。本课题组前期研究结果表明mi R-133b-5p参与了吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)的心肌保护作用。鉴于前期的研究基础,本课题拟进一步探讨MPC诱导释放的血清外泌体对大鼠心肌细胞H/R损伤的作用和潜在的机制以及外泌体是否参与了MPC的心肌保护作用,为研究阿片类药物的心肌保护机制提供新的思路和理论依据。方法1.外泌体的提取与鉴定大鼠进行MPC或对照处理(CON)后,收集大鼠血清,采用Exo Quick?试剂盒提取血清中的外泌体,分别标记为MPC-Exo、CON-Exo。利用透射电镜和Western Blot进行外泌体鉴定,BCA法测定外泌体浓度。2.外泌体的标记与摄取将外泌体用Di I染料标记后加入细胞培养基中,与H9c2心肌细胞共培养12h,随后PBS洗涤和4%多聚甲醛固定,最后用荧光显微镜观察心肌细胞对外泌体的摄取情况。3.外泌体在MPC减轻心肌细胞H/R损伤中的作用H9c2心肌细胞随机分为对照组(Control)、缺氧复氧组(H/R)、MPC组(吗啡预处理组)、MPC+GW4869组(抑制剂组)、H/R+DMSO组(溶剂对照组)、H/R+GW4869组(抑制剂对照组)。Control组细胞置于DMEM/F12细胞培养液中常规培养;H/R组细胞给予5 h缺氧和1 h复氧处理;MPC组细胞于H/R损伤前用含1μmol/L吗啡的培养液孵育10 min,然后用不含吗啡的培养液正常培养30min;MPC+GW4869组细胞于H/R损伤前用5μmol/L外泌体释放抑制剂GW4869处理12 h,随后进行MPC;H/R+DMSO组细胞于H/R损伤前用5μmol/L DMSO处理12 h;H/R+GW4869组于H/R损伤前用5μmol/L GW4869处理12 h。各组处理结束后,采用CCK-8法检测细胞活力;微量酶标法测定培养液中乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase,LDH)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡。4.MPC-Exo对H9c2心肌细胞H/R损伤的作用H9c2心肌细胞随机分为对照组(Control)、缺氧复氧组(H/R)、H/R+CON-Exo组、H/R+MPC-Exo组。Control组细胞置于DMEM/F12细胞培养液中常规培养;H/R组细胞给予5 h缺氧和1 h复氧处理;H/R+CON-Exo组和H/R+MPC-Exo组心肌细胞在H/R损伤前分别与CON-Exo或MPC-Exo共孵育12 h。各组处理结束后,采用CCK-8法检测心肌细胞活力;微量酶标法测定培养液中LDH的活性;流式细胞术检测细胞凋亡;q RT-PCR检测心肌细胞内以及外泌体内mi R-133b-5p的表达。结果1.外泌体的提取与鉴定大鼠血清的外泌体提取物在电镜下观察,呈圆形囊泡,平均直径约30-150 nm;Western blot结果显示其表达特异性标志蛋白CD63、热休克蛋白-60(heat shock proterin-60,HSP60)。2.外泌体的标记与摄取荧光显微镜下可见大量红色颗粒样物质在胞质中聚集,提示外泌体能被H9c2心肌细胞摄取。3.外泌体在MPC减轻心肌细胞H/R损伤中的作用与H/R组比较,MPC能显着减轻心肌细胞H/R损伤,增强细胞活力、减少LDH释放、抑制心肌细胞凋亡(P<0.05);与MPC组比较,MPC+GW4869组心肌细胞活力降低,LDH释放增加,细胞凋亡增多(P<0.05),MPC的保护作用被GW4869阻断。4.MPC-Exo对H9c2心肌细胞H/R损伤的作用MPC-Exo与H9c2心肌细胞共孵育,可以显着减轻心肌细胞H/R损伤,增强心肌细胞活力、减少LDH释放、并抑制心肌细胞凋亡,且显着上调心肌细胞内mi R-133b-5p的水平(P<0.05);相反,CON-Exo与心肌细胞共孵育后,对H/R损伤及mi R-133b-5p的表达无明显影响(P>0.05);与CON-Exo相比,MPC-Exo内mi R-133b-5p的表达水平明显升高(P<0.05)。结论MPC减轻心肌细胞H/R损伤依赖于外泌体释放,外泌体参与介导了MPC的心肌保护作用;MPC诱导释放的大鼠血清外泌体可以减轻心肌细胞H/R损伤,发挥心肌保护作用,其机制可能是介导心肌保护性的mi R-133b-5p转运。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-02-01）
刘丹,潘连红,金良友,雷登徐,易均[9]（2019）在《柚皮苷预处理通过抑制内质网应激凋亡途径减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤》一文中研究指出目的研究柚皮苷(naringin,Nar)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中内质网应激凋亡途径的影响及其分子作用机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,并随机分为5组:正常对照组(C)、缺氧/复氧组(H/R)、Nar低剂量组(L)、中剂量组(M)和高剂量组(H)。C组心肌细胞正常培养至实验结束,H/R组行缺氧4 h后复氧24 h,H/R+Nar低、中、高剂量组分别于缺氧前6 h给予10、20、40 mg·L~(-1)的Nar培养,再行缺氧4 h后复氧24 h。实验后,MTT法测定细胞存活率;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化转录因子4(ATF4)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)及其磷酸化水平(p-eIF2α)、双链RNA样内质网激酶(PERK)及其磷酸化水平(p-PERK)。结果与C组相比,H/R组明显降低H9c2心肌细胞存活率,诱导细胞凋亡,增加CHOP、ATF4、p-eIF2α/eIF2α和p-PERK/PERK表达(P<0.05);与H/R组比较,Nar 3个剂量组均能提高H9c2心肌细胞存活率,降低细胞凋亡,CHOP、ATF4、p-eIF2α/eIF2α和p-PERK/PERK表达下调,以Nar中、高剂量组效果最明显(P<0.05)。结论 Nar预处理可以减轻心肌细胞H/R损伤所致的心肌细胞凋亡,提示PERK-eIF2α-ATF4-CHOP途径参与Nar减轻内质网应激相关凋亡的作用。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2019年02期）
赵汝舟,余志斌,张琳[10]（2019）在《缺氧预处理激活AMPK对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用》一文中研究指出目的探讨缺氧预处理(HPC)激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)对缺氧/复氧(H/R)后心肌细胞的保护作用及其可能机制。方法分离培养新生SD大鼠心肌细胞,建立心肌细胞H/R模型。将心肌细胞随机分为对照组、H/R组、HPC组、H/R+A-769662(AMPK激动剂)组及HPC+CompoundC(AMPK抑制剂)组。采用CCK-8比色法检测各组细胞存活率;采用二氢乙啶(DHE)染色法及ATP检测试剂盒分别检测细胞内的活性氧(ROS)及ATP含量;采用Westernblotting检测AMPK磷酸化水平及caspase-3激活水平;采用Fluo-3AM染色法观察细胞内游离Ca2+浓度变化;采用TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率的变化。结果 CCK-8测定结果显示,与H/R组比较,HPC组与H/R+A-769662组心肌细胞存活率均明显升高(P<0.05);与HPC组比较,HPC+Compound C组心肌细胞存活率明显降低(P<0.01)。DHE染色结果显示,与H/R组比较,HPC组及H/R+A-769662组心肌细胞ROS含量均明显减少(P<0.01);与HPC组比较,HPC+Compound C组心肌细胞ROS含量明显增加(P<0.01)。与H/R组比较,HPC组及H/R+A-769662组心肌细胞ATP含量明显增加(P<0.01);与HPC组比较,HPC+Compound C组心肌细胞ATP含量明显减少(P<0.01)。Western blotting检测结果显示,与对照组比较,HPC组及H/R+A-769662组心肌细胞AMPK磷酸化水平明显提高(P<0.01),而H/R组及HPC+Compound C组心肌细胞AMPK磷酸化水平变化不明显(P>0.05);与H/R组比较,HPC组及H/R+A-769662组细胞AMPK磷酸化水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,H/R组及HPC+CompoundC组心肌细胞caspase-3激活水平明显升高(P<0.01);与H/R组比较,HPC组及H/R+A-769662组心肌细胞caspase-3激活水平明显降低(P<0.01,P<0.05)。Fluo-3AM染色结果显示,与对照组比较,H/R组与HPC+Compound C组心肌细胞内游离Ca2+明显增加(P<0.01);与H/R组比较,HPC组及H/R+A-769662组心肌细胞内游离Ca2+明显减少(P<0.01);与HPC组比较,HPC+Compound C组细胞内游离Ca2+明显增加(P<0.01)。TUNEL染色结果显示,与H/R组比较,HPC组及H/R+A-769662组心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.01,P<0.05);与HPC组比较,HPC+CompoundC组肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论 H/R可导致心肌细胞ROS生成增加,ATP产生减少,细胞内游离Ca2+增加,进而激活caspase-3,导致细胞凋亡的发生,而HPC通过激活AMPK,可以减少细胞ROS的产生,保证H/R后细胞的能量供应,防止心肌细胞凋亡,进而减轻心肌细胞H/R损伤。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2019年02期）
缺氧预处理论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究Tempol预处理在大鼠窒息后心跳骤停法制备全脑缺血缺氧脑损伤模型中的保护作用及机制。方法取30只雄性SD大鼠,随机分为对照组(6只)、常规复苏组(12只)与Tempol预处理组(12只)。常规复苏组与Tempol预处理组均构建缺血缺氧脑损伤模型,Tempol预处理组在气管夹闭前5 min给予100 mg/kg Tempol,常规复苏组和对照组给予等量生理盐水。取叁组大鼠脑内海马组织,行苏木精-伊红染色,观察细胞组织形态学改变;在自主循环恢复后6 h、12 h、24 h采用免疫组化法测定大鼠血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况。结果对照组皮层和海马区脑组织细胞轮廓清晰,结构未见异常,海马CA1区中VEGF与HIF-1α表达较弱。相比常规复苏组,Tempol预处理组海马组织损伤范围较小,程度较轻,水肿明显改善。Tempol预处理组在自主循环恢复后6 h、12 h、24 h海马组织中VEGF较常规复苏组显着升高,自主循环恢复后12 h、24 h时HIF-1α的表达较常规复苏组显著升高(P <0. 05)。结论 Tempol预处理具有减轻缺氧缺血脑损伤大鼠海马组织损伤程度,缓解水肿和炎症的作用,其作用机制可能与激活VEGF、HIF-1α表达存在密切关系。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
缺氧预处理论文参考文献
[1].罗芳,韩超,容倩胄.麝香保心丸预处理对缺氧复氧心肌细胞的保护作用研究[J].中国现代药物应用.2019
[2].王剑冰,杨威,赵明博,汪义淇,迟海洋.Tempol预处理在大鼠窒息后心跳骤停全脑缺氧缺血脑损伤模型中的保护作用及机制研究[J].临床和实验医学杂志.2019
[3].张伟,宋强,高成杰.不同浓度和时间七氟烷预处理对缺氧小鼠脑损伤的影响及可能机制研究[J].临床和实验医学杂志.2019
[4].江宁彬.联合单肺缺氧预处理和改良肺复张对单肺通气手术患者的肺保护作用[D].南方医科大学.2019
[5].刘围围.缺氧预处理心肌细胞源外泌体circHIPK3调控氧化应激状态下心肌微血管内皮细胞凋亡与增殖的实验研究[D].遵义医科大学.2019
[6].余美林,顾云霞,张静,胡衍辉,刘琴.PKC信号通路在七氟醚预处理减轻心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用[J].广东医学.2019
[7].熊超,刘力,冯建国,魏继承.七氟醚预处理对H9C2心肌细胞缺氧/复氧后转录沉默信息调节器3的表达及乙酰化水平的影响[J].山东大学学报(医学版).2019
[8].刘中.吗啡预处理诱导的血清外泌体对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用与机制[D].安徽医科大学.2019
[9].刘丹,潘连红,金良友,雷登徐,易均.柚皮苷预处理通过抑制内质网应激凋亡途径减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤[J].中国药理学通报.2019
[10].赵汝舟,余志斌,张琳.缺氧预处理激活AMPK对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用[J].解放军医学杂志.2019
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