组蛋白在脓毒症相关细胞因子分泌及细胞毒效应中的作用研究

论文摘要

目的探讨组蛋白在脓毒症相关细胞因子释放中的作用,研究组蛋白细胞毒效应及可能作用途径。方法用不同浓度组蛋白H4（Histone H4,hH4）刺激人单核细胞（THP-1）并与加入IgG及TLR-4抗体干预组对比,测定不同时间点细胞上清液中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10的浓度;在含组蛋白的培养基中加入抗Toll样受体4 （tolllike receptor,TLR-4）抗体后孵育THP-1及人血管内皮细胞（human microvascular endothelial cell,HMEC）,通过细胞上清液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）水平及流式细胞检测评估细胞损伤凋亡程度。结果①低浓度组蛋白处理组IL-1β水平与对照组采用student’s t检验方法比较,P>0.05,无统计学差异;IL-10及TNF-α水平不同程度升高,中、高浓度蛋白处理组前述各细胞因子浓度均升高,抗TLR-4抗体干预组炎症因子水平较对照组及IgG干预组下降,P<0.01,差异显著。②经含高浓度组蛋白的混合培养基孵育24h后,THP-1及HMEC组清液中LDH含量采用Mann-Whitney u检验方法比较,均较标准培养基组升高,P<0.05,有统计学意义。流式细胞计数显示凋亡细胞比例上升。加入IgG组上清液LDH含量变化无统计学意义;加入TLR-4抗体组上清液LDH水平与凋亡细胞的比例均显著降低。③对于THP-1细胞,与仅含组蛋白的对照组比较,加入TLR-4抗体的实验组凋亡细胞比例与细胞因子水平均显著下降,且凋亡细胞比例的变化率（-63.77%）较细胞因子变化率（36.14%至45.18%）高。结论①组蛋白H4在离体环境下可刺激THP-1细胞分泌多种细胞因子;②组蛋白H4对THP-1和HMEC均表现出细胞毒性效应;③上述两种效应均可被TLR-4抗体拮抗,TLR-4可能为胞外组蛋白参与脓毒症发病的途径之一;TLR-4抗体可能主要通过拮抗组蛋白的细胞毒效应发挥抗炎作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 组蛋白介导THP-1细胞因子产生作用研究
•     1.2.2 组蛋白致THP-1及HMEC损伤作用研究
•   1.3 数据处理与分析
• 2 结果
•   2.1 不同浓度组蛋白环境中THP-1上清液各细胞因子水平分析
•   2.2 TLR-4及IgG抗体干预高浓度组后各细胞因子水平分析
•   2.3 组蛋白体外细胞毒作用分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵宏霞,梁奕洋,刘瑜,余洁明,刘海英

关键词: 组蛋白,脓毒症,细胞因子,细胞毒效应

来源: 中国实验诊断学 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 临床医学,急救医学

单位: 南方医科大学附属深圳市妇幼保健院PICU

基金: 深圳市科技计划基础研究项目(JCYJ20160427191605611)

分类号: R459.7

页码: 2146-2151

总页数: 6

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