荠菜TPD1基因启动子与GUS基因表达载体的构建及拟南芥遗传转化

论文摘要

TAPETUM DETERMINANT1（TPD1）基因编码1个含176个氨基酸的配体蛋白,依赖于EMS1基因编码的富亮氨酸（LRR-RLK）蛋白受体激酶参与花粉形成的调控并可在心皮进行异位表达,参与心皮形态建成。为探讨TPD1基因在荠菜心皮形态建成中的表达模式,采用同源克隆法从荠菜中克隆CbTPD1基因启动子构建GUS融合表达载体CbTPD1pro::GUS,通过根癌农杆菌介导的浸花序法转化Columbia生态型拟南芥。对T1代幼苗、花序、心皮等组织部位进行GUS染色观察。结果表明,荠菜CbTPD1基因在幼苗、花丝、柱头、蜜腺、早期果荚等部位均有表达,但在花药中未见表达,与AtTPD1在花药中的表达模式存在差异。该结果为研究AtTPD1、CbTPD1基因在拟南芥、荠菜心皮形态建成中的作用提供了有价值的依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 植物培养条件
•   1.3 pCA1301-CbTPD1pro::GUSWTBZ表达载体的构建及遗传转化
•     1.3.1 CbTPD1基因启动子片段的克隆
•     1.3.2 pCA1301-CbTPD1pro::GUS载体构建及工程农杆菌的制备
•   1.4 拟南芥的遗传转化及转基因植株的鉴定
•   1.5 转基因植株的GUS组织化学染色及显微观察
• 2 结果与分析
•   2.1 CbTPD1启动子的克隆
•   2.2 pCA1301-CbTPD1pro::GUS载体的构建
•   2.3 CbTPD1基因启动子测序与启动子元件分析
•   2.4 拟南芥遗传转化及筛选
•   2.5 转基因植株的鉴定
•   2.6 转基因植株的GUS组织化学染色及显微观察
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 何金花,杨正修,姜路华,方磊,赵燕

关键词: 拟南芥,荠菜,启动子,遗传转化,组织化学染色

来源: 江苏农业科学 2019年24期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,园艺

单位: 湖南农业大学生物科学技术学院

基金: 湖南农业大学大学生科创课题(编号:XCX16016)

分类号: Q943.2;S647

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.24.006

页码: 25-29

总页数: 5

文件大小: 2955K

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