猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型双重荧光PCR检测方法的建立

论文摘要

为建立快速简便检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV2）的方法,本研究根据GenBank中已登录的PRRSVORF7基因序列和PCV2 ORF1基因序列,设计了2对特异性引物和2条TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测PRRSV和PCV2的双重荧光PCR方法。结果显示,该方法特异性好,不与其他常见猪病病原体发生交叉反应,检测PRRSV和PCV2的灵敏度分别可达1.05 TCID50/100L和6.30 TCID50/100μL,表明,本试验建立的双重TaqMan荧光定量PCR检测方法可对PRRSV和PCV2进行快速诊断,适合现场检测,为这两种疫病的诊断和防控奠定了基础。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 毒株、疫苗和检测样品
•   1.2 主要试剂和仪器
•   1.3 引物和探针
•   1.4 病毒核酸的提取
•   1.5 荧光PCR检测方法的建立和优化
•   1.6 荧光PCR的灵敏度检测
•   1.7 荧光PCR的特异性、重复性试验
•   1.8 临床样品的检测
• 2 结果
•   2.1 荧光RT-PCR反应条件的优化
•   2.2 荧光PCR的灵敏度检测
•   2.3 特异性检验
•   2.4 荧光PCR重复性试验
•   2.5 临床样品的检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 修晓娜,李天芝,于新友,唐娜

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪圆环病毒型,荧光,探针

来源: 中国兽医科学 2019年08期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业大学烟台研究院,山东绿都生物科技有限公司

基金: 中国农业大学烟台研究院校内科研基金项目(YT201401),山东省自然科学青年基金项目(ZR2014CQ010)

分类号: S852.651

DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0123

页码: 954-960

总页数: 7

文件大小: 1333K

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