导读:本文包含了玻璃化冻存论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:玻璃,线粒体,组织,玻璃化,小体,细胞,皮肤。
玻璃化冻存论文文献综述
何志,李学拥,雷战军,赵卓伟,孟祥海[1]（2019）在《玻璃化冻存延期回植技术在大面积皮肤撕脱伤中的应用研究》一文中研究指出目的:探讨玻璃化冻存延期回植技术用于大面积撕脱皮肤伤的临床效果。方法:选择2015年6月至2018年6月收治的大面积皮肤撕脱伤的患者16例,根据处理方式分为撕脱皮肤玻璃化冻存二期回植组和撕脱皮肤一期回植组,每组8例患者。皮肤冻存后回植前,采用MTT法检测皮肤活力,比较两组皮片回植后的成活率、感染率、平均住院时间。结果:玻璃化冻存组皮肤冻存后平均活力为92.56%±7.20%,皮片成活率为81.74%±5.78%,感染率12.5%,平均住院时间33.13±3.91 d;一期皮肤回植组皮片成活率21.91%±5.28%,感染率100%,平均住院时间47.50±1.93 d。玻璃化皮肤保存组皮片成活率、感染率、平均住院时间均优于一期皮肤回植组(P<0.05)。结论:皮肤玻璃化冻存延期回植技术用于无法一期回植皮肤撕脱伤的临床效果较好。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年20期）
童越,傅龙龙,安琪,贾艳飞,张开舒[2]（2019）在《未成熟大鼠睾丸组织玻璃化冻存效果的比较性研究》一文中研究指出目的采用叁种浓度冷冻保护剂方案对两周龄未成熟大鼠睾丸组织进行玻璃化冻存,并对冻存效果做出评价。方法根据DMEM/F12培养基中所含二甲基亚砜(DMSO)和乙二醇(EG)的浓度差异,将冻存液分为A、B、C叁组,其中DMSO和EG的浓度依次为7.5%、15%、25%。将大鼠睾丸分割为8mm3～9mm3大小的组织块,分别纳入对照组、A组、B组和C组中。对照组的睾丸组织不作冷冻处理,直接进行后续实验;A、B、C叁组使用不同浓度的冷冻保护剂进行玻璃化冷冻。冻存2周后,取出样本进行复苏。比较各组睾丸组织的形态学改变,采用免疫荧光染色观察精原细胞标志物UCHL1、支持细胞标志物SOX9、睾丸间质Leydig细胞标志物StAR和细胞增殖核抗原PCNA表达的改变,观察细胞的凋亡情况。结果玻璃化冻存后,未成熟大鼠睾丸组织形态发生一定程度改变,生精细胞及支持细胞标志物表达下降,凋亡增加,与对照组比较均有显着性差异(P<0.05)。叁个冻存组中,B组形态学改变最小,细胞标志物表达水平与对照组相差最少,凋亡最少;A组的结构损伤明显,生精上皮与基底膜分离;C组的细胞标志物表达显着下降,凋亡增加最显着。结论冷冻保护剂浓度变化对未成熟睾丸组织玻璃化冻存效果有显着影响,15%DMSO和15%EG组合是玻璃化冻存未成熟大鼠睾丸组织较适宜的冷冻保护剂浓度方案,可为进一步的临床应用提供参考。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2019年09期）
李强,庞玉娟,武艺,张焱如,曹俊伟[3]（2019）在《玻璃化冻存对蒙古驴卵母细胞甲基化及GFM1、MRPL15基因表达水平的影响》一文中研究指出旨在探讨玻璃化冷冻对驴卵母细胞发育的影响。采集新鲜驴卵巢组织,将收集的卵母细胞分别按以下3种方式进行处理:直接冷冻(T1组)、冷冻复苏+成熟处理20 h(T2组)、冷冻复苏+成熟处理40 h(T3组);同时,取新鲜的GV期卵母细胞,分别设置相应的对照处理方式:新鲜细胞不进行成熟处理(C1组)、成熟处理20 h(C2组),成熟处理40 h(C3组)。各处理组细胞经转录组测序后,采用Trimmomatic(v0.36)软件对原始数据进行过滤,并对后续数据进行分析。过滤后将原始数据与参考基因库比对,进行注释分析和甲基化位点识别,比较各处理组之间的甲基化水平。结果显示,T1、T2组甲基化水平分别大于C1、C2组,T3组甲基化水平小于C3组;各冷冻处理组卵母细胞的CpGs甲基化水平为T1组>T2组>T3组。共选择出总体差异基因1 269个,玻璃化冷冻处理细胞与未冷冻处理细胞之间具有差异的基因确定为677个。GFM1与MRPL15基因甲基化差异最为显着,基因通路富集到线粒体延伸途径中,这是导致玻璃化冷冻后驴卵母细胞成熟率较低的因素。研究结果为确定卵母细胞冷冻最佳条件奠定了试验基础。(本文来源于《畜牧与饲料科学》期刊2019年05期）
陈杰,王燕蓉,常青,于泊洋[4]（2018）在《促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用》一文中研究指出目的:观察小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)在小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中的抗凋亡作用。方法:将4周龄C57BL/6J雌性小鼠卵巢组织,分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0. 3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),玻璃化冻存条件为小鼠卵巢入培养液在37℃二氧化碳培养箱培养60 min,接着入1.5 mol/L乙二醇中预渗透平衡8 min,再移入EG5.5-30玻璃化液渗透平衡3.5 min,之后投入-196℃的液氮罐中保存1 d,全过程在22～24℃下进行。每组20枚卵巢,10枚进行HE染色后的正常卵泡百分比计数,10枚进行免疫组织化学法观察。结果:与对照组(CG)比较,玻璃化冻存对照组(VCG)正常卵泡百分比显着降低,active caspase-3的表达量显着升高(P<0.05);与玻璃化冻存对照组(VCG)比较,0.3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH)组的正常卵泡百分比明显升高,active caspase-3的表达量显着降低(P<0.05)。结论:小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH干预可有效抵抗凋亡执行蛋白active caspase-3的表达,有利于卵巢组织形态结构的保护。(本文来源于《中国应用生理学杂志》期刊2018年06期）
张淇,赵国旭,刘艺,张晓慧[5]（2019）在《最小体积玻璃化冻存技术在生物医学领域的进展和应用》一文中研究指出细胞和组织的生物保存在辅助生殖医学、再生医学和器官移植等领域均具有至关重要的作用,对公共健康具有广泛影响.生物保存方法主要包括传统的程序化慢冻法(slow freezing)和玻璃化冻存技术(vitrification).玻璃化冻存技术可通过降低或避免结晶的产生而显着提高细胞解冻后的活性和功能.但玻璃化冻存技术通常采用较高浓度的冷冻保护剂(cryoprotectant agent, CPA),会对细胞和组织产生一定的毒性和渗透压力.研究显示,通过减小玻璃化冻存中样品的体积(<1μL)可显着提高冷却速率,从而降低玻璃化冻存所需的CPA浓度.而微纳技术的迅速发展使得皮升至纳升量级样本的操作成为可能.因此,微纳技术与低温学的有机结合将为未来生物保存技术的发展提供巨大的潜能.(本文来源于《中国科学:生命科学》期刊2019年01期）
隋玉龙[6]（2018）在《玻璃化冻存方案对同种异体瓣膜免疫原性的影响及MitoQ对VS83方案组织活性提升作用研究》一文中研究指出研究背景:同种瓣具有良好的血流动力学和较高的抗感染特性,但在部分接受同种瓣移植的患者中出现衰败加速的问题,其原因主要与瓣膜本身的免疫原性和冻存过程中造成的组织损伤有关。近年来,几种组织玻璃化保存方法被提出,研究显示玻璃化方案具有降低组织免疫原性的作用。但一方面,其免疫调节机制不明确,且玻璃化组织活性与免疫原性间的关系存在争议,另一方面VS83方案中存在严重组织活性损害,需要进一步改进。目的:(1)探究VS55方案对带瓣主动脉组织免疫原性的影响及其与NLRP3炎性小体激活的联系,阐明玻璃化组织活性与其免疫原性间的联系。(2)在VS83方案中加入抗氧化剂Mito Q,探索该方案对组织活性的提升作用及其对组织细胞线粒体动力学的影响。方法和结果:第一部分研究使用新西兰兔带瓣主动脉作为实验材料,为消除不同保存方法内皮残留不同对实验结果造成的影响,我们首先对组织进行了脱内皮处理。将脱内皮后的组织,随机分为新鲜对照组、梯度降温组(CFC组)和VS55方案组(IFC组),并使用不同方案保存。8周后取出保存的组织,进行组织复温,对复温后组织的活性和组织内ATP水平以及NLRP3炎性小体激活情况进行检测,随后我们将组织包埋至家兔皮下,2周后检测组织内TNFα和IL-6表达水平。结果显示,各组带瓣主动脉去内皮完全,IFC组在组织活性和ATP含量与CFC组相近的情况下,表现出NLRP3炎性小体的激活抑制。在皮下包埋后,IFC组相对于其他两组,出现组织内TNFα和IL-6表达的降低。第二部分研究主要针对VS83方案中组织活性损害问题进行改进和探索。仍以新西兰兔带瓣主动脉作为研究材料,设置新鲜对照组(A)、梯度降温组(B)、VS83方案组(C)和VS83联合抗氧化剂Mito Q(20 n M)方案组(D)。将各组组织按照不同方案保存8周,复温后立即行常规染色和组织活性氧(ROS)水平检测,透射电镜下观察线粒体形态学改变,在体外组织培养3小时后,检测各组组织活性、ATP含量及线粒体动力相关蛋白(Mfn2、Drp1)表达情况。结果显示,复温后C组组织活性和线粒体均存在严重损害,相比于C组,D组内活性氧水平降低,线粒体损害减轻,组织活性明显提高,并在复温早期出现Mfn2表达的升高。结论:(1)VS55方案能够降低带瓣主动脉组织的免疫原性,其机制可能与NLRP3炎性小体表达降低有关,而玻璃化组织活性的高低并不是影响其免疫原性的主要因素。(2)在VS83方案中加入抗氧化剂Mito Q,能够提高玻璃化带瓣主动脉组织的保存活性,该作用与复温早期线粒体融合增强有关。(本文来源于《青岛大学》期刊2018-05-20）
张源[7]（2018）在《玻璃化冻存切片培养在转移性肝癌药敏实验中的应用》一文中研究指出目的:探讨玻璃化冻存活检肿瘤组织的可行性和有效性,尝试基于薄层切片体外培养技术建立一种全新高效的体外抗肿瘤药敏实验模型。方法:从仁济医院肿瘤介入科获取直肠癌肝转移活检组织,并作玻璃化冻存处理,复苏后组织用于建立直肠癌肝转移人源性移植瘤模型。将移植瘤切割成300μm厚度切片,嵌取直径2mm的组织圆片。组织圆片于Transwell表面培养24小时后,向培养液中分别添加抗肿瘤药物奥沙利铂(20μM)和瑞格菲尼(20μM),充分反应72小时。利用复苏后组织建立人源性移植瘤模型,分别腹腔注射200μl抗肿瘤药物奥沙利铂(5mg/kg)和瑞格菲尼(30mg/kg)。通过CCK-8实验和Calcein-AM活细胞染色/Hoechst33342染色实验检测细胞生物学活性变化;通过苏木紫伊红染色实验检测组织学结构变化;通过免疫组化实验检测细胞增殖与凋亡情况。结果:玻璃化冻存法可以有效保持直肠癌肝转移活检组织的生物学活性,体外薄层切片培养技术可以高度保留原始肿瘤的叁维结构和组织异质性。新鲜的肿瘤活检组织和复苏后活检组织均可建立人源性移植瘤模型,且体内外药敏反应结果具有一致性。结论:直肠癌肝转移活检肿瘤组织可以被有效冻存,其生物学活性和组织学特征得以高度保留,复苏组织薄层切片可以作为一种新型的、高效的体外药敏实验模型。(本文来源于《上海交通大学》期刊2018-04-01）
刘磊,庸奇,李娜,杨朵,张国英[8]（2018）在《脂肪干细胞-脱钙骨的玻璃化冻存及复苏》一文中研究指出背景:前期研究应用玻璃化冻存脂肪干细胞-脱钙骨支架复合物1周,得到玻璃化冻存液合适的配比成分。延长玻璃化冻存时间至12周,是否仍能保持细胞活力以及成骨能力值得进一步研究。目的:探讨短时(1周)、长时(12周)玻璃化冻存对组织工程骨中脂肪干细胞增殖活性和成骨能力的影响。方法:分离新西兰大白兔脂肪干细胞,扩增至第3代,接种于猪松质骨来源的脱钙骨,成骨诱导1周。将构建的组织工程骨,转移至含有玻璃化冻存液(30%二甲基亚砜,70%LG-DMEM,0.8 mol/L海藻糖)的2 m L冻存管中,将冻存管投入液氮冻存。分别于冻存后1周和12周,复苏1,3,7,11,13 d,用活死双染试剂染色,共聚焦显微镜观察脂肪干细胞在脱钙骨上的生长情况。复苏1,3,5,7,9,11,13 d,用Hochest33258法检测支架材料上的细胞数目。复苏1,4,7,10,14,21 d,用PNP微板法检测碱性磷酸酶活力,Real-time PCR检测成骨基因Runx2,OCN,COL-1,ALP的表达。结果与结论:(1)细胞活死双染结果显示,冻存1周或12周后,复苏1 d时红染的死细胞较冻存前红染的死细胞多,复苏3 d后绿染的活细胞逐渐增多;(2)Hochest33258结果表明,与冻存前的细胞数相比,冻存1周或者12周后,复苏第1,3天的细胞数目有所降低,复苏3 d后细胞数目开始持续增加,复苏第5天细胞数目恢复至冻存前水平;(3)复苏后1,4 d,碱性磷酸酶活力降低但是与冻存前比较差异无显着性意义,复苏4 d后碱性磷酸酶活力持续升高;(4)复苏后1,4 d,成骨基因Runx2,Col-1,ALP,OCN表达降低但是与冻存前相比差异无显着性意义,复苏4 d后成骨基因表达持续升高;(5)玻璃化冻存1周与12周比较,复苏后的细胞活力和成骨活性差异均无显着性意义;(6)实验初步证实,玻璃化冻存可以保持组织工程骨的细胞活力与成骨活性;冻存时间(1,12周)对复苏后组织工程骨的成骨能力没有显着影响。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2018年09期）
张源,杨秋蕊,张洪丹,朱雪晶,李伟建[9]（2018）在《新型玻璃化冻存技术在活肿瘤组织样本库建设中的应用》一文中研究指出背景:玻璃化冻存是一种新型的低温保存技术,在临床活肿瘤组织样本库的建设中具有潜在的应用价值。目的:探讨新型玻璃化冻存技术的有效性以及在活肿瘤穿刺组织样本库建设中的可行性。方法:将新鲜直肠癌肝转移活检组织样本随机分为2组,实验组作玻璃化冻存处理,对照组不作处理。取部分复苏后活检组织和部分新鲜活检组织分别接种于小鼠背部皮下,建立人源化移植瘤模型。对比观察活检肿瘤组织冻存前后生物学活性和组织学特征的变化。Calcein-AM活细胞染色和Hoechst33342染色反映细胞活性变化,Ki67标记免疫组织化学及苏木精-伊红染色反映组织的增殖能力和形态学特征变化。初步收集105例直肠癌肝转移活检组织并作玻璃化冻存,建立活性肿瘤穿刺组织生物样本库。结果与结论:直肠癌肝转移活检组织在玻璃化冻存前后未发生显着的生物学活性和形态学特征改变(P>0.05),说明新型玻璃化冻存技术可有效冻存活性穿刺肿瘤组织,并对生物样本库的建设具有实际应用价值。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2018年04期）
庞玉娟,杜兴雨,李强,张志鹏,张焱如[10]（2018）在《玻璃化冻存对驴卵母细胞超微结构的影响》一文中研究指出试验旨在探究玻璃化冷冻对驴卵母细胞发育的影响,寻求驴卵母细胞冷冻的最佳条件。通过对不同发育时期的驴卵母细胞进行玻璃化冷冻,冷冻复苏后分别进行成熟培养和孤雌激活,并对GV期未冷冻组(对照组)、GV期冷冻组、IVM-MⅡ冷冻组卵母细胞微丝和线粒体超微结构进行免疫荧光标记,统计冷冻复苏后卵母细胞形态正常率、成熟率、孤雌激活卵裂率、超微结构正常率。结果表明,GV期冷冻组卵母细胞的形态正常率与GV期未冷冻组(对照组)间无显着差异(P>0.05),成熟率和卵裂率均显着低于对照组(P<0.05);IVM-MⅡ冷冻组的卵裂率显着低于对照组(P<0.05),且卵裂后细胞发育受到阻滞。冷冻组微丝在皮质区分布明显减少的卵母细胞数目增多,冷冻组卵母细胞的线粒体数量明显低于对照组,由此可以说明冷冻对卵母细胞超微结构有损伤,从而导致复苏后成熟率下降,影响卵母细胞的受精和体外发育,且GV期冷冻组较IVM-MⅡ冷冻组在微丝与线粒体结构上有较小损伤,发育状态较好。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年01期）
玻璃化冻存论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的采用叁种浓度冷冻保护剂方案对两周龄未成熟大鼠睾丸组织进行玻璃化冻存,并对冻存效果做出评价。方法根据DMEM/F12培养基中所含二甲基亚砜(DMSO)和乙二醇(EG)的浓度差异,将冻存液分为A、B、C叁组,其中DMSO和EG的浓度依次为7.5%、15%、25%。将大鼠睾丸分割为8mm3～9mm3大小的组织块,分别纳入对照组、A组、B组和C组中。对照组的睾丸组织不作冷冻处理,直接进行后续实验;A、B、C叁组使用不同浓度的冷冻保护剂进行玻璃化冷冻。冻存2周后,取出样本进行复苏。比较各组睾丸组织的形态学改变,采用免疫荧光染色观察精原细胞标志物UCHL1、支持细胞标志物SOX9、睾丸间质Leydig细胞标志物StAR和细胞增殖核抗原PCNA表达的改变,观察细胞的凋亡情况。结果玻璃化冻存后,未成熟大鼠睾丸组织形态发生一定程度改变,生精细胞及支持细胞标志物表达下降,凋亡增加,与对照组比较均有显着性差异(P<0.05)。叁个冻存组中,B组形态学改变最小,细胞标志物表达水平与对照组相差最少,凋亡最少;A组的结构损伤明显,生精上皮与基底膜分离;C组的细胞标志物表达显着下降,凋亡增加最显着。结论冷冻保护剂浓度变化对未成熟睾丸组织玻璃化冻存效果有显着影响,15%DMSO和15%EG组合是玻璃化冻存未成熟大鼠睾丸组织较适宜的冷冻保护剂浓度方案,可为进一步的临床应用提供参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
玻璃化冻存论文参考文献
[1].何志,李学拥,雷战军,赵卓伟,孟祥海.玻璃化冻存延期回植技术在大面积皮肤撕脱伤中的应用研究[J].现代生物医学进展.2019
[2].童越,傅龙龙,安琪,贾艳飞,张开舒.未成熟大鼠睾丸组织玻璃化冻存效果的比较性研究[J].生殖医学杂志.2019
[3].李强,庞玉娟,武艺,张焱如,曹俊伟.玻璃化冻存对蒙古驴卵母细胞甲基化及GFM1、MRPL15基因表达水平的影响[J].畜牧与饲料科学.2019
[4].陈杰,王燕蓉,常青,于泊洋.促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用[J].中国应用生理学杂志.2018
[5].张淇,赵国旭,刘艺,张晓慧.最小体积玻璃化冻存技术在生物医学领域的进展和应用[J].中国科学:生命科学.2019
[6].隋玉龙.玻璃化冻存方案对同种异体瓣膜免疫原性的影响及MitoQ对VS83方案组织活性提升作用研究[D].青岛大学.2018
[7].张源.玻璃化冻存切片培养在转移性肝癌药敏实验中的应用[D].上海交通大学.2018
[8].刘磊,庸奇,李娜,杨朵,张国英.脂肪干细胞-脱钙骨的玻璃化冻存及复苏[J].中国组织工程研究.2018
[9].张源,杨秋蕊,张洪丹,朱雪晶,李伟建.新型玻璃化冻存技术在活肿瘤组织样本库建设中的应用[J].中国组织工程研究.2018
[10].庞玉娟,杜兴雨,李强,张志鹏,张焱如.玻璃化冻存对驴卵母细胞超微结构的影响[J].中国畜牧兽医.2018
论文知识图
