吉林克雷伯氏菌2N3降解氯嘧磺隆基因Kj-mhpC功能研究

论文摘要

采用λ-Red重组技术对氯嘧磺隆降解菌——吉林克雷伯氏菌2N3的2个水解酶mhpC基因Kj-mhpC-2096和Kj-mhpC-2289分别进行了敲除,获得了2个基因的突变体,并通过PCR对敲除突变体进行了验证。在含有5 mg/L氯嘧磺隆的液体基础培养基中,对突变体的生长速度以及对氯嘧磺隆的降解能力进行了检测。结果表明:10 h内野生型和突变体均生长至最高浓度,ΔKj-mhpC-2096生长速度最慢,最终细胞浓度最低,野生型生长速度最快。8 h内,ΔKj-mhpC-2096和ΔKj-mhpC-2289对氯嘧磺隆的降解率明显低于野生型,在8 h之后ΔKj-mhpC-2289对氯嘧磺隆的降解率逐渐与野生型相当,最终降解率>90%,而ΔKj-mhpC-2096在将氯嘧磺隆降解至约1 mg/L后,基本停止了降解。这表明mhpC的缺失对氯嘧磺隆的降解产生了一定的影响,导致菌株对氯嘧磺隆耐受能力降低,降解率与降解速度均降低,初步证明Kj-mhpC-2096参与了氯嘧磺隆的降解。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 供试菌株、质粒和引物
•   1.2 试剂
•   1.3 培养基
•   1.4 主要仪器
•   1.5 Kj-mhp C-2096和Kj-mhp C-2289的基因敲除
•     1.5.1 p KD46质粒的抗性改造
•     1.5.2 基因敲除
•   1.6 突变体ΔKj-mhp C-2096和ΔKj-mhp C-2 2 8 9 在氯嘧磺隆环境中的生长状况及对氯嘧磺隆的降解
• 2 结果与分析
•   2.1 p KD46质粒的抗性改造
•   2.2 ΔKj-mhp C-2096和ΔKj-mhp C-2289的鉴定
•   2.3 ΔKj-mhp C-2096和ΔKj-mhp C-2289在氯嘧磺隆环境中的生长状况
•   2.4 ΔKj-mhp C-2096和ΔKj-mhp C-2289对氯嘧磺隆的降解
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郝庆凯,张程,张祥辉,潘洪玉,张浩

关键词: 吉林克雷伯氏菌,氯嘧磺隆,功能基因

来源: 吉林农业大学学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 生物学,环境科学与资源利用

单位: 吉林农业大学资源与环境学院,吉林大学植物科学学院吉林省资源微生物工程研究中心

基金: 国家自然科学基金项目(31672051),国家重点研发计划项目(2016YFD0200203)

分类号: X592;Q933

DOI: 10.13327/j.jjlau.2019.4395

页码: 731-736

总页数: 6

文件大小: 210K

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