重组人凝血因子Ⅸ在CHO细胞中的表达和纯化

论文摘要

目的在CHO细胞中表达并纯化人凝血因子Ⅸ（human coagulation factorⅨ,hFⅨ）。方法将高表达hFⅨ的CHO细胞株在摇瓶中用无血清培养基进行批次培养和补料批次培养,收获补料批次培养上清,通过阴离子交换层析进行纯化,测定纯化产物的蛋白浓度及hFⅨ活性,并进行SDS-PAGE分析。结果批次和补料批次培养表达的hFⅨ活性分别高达0. 62和14. 45 IU/mL。纯化后的h FⅨ比活性高达157. 19 IU/mg。SDS-PAGE分析表明重组CHO工程细胞株能正确表达hFⅨ。结论成功在CHO细胞中表达并纯化了高比活性的重组hFⅨ蛋白,为进一步研制重组FⅨ药物奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 细胞株
•   1.2 主要试剂
•   1.3 h FⅨ高表达细胞株的批次培养
•   1.4 h FⅨ高表达细胞株的补料批次培养和纯化
•   1.5 蛋白浓度测定
•   1.6 h FⅨ活性测定
•   1.7 SDS-PAGE分析
• 2 结果
•   2.1 h FⅨ高表达细胞株的批次培养
•   2.2 h FⅨ高表达细胞株的补料批次培养
•   2.3 纯化h FⅨ的鉴定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李德款,张航,聂艳桃,李成,梁洪,寇鹏,费保进

关键词: 人凝血因子,中国仓鼠卵巢细胞,阴离子交换层析

来源: 中国生物制品学杂志 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,药学

单位: 成都蓉生药业有限责任公司科研管理部

分类号: R91;Q78

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002861

页码: 1243-1246

总页数: 4

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