髓源性抑制细胞对脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡的保护作用

髓源性抑制细胞对脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡的保护作用

论文摘要

目的探讨髓源性抑制细胞(MDSCs)对LPS诱导的内皮细胞凋亡是否有保护作用。方法采用流式分选技术从脓毒症患者外周血中分离MDSCs,将其与LPS预处理过的人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)共培养设为实验组,HUVECs未经任何处理设为空白组,HUVECs经LPS刺激设为对照组。通过Hoechst染色观察各组细胞形态学上的变化,通过CCK-8以及流式测凋亡检测各组内皮细胞增殖、凋亡的情况。结果选择用浓度为10μg/mL的LPS刺激HUVEC 6 h构建脓毒症细胞模型。实验组内皮细胞增殖活性优于对照组(OD值:1.018 vs. 0.852,P=0.008),低于空白组(OD值:1.018 vs. 1.214,P=0.002);实验组凋亡率低于对照组(凋亡率:12.90%vs. 18.65%,P <0.001),高于空白组(凋亡率:12.90%vs.18.65%,P <0.001)。结论 MDSCs能促进LPS诱导的内皮细胞增殖、减少其凋亡,对内皮细胞的损伤及凋亡具有保护作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 主要仪器
  •     1.1.2 主要试剂
  •   1.2 细胞培养
  •     1.2.1 人脐带静脉内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)
  •     1.2.2 髓源性抑制细胞
  •   1.3 CCK-8 (Cell Counting Kit-8) 法摸索LPS作用于HUVECs的最佳浓度及时间
  •   1.4 实验细胞分组
  •   1.5 Hoechst染色观察各实验组HUVECs形态学变化
  •   1.6 CCK-8检测各实验组HUVECs的增殖活性
  •   1.7 AnnexinV-FITC/PI双染检测各实验组HUVECs的凋亡率
  •   1.8 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 MDSCs的分选结果
  •   2.2 LPS刺激HUVECs的最佳浓度及作用时间
  •   2.3 实验各组HUVECs形态学观察
  •   2.4 实验各组HUVECs的增殖活性
  •   2.5 实验各组HUVECs的凋亡率
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 许静红,吕嘉贤,童荔,胡晓光,朱艳平,姚纪友,黄发,蔡常洁

    关键词: 脓毒症,髓源性抑制细胞,人脐带静脉内皮细胞,凋亡

    来源: 实用医学杂志 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 中山大学附属第一医院,国家卫生健康委员会辅助循环重点实验室

    基金: 广州市科学研究专项(编号:201607010186),广州市科技计划项目(编号:201704020153),广东省器官捐献与移植免疫重点实验室建设项目(编号:2013A061401007),广东省器官移植国际合作基地项目(编号:2015B050501002)

    分类号: R329.2

    页码: 1064-1068

    总页数: 5

    文件大小: 2541K

    下载量: 154

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