胆碱单加氧酶论文_朱天艺,龚一富,刘增美,王何瑜

导读:本文包含了胆碱单加氧酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:胆碱,基因,北美,转基因,杜梨,青稞,茶树。

胆碱单加氧酶论文文献综述

朱天艺,龚一富,刘增美,王何瑜[1](2016)在《北美海蓬子胆碱单加氧酶基因CMO的克隆及表达研究》一文中研究指出胆碱单加氧酶(CMO)是合成植物小分子非毒性有机渗透调节物质甜菜碱过程中重要的限速酶.文中采用RACE技术以北美海蓬子为实验材料克隆CMO基因的全长c DNA序列(Genbank登录号:KM884944),并做相关的生物信息学分析.研究结果表明,该基因c DNA全长1 834 bp,其中开放阅读框(ORF)有1 317 bp,编码439个氨基酸,预测其蛋白分子量为49.537 k Da,理论等电点(p I)为6.15;序列分析显示北美海蓬子CMO蛋白中含有2个重要的保守域和功能域,不存在跨膜区域;除了与蒺藜苜蓿及水稻的同源性分别为46%和49%外,与其他植物CMO蛋白序列相似性均达到55%以上;系统进化树分析显示,它与欧洲海蓬子的亲缘关系最近;实时荧光定量PCR结果显示,随着Na Cl浓度的升高,北美海蓬子CMO基因的表达量增加,说明该基因可通过盐胁迫诱导表达.(本文来源于《宁波大学学报(理工版)》期刊2016年04期)

朱天艺,龚一富,刘增美,王何瑜[2](2015)在《转北美海蓬子胆碱单加氧酶基因(cmo)烟草的获得及耐盐性鉴定》一文中研究指出胆碱单加氧酶(choline monooxygenase,CMO)是植物甜菜碱合成过程中重要的限速酶。为探讨转北美海蓬子(Salicornia bigelovii)cmo基因烟草(Nicotiana tabacum)在耐盐基因工程中的应用,利用基础质粒p CAMBIA1300UR构建p CAMBIA1300UR-cmo植物表达载体,通过电击法将重组质粒导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105中,并采用农杆菌介导的叶盘转化法转入烟草,经抗生素筛选、PCR和q RT-PCR检测后,对阳性烟草植株进行耐盐性鉴定。结果表明,北美海蓬子cmo基因在烟草中具有80%的转化效率,在200 mmol/L盐胁迫下,转基因植株的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)及脯氨酸(proline,PRO)含量明显高于非转基因的烟草植株,而丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)含量则低于非转基因组。结果表明,cmo基因的转化提高了烟草的耐盐性,为进一步阐明cmo基因在植物体内的甜菜碱合成代谢途径、抗逆调控机制及培育耐盐植物新品种提供基因资源库和理论参考。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2015年10期)

曹红利,岳川,郝心愿,王新超,杨亚军[3](2013)在《茶树胆碱单加氧酶CsCMO的克隆及甜菜碱合成关键基因的表达分析》一文中研究指出【目的】从茶树中克隆甜菜碱(GB)合成途径中的关键酶——胆碱单加氧酶CsCMO,研究不同逆境胁迫和不同抗寒茶树品种间GB合成中关键基因的表达模式,并分析茶树体内GB的含量,为茶树抗性育种奠定基础。【方法】采用反转录PCR结合RACE技术,从茶树中克隆CsCMO的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析,结合前期克隆得到的茶树甜菜碱醛脱氢酶CsBADH,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析这2个基因的表达模式,紫外分光光度计测定GB含量。【结果】克隆得到茶树CsCMO(GenBank登录号:JX050146)的cDNA全长1 558 bp,包含1 305 bp的完整开放阅读框(ORF),编码434个氨基酸,并被定位在叶绿体上。氨基酸序列分析表明,CsCMO含有CMO中保守的Rieske型2Fe-2S结构域和单分子非血红素Fe结合位点,与其它植物CMO序列相似性在50%以上;进化树分析显示,它与枸杞的关系最近。qRT-PCR分析表明,4℃低温、NaCl盐和ABA处理均能诱导CsCMO和CsBADH表达,96 h内随着处理时间的增加,表达量呈增加趋势,但2个基因的表达模式有差异,盐胁迫诱导基因表达更显着;在不同抗寒品种中,2个基因的表达在抗性强的品种中表达量总体要高于抗性弱的品种,且CsBADH的变化比CsCMO的显着。3种胁迫处理48 h后,叶片中的GB含量均增加;低温处理后抗寒性强的品种中GB含量比抗寒性弱的高。【结论】克隆了茶树CsCMO,在低温、NaCl盐以及ABA处理下,GB积累,CsBADH和CsCMO上调表达,且盐胁迫下的表达更明显,表明GB与茶树抵御这3种胁迫关系密切。(本文来源于《中国农业科学》期刊2013年15期)

李慧,丛郁,常有宏,蔺经,盛宝龙[4](2012)在《杜梨胆碱单加氧酶基因克隆及胁迫表达》一文中研究指出为了解梨砧木—杜梨对非生物胁迫的防御机制,采用RT-PCR、RACE和长片段PCR技术从杜梨幼苗中获得1个甜菜碱合成相关的胆碱单加氧酶基因(PbCMO),运用生物信息学方法分析序列特点,并通过跨内含子引物进行半定量RT-PCR研究其在非生物胁迫下的表达情况。结果表明:(1)PbCMO基因cDNA序列编码区长1 227bp,编码由408个氨基酸组成的多肽。其对应基因组DNA序列长2 928bp,由10个外显子和9个内含子组成。其推导的多肽预测的等电点为6.19,相对分子质量为46.27kD,具备Rieske型铁硫[2Fe-2S]簇结合区域和非血红素单核态铁配位点序列,与枸杞CMO蛋白相似性最高(71%)。(2)PbCMO在幼苗根和叶中均为诱导型表达,100mmol/L氯化钠、10%(W/V)聚乙二醇、180mmol/L甘露醇或20μmol/L脱落酸处理后其表达量明显上调,表明PbCMO对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA均存在表达响应,可能参与杜梨应对非生物胁迫的转录调节。(本文来源于《西北植物学报》期刊2012年06期)

黑蕾,王玉婧,陈浩,赵宇玮,郝建国[5](2010)在《青稞胆碱单加氧酶基因cDNA全长开放阅读框克隆及序列分析》一文中研究指出甜菜碱是一种存在于多种生物体内的季胺类高效渗透调节剂,是由甜菜碱合成酶系催化的。为了研究甜菜碱合成酶系基因的表达和青稞高抗逆性之间的关系,我们以经200mmol/L NaCl预处理72h的青稞幼苗叶片及根中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR技术,扩增得到全长1224bp,推测编码407个氨基酸残基的青稞胆碱单加氧酶(choline monooxygenase,cmo)基因cDNA全长开放阅读框(open reading frame,ORF),将其命名为hvcmo1并在GenBank中注册,获得登录号为GU810840。生物信息学分析表明,推定的氨基酸序列中含有与已报道高等植物胆碱单加氧酶氨基酸序列中的Rieske型铁硫簇结合区和单核铁结合基序等特征性结构域具有高度保守性的特征性结构域。与多种高等植物cmo基因进行序列同源性比对分析结果显示:hvcmo1的核苷酸序列与甜菜、盐角草、菠菜、辽宁碱蓬、拟南芥、玉米、水稻、高粱、羊草和大麦等植物的cmo mRNA编码区相似性分别为55.3%、55.4%、55.6%、5.9%、61.3%、82.6%、83.3%、83.4%、95.5%和99.5%。实验过程中,我们发现,青稞hvcmo1基因的表达必须被一定浓度的NaCl所诱导,说明hvcmo1可能在调节环境胁迫下青稞细胞内甘氨酸甜菜碱合成方面起着关键的作用,同时它可以作为研究环境胁迫下甘氨酸甜菜碱合成调节的模型。本结果为研究青稞甘氨酸甜菜碱合成酶系基因的诱导表达及其与青稞强抗逆性之间的关系奠定了基础。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2010年05期)

田跃胜,许洁婷,陆平,王国丰,唐克轩[6](2010)在《枸杞胆碱单加氧酶基因的克隆与表达分析》一文中研究指出根据GenBank中的植物胆碱加氧酶(CMO)基因的同源保守区设计简并引物,采用RT-PCR技术从枸杞中扩增出CMO基因的保守序列,并利用巢式PCR、5'-RACE和3'-RACE获得全长CMO。测序结果表明,CMO全长1540 bp,包含1 284 bp长的开放读码框(ORF),编码1个含427氨基酸残基、分子量为48.48 kDa、等电点(pI)为5.97的假定蛋白质。此序列Genbank登录号为FJ514800。mRNA分析表明,CMO基因在枸杞幼苗组织中受高盐胁迫和低温胁迫的上调诱导表达,表明该基因可能在植物抵御非生物胁迫中发挥重要作用。(本文来源于《上海交通大学学报(农业科学版)》期刊2010年05期)

罗伯祥,肖自友,邓力华,陈芬,陈受宜[7](2010)在《转山菠菜胆碱单加氧酶基因(AhCMO)水稻创制及其耐盐性研究》一文中研究指出胆碱单加氧酶(Choline monooxygenase,CMO)是高等植物体内合成甜菜碱的一个关键酶.利用载体pCAMBIA3300与玉米泛素(Ubiquitin)启动子构建了AhCMO基因的过表达载体.采用基因枪轰击愈伤组织细胞将AhCMO基因转化东稻3号(OryzasativaL.subsp.japonica Kato),经抗性筛选,获得再生苗18株,选取农艺性状与野生型基本一致的其中7株进行PCR与Southern杂交检测,获得3株转AhCMO基因阳性植株;RT-PCR的检测结果表明外源AhCMO基因能正常转录;草铵膦叶片涂布试验结果表明,Bar基因在转AhCMO基因水稻植株中能正常表达;对T1代转基因再生植株进行0.5%NaCl高盐处理,结果表明,4号、7号转AhCMO基因水稻耐盐性强于非转基因对照,说明外源AhCMO基因能提高东稻3号的耐盐性.(本文来源于《生命科学研究》期刊2010年03期)

栗亮[8](2009)在《菠菜胆碱单加氧酶基因转化马铃薯的研究》一文中研究指出干旱和盐碱是全球面临的严重问题之一,也是制约我国农业生产的主要因素。盐碱地不仅降低耕地的生产力,而且严重制约着耕地持续利用,直接影响着农业的可持续发展。许多重要的农作物如水稻、马铃薯、烟草等对干旱和盐碱比较敏感,缺乏有效的耐旱机理,经常因干旱和盐碱造成严重的产量损失。随着基因工程领域的不断发展,人们已经克隆出很多具有提高植物耐盐碱能力的功能基因。甜菜碱是高等植物重要的渗透调节物质,在调节植物对环境胁迫的适应性,提高植物对各种胁迫因子抗性等方面具有重要的生理作用。胆碱单加氧酶(CMO)是渗透保护剂甜菜碱生物合成的关键酶之一。马铃薯自身并不能积累甜菜碱,如果利用基因工程技术,把CMO基因转入农作物,使其积累甜菜碱,将有可能达到增强农作物抗旱耐盐性的目的。本研究的主要目的是通过根癌农杆菌介导法将强组成型表达启动子CaMV 35S和逆境诱导表达启动子rd29A驱动的菠菜胆碱单加氧酶(CMO)基因导入马铃薯栽培品种夏波蒂(Shepody)和费乌瑞它(Favorita)中,以研究单独转化CMO基因对马铃薯抗旱耐盐性的影响,为丰富植物转基因理论和培育抗逆作物新品种提供理论依据。取得的主要研究结果如下:1.以马铃薯栽培品种Shepody和Favorita为实验材料,利用固体培养法和液体培养法进行了试管薯的诱导,并对其农杆菌介导的遗传转化体系进行了优化研究。结果表明,诱导芽分化的过程中,2000 lux的光照强度有利于试管薯薄片直接再生出抗性芽,马铃薯试管薯转化效率可达51%。2.用马铃薯栽培品种Shepody和Favorita的试管薯为供体材料,分别用组成型表达启动子CaMV 35S和逆境诱导表达启动子rd29A驱动的CMO基因表达载体进行遗传转化,获得了转化植株。通过PCR扩增初步表明CMO基因已整合到马铃薯基因组中。3.对转基因马铃薯植株的形态学观察表明,转基因植株的形态正常,未发生畸形突变。在干旱和盐碱胁迫下,转基因植株与未转基因的对照相比,其抗旱耐盐性差异不大。从而说明,单独转化CMO基因对提高转基因马铃薯抗旱耐盐性的效果不明显。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2009-06-01)

柳娜,王蒂,司怀军,李东魁,刘海英[9](2007)在《菠菜胆碱单加氧酶基因cDNA的克隆及重组植物表达载体的构建》一文中研究指出从菠菜叶片中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增到菠菜胆碱单加氧酶(CMO)基因cDNA,然后将CMO cDNA克隆至pBluescript SK+载体上,序列分析结果表明,该CMO cDNA全长为1 424 bp,开放阅读框1 320 bp,编码440个氨基酸。核酸序列同源性分析表明,该cDNA与已发表的菠菜CMO基因具有99.8%同源性,氨基酸序列同源性达99.6%。在此基础上以pBI121和pBIrd为基础,构建了组成型启动子CaMV 35S和逆境诱导表达启动子rd29A驱动的CMO基因的植物表达载体。(本文来源于《西北农业学报》期刊2007年06期)

张慧军,董合忠,石跃进,陈受宜,朱永红[10](2007)在《山菠菜胆碱单加氧酶基因对棉花的遗传转化和耐盐性表达》一文中研究指出胆碱单加氧酶(CMO)是渗透保护剂甜菜碱生物合成的关键酶之一。以棉花(Gossypium hirsutium L.)泗棉3号的下胚轴切段为外植体,利用农杆菌介导法将克隆自山菠菜(Atriplex hortensis)的AhCMO基因导入其中,通过组织培养胚状体发生途径获得转基因再生植株。以0.5%卡那霉素对再生苗筛选后,PCR检测抗卡那霉素棉苗确认阳性转化株,Southern和Northern杂交结果进一步证实外源基因已导入棉花并得到表达。在温室盆栽条件下,于2片真叶期对转AhCMO基因棉花及其转化受体泗棉3号施加0.5%的NaCl胁迫,15d后发现其光合作用和植株生长被显着抑制,非转基因棉花泗棉3号的株高、鲜重和光合速率分别降低了57.6%、65.6%和69.9%,而转AhCMO基因的棉株分别降低了37.3%、54.6%和47.9%。转AhCMO棉花所受盐害程度显着小于非转基因的棉株,说明AhCMO基因的导入和表达提高了转基因棉花的耐盐性。(本文来源于《作物学报》期刊2007年07期)

胆碱单加氧酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

胆碱单加氧酶(choline monooxygenase,CMO)是植物甜菜碱合成过程中重要的限速酶。为探讨转北美海蓬子(Salicornia bigelovii)cmo基因烟草(Nicotiana tabacum)在耐盐基因工程中的应用,利用基础质粒p CAMBIA1300UR构建p CAMBIA1300UR-cmo植物表达载体,通过电击法将重组质粒导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105中,并采用农杆菌介导的叶盘转化法转入烟草,经抗生素筛选、PCR和q RT-PCR检测后,对阳性烟草植株进行耐盐性鉴定。结果表明,北美海蓬子cmo基因在烟草中具有80%的转化效率,在200 mmol/L盐胁迫下,转基因植株的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)及脯氨酸(proline,PRO)含量明显高于非转基因的烟草植株,而丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)含量则低于非转基因组。结果表明,cmo基因的转化提高了烟草的耐盐性,为进一步阐明cmo基因在植物体内的甜菜碱合成代谢途径、抗逆调控机制及培育耐盐植物新品种提供基因资源库和理论参考。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

胆碱单加氧酶论文参考文献

[1].朱天艺,龚一富,刘增美,王何瑜.北美海蓬子胆碱单加氧酶基因CMO的克隆及表达研究[J].宁波大学学报(理工版).2016

[2].朱天艺,龚一富,刘增美,王何瑜.转北美海蓬子胆碱单加氧酶基因(cmo)烟草的获得及耐盐性鉴定[J].农业生物技术学报.2015

[3].曹红利,岳川,郝心愿,王新超,杨亚军.茶树胆碱单加氧酶CsCMO的克隆及甜菜碱合成关键基因的表达分析[J].中国农业科学.2013

[4].李慧,丛郁,常有宏,蔺经,盛宝龙.杜梨胆碱单加氧酶基因克隆及胁迫表达[J].西北植物学报.2012

[5].黑蕾,王玉婧,陈浩,赵宇玮,郝建国.青稞胆碱单加氧酶基因cDNA全长开放阅读框克隆及序列分析[J].基因组学与应用生物学.2010

[6].田跃胜,许洁婷,陆平,王国丰,唐克轩.枸杞胆碱单加氧酶基因的克隆与表达分析[J].上海交通大学学报(农业科学版).2010

[7].罗伯祥,肖自友,邓力华,陈芬,陈受宜.转山菠菜胆碱单加氧酶基因(AhCMO)水稻创制及其耐盐性研究[J].生命科学研究.2010

[8].栗亮.菠菜胆碱单加氧酶基因转化马铃薯的研究[D].甘肃农业大学.2009

[9].柳娜,王蒂,司怀军,李东魁,刘海英.菠菜胆碱单加氧酶基因cDNA的克隆及重组植物表达载体的构建[J].西北农业学报.2007

[10].张慧军,董合忠,石跃进,陈受宜,朱永红.山菠菜胆碱单加氧酶基因对棉花的遗传转化和耐盐性表达[J].作物学报.2007

论文知识图

和CsBADH在不同茶树品种中的表达rd29A启动子驱动的CMO基因表达载体pB...一1甜菜碱代谢途径.一逆境胁迫下CsCMOFig.4ExpressionofCsCM...菠菜CMO的cDNA核苷酸序列3-2甘着CMO基因EST、3'端、5...

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