导读:本文包含了酪蛋白基因侧序列论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:荷斯坦牛,κ-酪蛋白(κ-CN)基因,PCR-SSCP
酪蛋白基因侧序列论文文献综述
黄亮,尚海彬,魏蕊,宁素恒,杜文斌[1]（2014）在《荷斯坦牛κ-酪蛋白基因5′和3′侧翼序列多态性研究》一文中研究指出本试验采用PCR-SSCP技术检测了宁夏荷斯坦牛κ-酪蛋白(κ-casein protein,κ-CN)基因5′和3′侧翼区的遗传多态性。结果表明:κ-CN基因5′和3′侧翼区均存在遗传多态性,5′侧翼区有3种基因型(AA、BB和AB),等位基因频率分别为0.5345、0.4655;3′侧翼区有2种基因型(GG和GT),等位基因频率分别为0.8621、0.1379。κ-CN基因5′侧翼区基因型不符合Hardy-Weinberg平衡(P<0.01),3′侧翼区基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。5′和3′侧翼区的多态信息含量分别为0.3738、0.2095,分别表现为中度多态和低度多态;其杂合度、有效等位基因数分别为0.5019、0.2399和1.9905、1.3120。研究认为κ-CN基因5′侧翼区更适用于分析多态性与生产性能的关系,以及用于数量遗传座位的定位研究。(本文来源于《中国奶牛》期刊2014年10期）
祁宏,刘丽仙,袁峰,李大林,袁跃云[2]（2012）在《水牛κ-酪蛋白基因(CSN3)外显子4序列多态性研究》一文中研究指出分别设计位于CSN3 5个外显子旁侧引物,采用DNA测序法对沼泽型和河流型水牛CSN3编码区结构进行了分析,并对10个水牛群体共106个样本CSN3第4外显子序列进行了变异检测。结果表明,两类水牛CSN3编码区由848个核苷酸组成,包括ORF序列573bp、5′-UTR序列69bp和3′-UTR序列206bp。在水牛CSN3第4外显子中共检测到4个SNP,其中c.445G>A,c.467C>T和c.516A>C为异义替换,导致相应的κ-CN成熟肽中氨基酸发生p.Val128Ile、p.Thr135Ile和p.Glu151Asp改变,c.467C>T和c.516A>C替换可能对κ-CN功能产生了影响。群体遗传分析表明,在河流型水牛中,等位基因c.445G、c.467C、c.471C和c.516A均为优势等位基因,而在沼泽型水牛中,仅c.445G、c.467C和c.471C为优势等位基因,河流型和沼泽型水牛的遗传差异主要体现在SNP516位点的群体遗传组成上。(本文来源于《家畜生态学报》期刊2012年02期）
覃广胜,杨炳壮,黄加祥,张秀芳,陈明棠[3]（2010）在《水牛κ-酪蛋白外显子4基因的克隆及序列分析》一文中研究指出本研究根据普通牛的κ-酪蛋白基因设计一对引物,首次成功扩增出了水牛的κ-酪蛋白外显子4基因,并经序列分析,结果表明κ-酪蛋白外显子4基因片段长780 bp。利用GenBank上的Blast进行比较,中国水牛κ-酪蛋白外显子4序列与地中海水牛、牛、牦牛的κ-酪蛋白外显子4序列同源性分别为99.5%、96.4%、95.9%;氨基酸同源性比较,中国水牛、地中海水牛、牛、牦牛均编码260个氨基酸,中国水牛与地中海水牛、牛、牦牛同源性分别为98.9%、92.0%和91.2%。核苷酸和氨基酸序列同源性结果显示,中国水牛和地中海水牛κ-酪蛋白基因变异不大。但由于在碱基230 bp处发生了一个碱基(A→C)的变化,从而导致其氨基酸也发生了变化,即K(Lys赖氨酸)→R(Arg精氨酸)。本研究为进一步对该基因的功能奠定基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2010年09期）
田甜,寨鸿瑞,陈玉珍,刘若余[4]（2009）在《奶牛β-酪蛋白基因的克隆及序列分析》一文中研究指出利用高保真PCR技术扩增了黑白花奶牛β-酪蛋白基因(CSN2)5’和3’调控成分,纯化PCR产物与pMD 19-TVector亚克隆后酶切鉴定和测序。结果表明:克隆片断与奶牛β-酪蛋白基因相应区域同源性分别为97.0%和99.0%,并且包含有大部分的CSN2表达核心调控序列和多个转录、翻译因子的结合位点,获得了黑白花奶牛β-酪蛋白基因调控区的克隆。为构建乳腺特异表达载体,指导外源基因在转基因动物乳腺内高效表达奠定了基础。(本文来源于《贵州农业科学》期刊2009年08期）
张莉,李庆章,陈建晖,高学军,田雷[5]（2008）在《牛αS1-酪蛋白5′调控序列驱动人α-LA基因与LacZ基因在牛乳腺上皮细胞中的表达》一文中研究指出将牛αS1-酪蛋白5′调控序列约1.2kb的片段,连接到含SV40启动子调控下β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的PSV载体上,做为启动子,在其后连接0.76kb的人α-乳白蛋白基因(α-LA),构建真核表达载体αS1-LA-psv.采用组织块接种法,培养奶牛乳腺上皮细胞,经传代纯化后,对细胞接种存活率、群体倍增时间、生长曲线、形态学等生物学性状进行检测,用免疫荧光细胞染色法对培养的奶牛乳腺上皮细胞进行角蛋白18鉴定,结果表明,成功建立奶牛乳腺上皮细胞系,细胞传至20代以上时仍保持旺盛的增殖活力.将构建的真核表达载体αS1-LA-psv转染奶牛乳腺上皮细胞,培养24～120h均检测到了β-半乳糖苷酶的表达;培养72h检测到细胞中人α-乳白蛋白的表达,表达量约为0.64g/L.实验结果表明,建立的奶牛乳腺上皮细胞系具有外源基因表达活性,得到的牛αS1-酪蛋白5′调控序列能作为启动子指导外源基因的表达,构建的真核表达载体能在体外培养的牛乳腺上皮细胞中同时表达人α-乳白蛋白和β-半乳糖苷酶.(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2008年12期）
田雷,李庆章,张莉[6]（2007）在《牛αS1酪蛋白5′调控序列驱动报告基因LacZ在奶山羊乳腺上皮细胞中的表达》一文中研究指出αS1酪蛋白是牛乳中含量最高的酪蛋白.本研究克隆了牛αS1酪蛋白5′调控序列约1.2kb的片段,应用基因重组技术将其插入lacZ基因上游,构建真核表达载体gαs1p-psv.胶原酶消化法对奶山羊乳腺上皮细胞进行了分离培养,并用免疫荧光法鉴定了乳腺上皮细胞.将重组载体转染奶山羊乳腺上皮细胞,在细胞培养液中,转染后24h可以检测到lacZ基因的表达,之后表达水平有逐渐升高的趋势,72h开始降低,144h降到最低;在细胞破碎液中,转染后24h表达水平最高,之后表达水平有逐渐降低的趋势,144h降到最低.转染细胞的第1代表达水平最高,随细胞传代表达水平降低,传到第3代时基本检测不到表达产物.对转染后的细胞进行了β-半乳糖苷酶原位细胞染色.实验证明,得到的牛αS1酪蛋白5′调控序列能指导外源基因在奶山羊乳腺上皮细胞中表达.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2007年09期）
张玉峰[7]（2006）在《增强子对提高山羊β-酪蛋白调控序列指导人乳铁蛋白基因在转基因动物乳腺中特异性表达水平的研究》一文中研究指出人乳铁蛋白(human lactoferrin)又称乳转铁蛋白,是人乳汁中主要的铁结合蛋白,广泛分布于多种组织、体液中,具有提高免疫力,抗菌抑菌,参与铁代谢等多种生物学功能,具有广泛的应用前景。从理论上说动物乳腺组织是表达人乳铁蛋白最为理想的器官。然而,人乳铁蛋白基因在动物乳腺中高效表达的报道较少。因此,如何提高人乳铁蛋白基因在动物乳腺中的表达水平是这方面研究的关键。我们在以前实验研究的基础上,选用山羊β-酪蛋白启动子、外显子1、外显子2和内含子1共6.7kb大小的序列作为人乳铁蛋白乳腺特异性表达的调控序列。用PCR的方法从质粒载体上扩增出增强子DNA片段,通过xhol酶切PL18获得hLTF cDNA片段,共同构建了由Chickenβ-globin+山羊β-酪蛋白5`端+增强子+hLTF cDNA+山羊β-酪蛋白3`端组成的人乳铁蛋白基因乳腺特异表达载体pCL25。通过制备转基因小鼠验证所获得的乳腺特异性表达载体的表达特性。将构建的pCL25质粒用sal1与not1限制性内切酶消化,回收和纯化约18kb的表达载体部分,将回收的片段通过显微注射法导入小鼠受精卵原核,结果获得29只G0代小鼠,经PCR检测,其中1只小鼠整合有外源基因(2~#)。转基因小鼠与正常小鼠交配,出生小鼠经PCR筛选,获得F1代转基因小鼠4只(2公,2母),F2代转基因小鼠8只(母)。采用酶联免疫法(ELISA assay)和蛋白印迹(Western Blot)对原代转基因小鼠及其后代的乳汁进行目的蛋白的表达检测。ELISA检测结果表明在转基因小鼠G0和F1、F2代乳汁中人乳铁蛋白表达均为阳性,表达量约在6～8g/L。Western Blot结果表明,转基因小鼠的乳汁中所表达的目的蛋白的分子量大小约为60kDa,小于(本文来源于《扬州大学》期刊2006-05-01）
朱婧,梁克明,童德文,陈苏民,窦忠英[8]（2005）在《西农萨能奶山羊β酪蛋白基因5′侧序列通用表达载体的构建》一文中研究指出目的:检测β酪蛋白基因5′侧序列的启动BglⅡ效果及构建真核表达载体pcDNA3.165.方法:采用SalⅠ和BamHⅠ对pMDT/65双酶切,得到6465bp的β酪蛋白基因5′侧序列;将启动子片段插入到XhoⅠ和BglⅡ双酶切后的pGL3Basic载体里;获得重组报告基因载体pGL3B65.瞬时转染西农萨能奶山羊原代培养的乳腺上皮细胞,检测β酪蛋白基因5′侧序列的启动效果.将β酪蛋白基因5′侧序列插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的XhoⅠ和BamHⅠ位点之间,从而获得载体pcDNA3.165.结果:长度为6465bp的β酪蛋白基因5′侧序列能有效地启动荧光素酶报告基因,并正确构建了真核表达载体pcDNA3.165.结论:克隆的β酪蛋白基因5′侧序列在转录水平上具有生物学功能,为进一步建立转基因动物乳腺生物反应器奠定了坚实的基础.(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2005年12期）
朱婧[9]（2005）在《西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因5’侧序列克隆和分析及乳腺特异性表达载体的构建》一文中研究指出乳腺生物反应器(Mammary G1and Bioreactor,MGB)是一种高效率蛋白质合成器官,它可以利用转基因动物的乳腺组织生产基因工程药用蛋白。采用基因工程技术在动物乳腺生产有药用价值的蛋白质和多肽,具有产量高、成本低和产品质量好等优点。目前常用的转基因动物有猪、羊、牛,它们的泌乳量大,活性蛋白的产量高,且乳液容易收集。因此,转基因动物乳腺生物反应器就像一座生产活性蛋白的药物工厂,能够源源不断地生产出人类所需的药用蛋白。本研究采用PCR 技术从西农萨能奶山羊基因组中扩增出?-酪蛋白基因5'侧序列。将该序列克隆入pMD18-T 载体,并对其进行序列测定,表明克隆得到西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因-4359-+2106bp 区,共6,465 bp 的序列。生物信息学分析显示:该序列与已公布的其它山羊β-酪蛋白基因序列具有极高同源性(96%~98%),包含有TATA启动子序列和HOXF、Oct-1、AP1、CEBP、STAT、NFKB、GR、ER、PR、ETS 等转录因子识别位点,该序列保留了β-酪蛋白第一内含子、第一外显子和第二外显子及其信号肽部分。将此6,465 bp 片段插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic 中,构建载体pGL3/B65。瞬时转染西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞,48 h 后检测显示,该5'侧序列具有启动子和增强子活性,对促乳素发生应答。随后将?-酪蛋白基因5'侧序列克隆到pcDNA3.1(-)中,构建了乳腺特异性表达载体pcDNA3.1-65。又将hBMP2 的cDNA,克隆到pcDNA3.1-65 中,构建了hBMP2 乳腺表达载体pcDNA3.1-65-hBMP2,转染原代培养的西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞,促乳素诱导48h 后,hBMP2 的免疫细胞化学染色呈阳性反应,荧光颗粒主要见于细胞浆内,呈弥漫及团状分布,胞核淡染,对照组的胞浆内染色颗粒消失或较弱。Western blotting显示,已转染pcDNA3.1-65-hBMP2 载体并经促乳素诱导的乳腺上皮细胞裂解液中hBMP2 蛋白条带明显存在,未经促乳素诱导则hBMP2 蛋白带明显减弱;而转染pcDNA3.1(-)、pcDNA3.1-65 载体的细胞在同样位置未见蛋白条带。相关研究结果如下:1.克隆了西农萨能奶山羊?-酪蛋白基因5'侧序列,共6,465bp 的片段, 所测序列已登录GenBank,GenBank Accession No. AY834229。用启动子和增强子捕获实验检测,证明所克隆的6,465bp 的序列具有启动子和增强子元件。2.利用该5'侧序列构建了乳腺特异性表达载体pcDNA3.1-65,并将hBMP2的cDNA片断克隆入该载体,初步用西农萨能奶山羊乳腺上皮细胞检测,证明该载体能受促乳素诱导而表达hBMP2,为进一步建立转基因动物乳腺生物反应器奠定了基础。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2005-06-01）
刘金龙,郑月茂,王玉洁,张涌[10]（2004）在《奶牛β-酪蛋白基因5′和3′调控区的克隆及序列分析》一文中研究指出利用普通及重组PCR技术克隆了奶牛β-酪蛋白基因(CSN2)5′调控成分(2826bp)和3′调控成分(620bp)。前者包括5′上游调控序列、第一外显子及部分第一内含子;后者主要包括最后一个不翻译的外显子和3′侧翼序列。纯化PCR产物通过pMD18-TVector亚克隆后测序并进行软件分析的结果表明,2个克隆片断与奶牛CSN2相应区域同源性分别为99.0%和98.0%,并且包含有全部的CSN2表达核心调控序列和多个转录、翻译因子的结合位点。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2004年02期）
酪蛋白基因侧序列论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
分别设计位于CSN3 5个外显子旁侧引物,采用DNA测序法对沼泽型和河流型水牛CSN3编码区结构进行了分析,并对10个水牛群体共106个样本CSN3第4外显子序列进行了变异检测。结果表明,两类水牛CSN3编码区由848个核苷酸组成,包括ORF序列573bp、5′-UTR序列69bp和3′-UTR序列206bp。在水牛CSN3第4外显子中共检测到4个SNP,其中c.445G>A,c.467C>T和c.516A>C为异义替换,导致相应的κ-CN成熟肽中氨基酸发生p.Val128Ile、p.Thr135Ile和p.Glu151Asp改变,c.467C>T和c.516A>C替换可能对κ-CN功能产生了影响。群体遗传分析表明,在河流型水牛中,等位基因c.445G、c.467C、c.471C和c.516A均为优势等位基因,而在沼泽型水牛中,仅c.445G、c.467C和c.471C为优势等位基因,河流型和沼泽型水牛的遗传差异主要体现在SNP516位点的群体遗传组成上。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酪蛋白基因侧序列论文参考文献
[1].黄亮,尚海彬,魏蕊,宁素恒,杜文斌.荷斯坦牛κ-酪蛋白基因5′和3′侧翼序列多态性研究[J].中国奶牛.2014
[2].祁宏,刘丽仙,袁峰,李大林,袁跃云.水牛κ-酪蛋白基因(CSN3)外显子4序列多态性研究[J].家畜生态学报.2012
[3].覃广胜,杨炳壮,黄加祥,张秀芳,陈明棠.水牛κ-酪蛋白外显子4基因的克隆及序列分析[J].畜牧与兽医.2010
[4].田甜,寨鸿瑞,陈玉珍,刘若余.奶牛β-酪蛋白基因的克隆及序列分析[J].贵州农业科学.2009
[5].张莉,李庆章,陈建晖,高学军,田雷.牛αS1-酪蛋白5′调控序列驱动人α-LA基因与LacZ基因在牛乳腺上皮细胞中的表达[J].生物化学与生物物理进展.2008
[6].田雷,李庆章,张莉.牛αS1酪蛋白5′调控序列驱动报告基因LacZ在奶山羊乳腺上皮细胞中的表达[J].中国生物化学与分子生物学报.2007
[7].张玉峰.增强子对提高山羊β-酪蛋白调控序列指导人乳铁蛋白基因在转基因动物乳腺中特异性表达水平的研究[D].扬州大学.2006
[8].朱婧,梁克明,童德文,陈苏民,窦忠英.西农萨能奶山羊β酪蛋白基因5′侧序列通用表达载体的构建[J].第四军医大学学报.2005
[9].朱婧.西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因5’侧序列克隆和分析及乳腺特异性表达载体的构建[D].西北农林科技大学.2005
[10].刘金龙,郑月茂,王玉洁,张涌.奶牛β-酪蛋白基因5′和3′调控区的克隆及序列分析[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2004
标签：荷斯坦牛; κ-酪蛋白(κ-CN)基因; PCR-SSCP;