Tβ4②蛋白基因工程菌发酵条件的优化研究

Tβ4②蛋白基因工程菌发酵条件的优化研究

论文摘要

通过正交实验对重组胸腺素β4②基因工程菌的发酵条件进行优化。选择温度、接种量、诱导剂浓度和诱导时机4因素,分别在3个水平上进行考察。结果显示影响Tβ4②菌体浓度的主次因素顺序:诱导时机>温度>诱导剂浓度>接种量,影响Tβ4②表达水平的主次因素顺序:诱导时机>接种量>温度>诱导剂浓度,最终确定最佳工艺参数为:诱导时机3 h,温度37℃,IPTG 0. 5 mmol/L,接种量5%,并在5 L发酵罐中进行验证,最终菌体得率为49 g/L,Tβ4②表达量达30%。

论文目录

  • 1 材料方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌株与试剂
  •     1.1.2 主要仪器
  •     1.1.3 培养基配方
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 菌种的活化
  •     1.2.2 摇瓶发酵
  •     1.2.3 发酵条件的优化
  •     1.2.4 菌体密度的测定
  •     1.2.5 重组蛋白表达量的测定
  •     1.2.6工程菌的中试发酵
  • 2 实验结果
  •   2.1 单因素试验
  •     2.1.1 接种量对Tβ4(2)菌体生长、表达的影响
  •     2.1.2 IPTG浓度对Tβ4(2)菌体生长、表达的影响
  •     2.1.3 IPTG诱导时机对Tβ4(2)菌体生长和蛋白表达的影响
  •     2.1.4 不同诱导持续时间对Tβ4(2)菌体生长和蛋白表达的影响
  •   2.2 多因素试验-正交试验
  •   2.3 验证发酵条件
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 田庄,王舒宁,张阔,李维娜,郝强,张存,李萌,张旺倩

    关键词: 胸腺肽,大肠杆菌,二串体,单因素,正交试验,摇瓶培养,发酵罐

    来源: 药物生物技术 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,一般化学工业

    单位: 肿瘤生物学国家重点实验室,空军军医大学药学系生物制药学教研室,空军军医大学基础医学院一大队三队

    分类号: Q78;TQ920.6

    DOI: 10.19526/j.cnki.1005-8915.20190501

    页码: 377-382

    总页数: 6

    文件大小: 734K

    下载量: 89

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