低氧微环境对P（3HB-co-4HB）与小鼠骨髓间充质干细胞共培养形成心肌补片影响的实验研究

论文摘要

目的探究低氧微环境对小鼠骨髓间充质干细胞（mouse bone marrow mesenchymal stem cells,m MSCs）与聚3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯[3-hydroxybutyrate-co-4-hydroxybutyrate,P （3HB-co-4HB）]材料共培养形成心肌补片的影响,为细胞移植术治疗心肌梗死提供一种更有效的心肌补片。方法全骨髓培养法提取小鼠骨髓间充质干细胞（m MSCs）,取5代m MSCs流式细胞术鉴定表面抗原。将P（3HB-co-4HB）与小鼠骨髓间充质干细胞共培养制作成细胞补片,随机分为常氧组和低氧组,每组各10个样本,0、12、24 h分别用CCK-8法测定细胞增殖情况;扫描电子显微镜（scanning electron microscope,SEM）观察补片存活、黏附、生长情况。加入诱导剂5-氮杂胞苷2周后,免疫荧光检测两组心肌肌钙蛋白T（c TnT）的表达情况。结果在共培养24 h后,CCK-8法测定低氧组OD值（0.349±0.038）显著大于常氧组（0.308±0.025）（n=10,P<0.05）,扫描电子显微镜观察到低氧组P（3HB-co-4HB）材料上细胞数量更多,细胞与材料之间的黏附牢固,细胞形态正常。免疫荧光显示低氧组c Tn T表达比常氧组更加显著。结论相对于常氧条件,低氧微环境可促进骨髓间充质干细胞在P（3HB-co-4HB）材料上的黏附、存活、增殖、分化,形成一种更有效的心肌补片。

论文目录

• 0 引言
• 1 材料及仪器
•   1.1 主要材料及试剂
•   1.2 主要仪器
• 2 实验方法
•   2.1 小鼠骨髓间充质干细胞的提取
•   2.2 骨髓间充质干细胞表面抗原的鉴定
•   2.3 P （3HB-co-4HB） 细胞补片的制作
•   2.4 CCK-8法测定细胞补片增殖
•   2.5 扫描电子显微镜观察细胞补片
•   2.6 免疫荧光检测心肌分化
•   2.7 统计学方法
• 3 实验结果
•   3.1 小鼠骨髓间充质干细胞光镜图片
•   3.2 流式细胞术鉴定细胞表型
•   3.3 CCK-8法测定细胞增殖
•   3.4 扫描电子显微镜观察细胞补片
•   3.5 光镜观察心肌分化
•   3.6 免疫荧光鉴定c Tn T表达
• 4 讨论
• 5 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 田琨,周帆,穆军升,伯平

关键词: 低氧微环境,心肌补片,心肌梗死

来源: 北京生物医学工程 2019年03期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科北京市心肺血管疾病研究所,解放军总医院第三医学中心超声科

基金: 国家自然科学基金(81870181),北京市朝阳区科技计划项目(CYSF1712)资助

分类号: R329.2

页码: 227-234

总页数: 8

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