苏云金芽胞杆菌以色列亚种论文-徐灵环

苏云金芽胞杆菌以色列亚种论文-徐灵环

导读:本文包含了苏云金芽胞杆菌以色列亚种论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:苏云金芽胞杆菌以色列亚种,sigK突变,芽胞形成,母细胞裂解

苏云金芽胞杆菌以色列亚种论文文献综述

徐灵环[1](2019)在《苏云金芽胞杆菌以色列亚种生产菌株Bt-59的sigK突变研究》一文中研究指出苏云金芽胞杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensis var.israelensis,Bti)是用于防治蚊、蚋等病媒生物的重要生物因子,但实际应用中存在毒力水平不够高、持效期短等问题。Sigma K(σK)因子在芽胞杆菌中能够控制芽胞形成、母细胞裂解等,同时通过Sigma(σ)因子间的级联调控,影响杀虫蛋白的形成。本文通过构建缺失σK因子的Bti突变菌株,研究了 sigK缺失对Bti生产菌株Bt-59的影响,为构建高毒力活性、持效期长的工程菌提供参考。主要研究结果如下:(1)构建了 Bt-59的sigK缺失突变菌株Bt59(△sigK):通过对Bt-59菌株全基因组测序分析,确定sigK基因的位于Genomel 05261,大小为714bp,编码237个氨基酸,与已报道的其他Bt亚种相似性均为100%。通过扩增sigK基因同源臂构建敲除载体pMADAsigK,电击转化Bt-59感受态菌株,筛选获得同源重组缺失sigK突变株Bt59(△sigK);克隆包含sigK基因及其启动子区域的1495 bp的片段PsigK-sigK,利用pHT315表达载体连接PsigK-sigK,转化突变株Bt59(△sigK)中构建获得sigK的恢复菌株 Bt59(HFsigK)。(2)明确了sig 突变对Bt-59菌株芽胞形成的作用:Bt59(△sigK)的营养期生长与原菌株Bt-59无明显差异,但培养后期观察不到芽胞的形成;而sigK基因恢复菌株Bt59(HFsigK)恢复了芽胞的形成,其总细胞数和芽胞数分别为4.64×107 CFU/mL 和 3.33×106 CFU/mL,与原菌株 2.43×106 CFU/mL 芽胞量相当,说明 sigK基因的缺失导致Bt-59菌株失去形成芽胞的能力。sigK缺失同时影响到Bti母细胞的裂解,使母细胞完全裂解时间从T25延长到T60,而Bt59(HFsigK)则又使细胞裂解速度恢复到原菌株水平。(3)分析了sig 突变对Bt-59杀虫蛋白形成和杀虫活性的影响Bt59(△sigX)培养后期能正常形成杀虫晶体蛋白,晶体形态及其大小未发生明显变化。SDS-PAGE检测结果表明,sigK突变影响了 Bt-59菌株中不同杀虫蛋白的表达量,Bt59(△sigK)中Cry4Aa/4Ba蛋白表达量提高了约1.67倍,Cyt1Aa蛋白提高了约1.21倍,而Cry1 1Aa蛋白的表达量无明显差异。生测结果表明,Bt59(△sigK)对淡色库蚊(Culexpipienspallens)的杀虫活性略微降低,而对白纹伊蚊(Aedesalbopictus)的杀虫活性则无明显影响。(4)sigK突变对Bt-59水解酶CwlC的影响:克隆并原核表达了 Bt-59菌株732 bp的cwlC片段,细胞壁裂解试验表明CwlC具有水解细胞壁活性。通过扩增617 bp cwlC启动子区域(PBcwIC)连接pHT304-18Z得到重组载体pHTPBcwlC,电击转化Bt59(△sigK)菌株中构建了 BcwlC-lacZ表达菌株Bt59(△sigK)(PBcwlc-lacZ)。lacZ活性测定发现在Bt59(△sigK)中没有转录活性,表明Bt-59 cwlC基因受sigK基因的控制。通过比较Bt库斯塔克亚种HD73母细胞裂解基因,Bt-59 CwlC能够恢复HD(△cwlC)的表型,说明Bt-59 CwlC具有水解功能。(本文来源于《扬州大学》期刊2019-06-01)

朱晓阳,闫建平,蔡全信,郑大胜,袁志明[2](2008)在《苏云金芽胞杆菌以色列亚种杀蚊幼晶体蛋白的定量分析》一文中研究指出苏云金芽胞杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis简称Bti)作为主要的微生物杀蚊剂,各种剂型的产品已经投放市场多年,而其产品质量的检测与控制,目前最有效的方法是生物测定。生物测定在很大程度上能够反映产品质量的好坏,在一定程度上代表产品野外应用的可能性。但是生物测定有误差大、耗时长、(本文来源于《中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要》期刊2008-06-01)

刘子铎,孙明,陈亚华,喻子牛,R[3](1999)在《苏云金芽胞杆菌以色列亚种20kDa蛋白质对CytA蛋白溶细胞作用的影响》一文中研究指出为了证明苏云金芽胞杆菌以色列亚种20kDe蛋白质对CytA蛋白溶细胞作用的影响, 根据20kDe蛋白质和cytA蛋白基因的核苷酸序列,用AMPLIFY程序设计了一套带有酶切位 点的引物,经PCR扩增分别获得了20kDe蛋白质和cytA蛋白基因。将其基因与表达载体 pUHE24连接并转化到大肠杆菌XLI和DHS 分别获得含20kDa蛋白质基因的克隆子 LZ29;含cytA基因的克隆子LZcytA和含有二者基因的重组子LZ20A.在IPTG诱导下,测定 了不同克隆株基因表达产物对大肠杆菌细胞生长的影响。结果表明:LZ20的细胞生长不受影 响;LZcytA的细胞被杀死;LZ20A的细胞生长也不受影响。这表明20kDa蛋白质基因与cytA 蛋白基因重组后,20kDa蛋白质基因表达产物可保护CytA蛋白对大肠杆菌的溶细胞作用,而 巳这种作用并不因不同大肠杆菌受体而改变。(本文来源于《遗传学报》期刊1999年01期)

刘子铎,孙明,喻子牛,A.Zaritsky[4](1997)在《苏云金芽胞杆菌以色列亚种P19,cytA和20kD蛋白质基因的相互作用》一文中研究指出为了弄清苏云金芽胞杆菌以色列亚种P19,cytA和20kD蛋白质基因之间的相互作用。我们把不同基因串联在一个操纵子上,分别获得不同克隆子。pLZ19A含有P19和cytA蛋白基因,在IPTG诱导下,cytA蛋白基因的表达产物可使大肠杆菌细胞致死,这意味着P19不能保护大肠杆菌来自cytA蛋白的溶细胞作用。把携带有苏云金芽胞杆菌核糖体结合位点的20kD蛋白质基因插到pLZ19A的HindⅢ位点,产生pLZf19-20-A和pLZr19-20-A重组子。在IPTG诱导下,不管20kD蛋白质基因是正向或是反向的,都能减轻大肠杆菌来自cytA蛋白的致死影响。然而反向20kD蛋白质基因的作用弱于正向,这可能是反向重组体表达低于正向的缘故。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊1997年03期)

郝延玉,石文华[5](1992)在《球形芽胞杆菌和苏云金杆菌以色列亚种两菌混合发酵液的灭蚊效果》一文中研究指出球形芽胞杆菌(Bacillus s phaericus简称B.S)、苏云金杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensisserotype H-14简称B.t.i)均用于灭蚊幼,已为大家所熟悉。但每种菌单独使用,各有其长处和短处,B.S对库蚊效果好,残效期长,但杀虫谱窄;B.t.i杀虫谱广,但残效期短。为(本文来源于《杀虫微生物》期刊1992-10-31)

苏云金芽胞杆菌以色列亚种论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

苏云金芽胞杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis简称Bti)作为主要的微生物杀蚊剂,各种剂型的产品已经投放市场多年,而其产品质量的检测与控制,目前最有效的方法是生物测定。生物测定在很大程度上能够反映产品质量的好坏,在一定程度上代表产品野外应用的可能性。但是生物测定有误差大、耗时长、

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

苏云金芽胞杆菌以色列亚种论文参考文献

[1].徐灵环.苏云金芽胞杆菌以色列亚种生产菌株Bt-59的sigK突变研究[D].扬州大学.2019

[2].朱晓阳,闫建平,蔡全信,郑大胜,袁志明.苏云金芽胞杆菌以色列亚种杀蚊幼晶体蛋白的定量分析[C].中国微生物学会《第二届全国农业微生物研究及产业化研讨会》和《第十一届全国杀虫微生物学术研讨会》暨《湖北省暨武汉市微生物学会和内蒙古微生物学会2008年会》论文摘要.2008

[3].刘子铎,孙明,陈亚华,喻子牛,R.苏云金芽胞杆菌以色列亚种20kDa蛋白质对CytA蛋白溶细胞作用的影响[J].遗传学报.1999

[4].刘子铎,孙明,喻子牛,A.Zaritsky.苏云金芽胞杆菌以色列亚种P19,cytA和20kD蛋白质基因的相互作用[J].农业生物技术学报.1997

[5].郝延玉,石文华.球形芽胞杆菌和苏云金杆菌以色列亚种两菌混合发酵液的灭蚊效果[C].杀虫微生物.1992

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