伊尼奥小单孢菌论文_许斐

导读:本文包含了伊尼奥小单孢菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:西索,尼奥,基因,抗生素,工程,糖苷,庆大霉素。

伊尼奥小单孢菌论文文献综述

许斐[1](2011)在《伊尼奥小单孢菌澄江变种次级代谢产物的研究》一文中研究指出伊尼奥小单孢菌是氨基糖苷类抗生素西索米星的产生菌。本实验目的是对伊尼奥小单孢菌澄江变种发酵液的次级代谢产物进一步分离纯化,希望能从中分离纯化得到具有新的结构或活性的化合物,并且进行结构分析和鉴定。本论文利用离子交换柱色谱、硅胶柱色谱和高效液相色谱等色谱分离手段,从伊尼奥小单孢菌澄江变种的发酵液中分离得到两个化合物。对其中的一个进行了初步结构分析,通过质谱、核磁共振等方法初步分析了它的结构,初步推测为氨基糖苷类抗生素66-40G。(本文来源于《福建医科大学》期刊2011-05-01)

曾志红,洪文荣,陈代杰,戈梅,罗敏玉[2](2007)在《伊尼奥小单孢菌2-脱氧蟹肌醇胺脱氢酶基因sisP的克隆与表达》一文中研究指出目的:克隆西索米星生物合成基因——2-脱氧蟹肌胺(DOIA)脱氢酶基因。方法:以庆大霉素生物合成基因簇(AY524043)中的DOIA脱氢酶基因gntP作为参考模板设计引物,从伊尼奥小单孢菌(Micromonospora inyoensis)中,通过PCR方法扩增参与西索米星生物合成的DOIA脱氢酶基因,经测序鉴定、序列分析,并通过表达载体对该基因进行异源表达。结果:PCR扩增到一条长约1 035 bp的条带,包含一个开放阅读框长1 023 bp,推测其编码含340个氨基酸残基的蛋白质(相对分子质量约36×103),与已报道的DOIA脱氢酶同源性很高,该基因在IPTG诱导下,在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)实现过量表达,表达产物的相对分子质量与预测值一致。结论:通过PCR技术从伊尼奥小单孢菌中克隆到参与西索米星生物合成基因——DOIA脱氢酶基因,命名为sisP,GenBank登录号为EU200975。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2007年22期)

洪文荣,陈代杰,刘靖,朱宝泉[3](2005)在《依尼奥小单孢菌抗性基因sisR的克隆研究》一文中研究指出从产西索米星的依尼奥小单孢菌中克隆高抗性新基因sisR ,借助计算机设计PCR引物 ,从西索米星的产生菌依尼奥小单孢菌的染色体DNA中 ,经PCR扩增获得DNA序列长度不等的DNA片段。将这些DNA片段克隆至pUC19载体质粒并导入大肠杆菌 ,从中筛选到 5个抗西索米星的转化子 (其中一个命名为sisR)显示对西索米星的高抗性 (超过 10 0 0 μg mL)。经DNA测序并通过互联网Blast比对 ,确认对该抗性负责的DNA片段是一个未见报道的新基因。(本文来源于《生物工程学报》期刊2005年01期)

洪文荣[4](2004)在《依尼奥小单孢菌原生质体融合育种及其分子生物学研究》一文中研究指出西索米星,临床上重要的的氨基糖苷类抗生素,属4,6—双取代2—脱氧链霉胺类抗生素,由依尼奥小单孢菌产生。本研究采用细胞融合和分子生物学技术对依尼奥小单孢菌进行研究。筛选到了西索米星高产菌种S96,并从中克隆到了西索米星高抗性基因sisR。 从产抗生素的伊尼奥小单孢菌T125的原生质体融合试验研究中得到了菌株S96,根据培养特征比较,其菌丝形态,斜面培养,碳源利用和浸没培养等特征均不同于出发菌株。菌株S96几乎不产生色素,不利用可溶性淀粉,不产生孢子。其浸没培养的优良特征是出发菌所没有的。 对菌株S96的培养特性进行了研究,应用正交试验和数理统计对发酵培养进一步优化,精选出一组适合于S96发酵生产的培养基配方。根据溶氧曲线,优化发酵工艺,获得了一套较适合于菌株S96的代谢曲线特性,按照该曲线特性进行调控,可使西索米星的中试生产水平接近于摇瓶的生产水平,西索米星最高发酵单位可达1600μg/ml。 从产西索米星的依尼奥小单孢菌中克隆高抗性新基因sisR。以grmA基因(来自产庆大霉素的绛红色小单孢菌的抗性基因)为模板,设计PCR引物,从西索米星的产生菌依尼奥小单孢菌的染色体DNA中,经PCR扩增获得了序列长度不等的DNA片段。将这些DNA片段克隆至pUC19载体质粒并导入大肠杆菌,从中筛选到5个抗西索米星的转化子,其中一个命名为pLY102(插入片段命名为LY102,含sisR基因),显示对西索米星的高抗性(超过1000μg/ml)。经DNA测序并通过互联网Blast比对,确认对该抗性负责的DNA片段是一个未见报道的新基因。 将全长为849bp的LY102片段克隆到pUC19/18载体上构建质粒,抗性基因sisR依靠它自带的启动子和核糖体位点(GGAGG)在大肠杆菌DH5α中表达。基因sisR的表达不受载体上lacZ启动子的控制,其转录是自动发生的。序列中含有两个开放阅读框(orf),对抗性负责需两个orfs协同作用。将预测的sisR基因的氨基酸序列与16SrRNA甲基化酶的氨基酸序列比对表明:与grmB(来自玫瑰小单孢菌甲基化酶基因)、grmA(绛红色小单孢菌甲基化酶基因)和sgm(来自兹昂小单孢菌的甲基化酶基因)的氨基酸序列有很高的同源性,依次为92%、87%和85%。(本文来源于《上海医药工业研究院》期刊2004-08-15)

洪文荣,石贤爱,林娟,程骥[5](2003)在《伊尼奥小单孢工程菌S_(96)深层优化培养特性研究》一文中研究指出目的 :伊尼奥小单孢工程菌S96的深层优化培养特性。方法 :借助于国内外学者的经验 ,并结合微生物生长和生产营养原理 ,粗筛出一组较合适的生产配方 ,然后应用正交试验和数理统计法 ,优化出适合于工程菌S96的发酵生产配方 ,其组成为 :淀粉 5 5 % ,黄豆粉 3 5 % ,K2 HPO40 0 4 % ,花生粉 1 5 % ,蛋白胨 0 3% ,葡萄糖 0 1% ,CoCl2 10r/ml,消沫剂适量。根据溶氧曲线 ,优化发酵工艺 ,获得一套较适合于工程菌S96的代谢曲线特性图 ,按照该曲线特性图进行调控 ,可使西索米星的生产水平接近于实验室生产水平 ,充分发挥了工程菌S96的抗生素生物合成潜力 ,达到了较为理想的效果。(本文来源于《中国药科大学学报》期刊2003年05期)

洪文荣,石贤爱,林娟,程骥[6](2003)在《伊尼奥小单孢工程菌S_(96)培养特性研究》一文中研究指出目的 :对伊尼奥小单孢工程菌S96的培养特性进行研究。方法 :采用单亲灭活原生质体融合技术 ,从伊尼奥小单孢菌融合的杂合体中筛选到的工程菌S96,根据培养特征比较 ,其菌丝形态特征 ,斜面培养特征 ,碳源利用特征和深层培养特征不同于出发菌株。结果 :工程菌S96几乎不产生色素 ,不利用可溶性淀粉 ,不产生孢子。但它在深层培养时 ,生长快 ,菌丝长 ,易成网 ,衰亡期大大推后 ,稳定期明显延长 ,可达 9d之久。结论 :工程菌S96的新特征是出发菌所没有的 ,是一株新的工程菌。(本文来源于《中国药科大学学报》期刊2003年02期)

Goldberg,S,L,廖爱芳[7](1992)在《伊尼奥小单孢菌产生的西索米星抗性基因克隆及其特性》一文中研究指出西索米星是一种广谱氨基糖苷类抗生素,对革兰氏阳性、阴性菌以及分枝杆菌有效。Reimann报道,西索米星具有拟叁糖结构,存在一个氨基环醇配基,α—脱氧链霉胺通过糖甙键与α—氨基—α—脱氧—D—葡萄糖和D—木糖相连。尽管西索米星的生物代谢途径未作详细研究,有人用西索米星阻遏突变株分析了突变合成产物和中间体,发现有至(本文来源于《国外医药(抗生素分册)》期刊1992年04期)

方金瑞,程振泰,陈永信,高悟岩,萨丹[8](1989)在《伊尼奥小单孢菌绿色变株产生庆大霉素B》一文中研究指出小单孢菌所产生的氨基环醇类抗生素已广泛地应用于临床。有关它们生物合成的研究也已展开,并提出了它们生物合成途径间相关性的轮廓,包括伊尼奥小单孢菌以庆大霉素A或X_2为前体生物合成西索米星的观点。 作者在诱变选育西索米星产生菌伊尼奥小单孢菌澄江变种(Micromonospora inyoensis var. denjiangensis)的过程中,原(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊1989年03期)

伊尼奥小单孢菌论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:克隆西索米星生物合成基因——2-脱氧蟹肌胺(DOIA)脱氢酶基因。方法:以庆大霉素生物合成基因簇(AY524043)中的DOIA脱氢酶基因gntP作为参考模板设计引物,从伊尼奥小单孢菌(Micromonospora inyoensis)中,通过PCR方法扩增参与西索米星生物合成的DOIA脱氢酶基因,经测序鉴定、序列分析,并通过表达载体对该基因进行异源表达。结果:PCR扩增到一条长约1 035 bp的条带,包含一个开放阅读框长1 023 bp,推测其编码含340个氨基酸残基的蛋白质(相对分子质量约36×103),与已报道的DOIA脱氢酶同源性很高,该基因在IPTG诱导下,在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)实现过量表达,表达产物的相对分子质量与预测值一致。结论:通过PCR技术从伊尼奥小单孢菌中克隆到参与西索米星生物合成基因——DOIA脱氢酶基因,命名为sisP,GenBank登录号为EU200975。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

伊尼奥小单孢菌论文参考文献

[1].许斐.伊尼奥小单孢菌澄江变种次级代谢产物的研究[D].福建医科大学.2011

[2].曾志红,洪文荣,陈代杰,戈梅,罗敏玉.伊尼奥小单孢菌2-脱氧蟹肌醇胺脱氢酶基因sisP的克隆与表达[J].中国新药杂志.2007

[3].洪文荣,陈代杰,刘靖,朱宝泉.依尼奥小单孢菌抗性基因sisR的克隆研究[J].生物工程学报.2005

[4].洪文荣.依尼奥小单孢菌原生质体融合育种及其分子生物学研究[D].上海医药工业研究院.2004

[5].洪文荣,石贤爱,林娟,程骥.伊尼奥小单孢工程菌S_(96)深层优化培养特性研究[J].中国药科大学学报.2003

[6].洪文荣,石贤爱,林娟,程骥.伊尼奥小单孢工程菌S_(96)培养特性研究[J].中国药科大学学报.2003

[7].Goldberg,S,L,廖爱芳.伊尼奥小单孢菌产生的西索米星抗性基因克隆及其特性[J].国外医药(抗生素分册).1992

[8].方金瑞,程振泰,陈永信,高悟岩,萨丹.伊尼奥小单孢菌绿色变株产生庆大霉素B[J].中国抗生素杂志.1989

论文知识图

重组质粒pLYsisP的构建巴龙霉胺与16SrRNAA部位解码区结合图...SDS碱裂解法与Kado法分离M·p(1, 2)M...sisP与来自M. echinospora的gntP碱基...pETsisP酶切鉴定电泳图二糖中心以及几个4,6-二取代脱氧链霉...

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