酶切鉴定论文_金科华,刘洁

导读:本文包含了酶切鉴定论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:质粒,鉴定,限制性,军团,载体,基因,链式反应。

酶切鉴定论文文献综述

金科华,刘洁[1](2015)在《质粒抽提策略对双酶切鉴定的影响》一文中研究指出目的探讨质粒抽提策略对质粒双酶切鉴定的影响。方法比较1.4 ml菌液单次抽提与分成两份0.7 ml和四份0.35 ml多次抽提的质粒双酶切后琼脂糖凝胶电泳图谱质量。结果小体积菌液多次抽提的质粒纯度逐步提高(p ET-28a和p ET-28a-G6PD的OD260/OD280值分别为1.36和1.45,1.65和1.70,1.75和1.78);酶切后琼脂糖凝胶电泳弥散逐步消失。结论控制菌液量对抽提高纯度质粒、获得理想的双酶切鉴定图谱至关重要。(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2015年06期)

金磊[2](2015)在《酶切法鉴定质粒的亚型》一文中研究指出商品化质粒小量抽提试剂盒制备的质粒DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测可见2条亮带,分别回收2条亮带,使用限制性内切酶分别消化,再用琼脂糖凝胶电泳检测,依据质粒的亚型(超螺旋、线性、开环)在以琼脂糖凝胶为介质的电场中的移动速度不同,鉴定出制备的质粒DNA电泳图中的2条亮带分别是超螺旋质粒和开环质粒。(本文来源于《生物学通报》期刊2015年01期)

陈平[3](2014)在《λ DNA酶切片段与pUC19克隆载体的构建与鉴定》一文中研究指出目的:构建λDNA片段/p UC19重组质粒并鉴定。方法:将克隆质粒p UC19和λDNA进行Hind III酶切、碱法提取质粒,琼脂糖凝胶电泳纯化鉴定、紫外分光光度测定,T4DNA连接酶切产物、冰Ca Cl2转化E.coli DH5α菌株使之成为感受态细胞、蓝白斑筛选法筛选并鉴定重组转化子。结果:1所提质粒p UC19电泳获得预期的3条带,经由标准DNA Markar比对准确,提取浓度满足酶切需要。2酶切质粒p UC19电泳获得预期的1条带,λDNA片段电泳获得的4条带,经由标准DNA Markar比对准确。3培养皿不同区域出现数量不等的蓝色、白色菌斑。结论:应用质粒p UC19可成功构建λDNA片段/p UC19重组质粒。经鉴定,该克隆载体能够导入菌株E.coli DH5α,转化效率较高。(本文来源于《生物技术世界》期刊2014年11期)

蒋超,黄璐琦,袁媛,陈敏,侯静怡[4](2014)在《酶切-熔解曲线分析:一种新的SNP分型方法及其在中药材鉴定中的应用》一文中研究指出单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)是一种重要的DNA分子标记,在中药真伪鉴定中有广泛应用。为寻找一种简单快速、稳定性好的SNP分型方法,本研究将限制性内切酶引入熔解曲线分析中,建立了一种新的SNP分型方法,并分别以金银花/山银花、白术/苍术叶绿体序列SNP位点为例,检测了位于或不位于内切酶识别序列区的SNP位点分型能力,结果表明在引物5'端加上长链GC夹子(cggcgggagggcgg)进行扩增,然后选择合适的限制性内切酶酶切,金银花或白术正品酶切产物熔解曲线均为双峰,而混淆品山银花或苍术均为单峰,可实现准确分型,且该方法简单快速、稳定性好,被命名为酶切-熔解曲线分析法(restriction endonuclease digest-melting curve analysis)。(本文来源于《药学学报》期刊2014年04期)

赵利伟,胡朝晖,陈文聪,顾全,朱庆义[5](2013)在《PCR-酶切技术快速鉴定军团菌》一文中研究指出【目的】建立一种新型的军团菌鉴定方法,并探讨该法在鉴定环境水源和临床标本军团菌菌株中的应用价值。【方法】根据军团菌16S rRNA基因保守序列设计引物,以分离培养得到的可疑军团菌菌株作为模板,采用PCR法对模板扩增,并用限制性内切酶对PCR产物进行酶切分析,建立一种嗜肺军团菌及非嗜肺军团菌的鉴定方法。对16株嗜肺军团菌、22株非嗜肺军团菌及12株其他细菌标准菌株进行检测,验证该方法的可靠性,最后用该法检测广州地区分离的169株可疑军团菌菌株并进行基因测序。【结果】该PCR方法检测嗜肺军团菌及非嗜肺军团菌所有标准菌株均为阳性,非军团菌检测结果均为阴性;进一步的HinfⅠ酶切分析可准确的区分嗜肺军团菌标准菌株;广州地区分离的169株可疑军团菌菌株经该法检测发现160株为军团菌,其中79株为嗜肺军团菌,与基因测序检测结果一致。【结论】PCR-酶切技术可快速、特异地检测军团菌及嗜肺军团菌,适用于环境水源和临床标本可疑军团菌菌株的检测。(本文来源于《微生物学通报》期刊2013年08期)

丁广洲,侯静,马凤鸣,陈丽,陈连江[6](2012)在《甜菜NADH-NR gDNA全长序列的克隆及酶切鉴定》一文中研究指出为了研究甜菜NADH-NR gDNA的序列特征,从分子水平上为甜菜硝酸盐累积差异机理的研究做铺垫;利用二倍体甜菜品种‘甜研7号’,采用分步克隆方法,分别获得甜菜NADH-NR基因组DNA的3’端序列和5’端序列以及中间序列,再以3’端和5’端序列设计特异引物,克隆获得甜菜NADH-NR基因组DNA的全序列;结果表明,甜菜NADH-NR gDNA全长序列6346bp,经与先前获得的甜菜NADH-NR cDNA序列比对,甜菜NADH-NR gDNA含有3个内含子,4个外显子。内含子大小分别为197、1088、2343bp。甜菜NADH-NR gDNA的外显子序列与菠菜的同源性达到78%,但内含子序列在进化期间发生了较大分化,甜菜NADH-NR gDNA的内含子相对菠菜要大,两者也不处于同样的位点,甜菜NADH-NR gDNA的内含子靠近5'端较早出现,每个内含子大小均是菠菜的1.10~1.71倍。本研究首次从甜菜中克隆获得NADH-NR gDNA全长序列,揭示了其序列特征并将其与其他作物进行了比较分析,为进一步利用该基因开展甜菜硝酸盐含量的基因调控研究奠定了基础。(本文来源于《农学学报》期刊2012年11期)

赵利伟,胡朝晖,宣瑞红,刘洋敏,朱庆义[7](2010)在《聚合酶链反应-酶切分型鉴定广州地区环境水源军团菌》一文中研究指出【目的】探讨聚合酶链反应-酶切分型在快速鉴定环境水源军团菌方面的应用价值,并了解广州地区环境水源军团菌的分布状况。【方法】对广州地区采集的44份环境水样,作军团菌分离培养,再对分离菌株进行16Sr DNA PCR-酶切分型鉴定、16S rDNA基因测序和mip基因测序鉴定。【结果】在广州地区环境水源分离的112株军团菌,经聚合酶链反应-酶切分型鉴定、16S rDNA基因测序和mip基因测序鉴定,检出嗜肺军团菌66株,非嗜肺军团菌46株,其中菲氏军团菌20株,戈氏军团菌17株,橡树岭军团菌7株,长滩军团菌2株。【结论】聚合酶链反应-酶切分型检测环境水源军团菌是一种简便、快速、特异的鉴定方法;在广州地区环境水源中普遍存在军团菌,主要是嗜肺军团菌,其次是菲氏军团菌,戈氏军团菌,橡树岭军团菌和长滩军团菌。(本文来源于《微生物学报》期刊2010年11期)

庞丹,王虹,尹楠林,杨晓亮,胥文春[8](2010)在《运用酶切自连法分析鉴定肺炎链球菌体内诱导基因》一文中研究指出肺炎链球菌是严重侵袭性感染和上呼吸道感染最重要的条件致病菌之一,分析鉴定体内诱导基因序列变得尤为重要。本研究利用酶切自连法成功从129个体内诱导表达的肺炎链球菌中获得13个融合重组自杀质粒,通过与肺炎链球菌株TIGR4基因组序列的同源性比对,共得到10个不同的体内诱导基因,其中8个是从血液中筛选出的,另2个为从肺组织中筛选出;通过分析得到18个开放阅读框,其中大部分为已知功能基因,参与细菌多种生命活动,有2个为未知功能基因,编码假想蛋白。可见,酶切自连法可有效用于筛选基因的分析鉴定。(本文来源于《生物技术通报》期刊2010年05期)

蒋常文,夏春波,徐雅娟,阳秋娣,刘源劼[9](2010)在《pTAT-XIAP重组表达载体的构建与酶切鉴定》一文中研究指出目的探索pTAT-XIAP融合表达载体的构建方法。方法在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-HA/XIAP融合表达载体,将pTAT-HA/XIAP质粒转化至DH5α感受态细胞,筛选培养转化成功的单克隆,NcoI/XhoI双酶切后琼脂糖电泳鉴定。结果转化pTAT-HA/XIAP质粒的DH5α在含氨苄青霉素的LB固体培养基上呈分散菌落生长。电泳结果显示重组pTAT-HA/XIAP质粒约4500bp,酶切后可观察到PTAT-HA质粒约3000bp,XIAP目的基因条带1494bp,pTAT空质粒约3000bp,条带大小与质粒图谱一致。结论将大鼠XIAP基因成功插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,提取的质粒可用于下游分子生物学实验。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2010年08期)

郝旭光,孙寓姣,王红旗[10](2010)在《PCR-酶切技术在石油烃降解菌筛选鉴定中的应用》一文中研究指出将以原油驯化所得的纯培养微生物菌株作为模板,采用PCR(聚合酶链式反应)法,用扩增细菌16S rDNA的一对通用引物(8 f,1492 r)对模板扩增,并用限制性内切酶R saI和M spI对PCR产物进行ARDRA多态性分析。聚类去除重复菌株后60株菌株可分为11种不同分类操作单元(OTU),同时得出每个分类操作单元的数量。实验结果表明,此方法可快速去除重复菌株并反映出菌株间的系统进化关系;同时实验数据可构建成库,使后续分离菌株的筛选工作只需比对数据即可完成。(本文来源于《环境工程学报》期刊2010年02期)

酶切鉴定论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

商品化质粒小量抽提试剂盒制备的质粒DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测可见2条亮带,分别回收2条亮带,使用限制性内切酶分别消化,再用琼脂糖凝胶电泳检测,依据质粒的亚型(超螺旋、线性、开环)在以琼脂糖凝胶为介质的电场中的移动速度不同,鉴定出制备的质粒DNA电泳图中的2条亮带分别是超螺旋质粒和开环质粒。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

酶切鉴定论文参考文献

[1].金科华,刘洁.质粒抽提策略对双酶切鉴定的影响[J].山西医科大学学报.2015

[2].金磊.酶切法鉴定质粒的亚型[J].生物学通报.2015

[3].陈平.λDNA酶切片段与pUC19克隆载体的构建与鉴定[J].生物技术世界.2014

[4].蒋超,黄璐琦,袁媛,陈敏,侯静怡.酶切-熔解曲线分析:一种新的SNP分型方法及其在中药材鉴定中的应用[J].药学学报.2014

[5].赵利伟,胡朝晖,陈文聪,顾全,朱庆义.PCR-酶切技术快速鉴定军团菌[J].微生物学通报.2013

[6].丁广洲,侯静,马凤鸣,陈丽,陈连江.甜菜NADH-NRgDNA全长序列的克隆及酶切鉴定[J].农学学报.2012

[7].赵利伟,胡朝晖,宣瑞红,刘洋敏,朱庆义.聚合酶链反应-酶切分型鉴定广州地区环境水源军团菌[J].微生物学报.2010

[8].庞丹,王虹,尹楠林,杨晓亮,胥文春.运用酶切自连法分析鉴定肺炎链球菌体内诱导基因[J].生物技术通报.2010

[9].蒋常文,夏春波,徐雅娟,阳秋娣,刘源劼.pTAT-XIAP重组表达载体的构建与酶切鉴定[J].中国老年学杂志.2010

[10].郝旭光,孙寓姣,王红旗.PCR-酶切技术在石油烃降解菌筛选鉴定中的应用[J].环境工程学报.2010

论文知识图

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