拟穴青蟹原肌球蛋白抗原表位适配体小肽的筛选与鉴定

拟穴青蟹原肌球蛋白抗原表位适配体小肽的筛选与鉴定

论文摘要

目的筛选对拟穴青蟹过敏原原肌球蛋白(tropomyosin,TM)抗原表位具有特异性结合能力的适配体小肽,并鉴定适配体小肽对TM的免疫结合活性的抑制作用。方法采用ExPASy peptide cutter软件预测TM分子中胰蛋白酶酶切位点,结合TM线性表位设计反义小肽,经AutoDock 4.0软件模拟分子对接,筛选得到适配体小肽。采用抑制性ELISA的方法,检测筛选的适配体小肽对TM与特异性IgG抗体结合活性的抑制作用。结果 TM氨基酸序列中有25个胰蛋白酶酶切位点,设计TM的31条反义小肽,利用分子对接筛选得到12个适配体小肽。抑制性ELISA结果显示,12条适配体小肽均能明显抑制TM与IgG抗体的特异性结合,其中适配体小肽5抑制能力最强,其抑制率为36.2%。结论通过分子对接筛选得到能明显抑制TM免疫结合活性的适配体小肽,为降低TM致敏性的研究提供理论参考。

论文目录

  • 1 引言
  • 2 材料与方法
  •   2.1 样品与材料
  •   2.2 仪器与试剂
  •   2.3 实验方法
  •     2.3.1 TM胰蛋白酶酶切位点的预测
  •     2.3.2 反义小肽三维结构的获得
  •     2.3.3 TM与反义小肽的分子对接
  •     2.3.4 适配体小肽对TM免疫结合活性的抑制作用分析
  • 3 结果与分析
  •   3.1 TM的胰蛋白酶酶切位点预测
  •   3.2 TM反义肽链的获得
  •   3.3 反义小肽三维结构的绘制
  •   3.4 TM与反义小肽的分子对接
  •   3.5 适配体小肽对纯化TM免疫结合活性的抑制作用
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 梅雪娇,李梦思,杨阳,刘萌,刘红,韩欣宇,曹敏杰,刘光明

    关键词: 原肌球蛋白,线性表位,反义肽,分子对接,适配体小肽

    来源: 食品安全质量检测学报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 集美大学食品与生物工程学院厦门市海洋功能食品重点实验室福建省海洋功能食品工程技术研究中心,厦门华厦学院环境与公共健康学院

    基金: 国家自然科学基金项目(31871720)~~

    分类号: TS201.2

    页码: 1790-1796

    总页数: 7

    文件大小: 5487K

    下载量: 135

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