雨生红球藻多糖的分离纯化和免疫活性组分鉴定

论文摘要

以虾青素提取后的雨生红球藻渣为原料,在体外免疫细胞模型活性跟踪下,对超声辅助提取的雨生红球藻粗多糖（Haematococcus pluvialis polysaccharide,HPP）采用DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析和Sephacryl S400葡聚糖凝胶柱层析进行分离纯化,使用高效凝胶渗透色谱法测定各组分多糖分子质量。结果表明:HPP经DEAE-52柱层析分离得到HPP-c1、HPP-c2、HPP-c3、HPP-c4和HPP-c5五个多糖组分,其中HPP-c3免疫活性较好且含量最高;HPP-c3经Sephacryl S400柱层析分离得到HPP-c3-s1、HPP-c3-s2和HPP-c3-s3,其中HPP-c3-s1在0～250μg/mL质量浓度范围内极显著刺激小鼠脾细胞的增殖（P<0.01）,并呈现剂量效应,最高刺激指数达1.34,高于HPP-c3-s2和HPP-c3-s3。经纯度鉴定,HPP-c3-s1为均一多糖,分子质量为23 413 kDa。研究结果可为雨生红球藻的高值化综合利用提供有利指导。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 HPP的提取
•     1.3.2 HPP的分离纯化
•       1.3.2. 1 DEAE-52纤维素柱层析法
•       1.3.2. 2 Sephacryl S400凝胶柱层析法
•     1.3.3 HPP增强免疫活性的测定
•       1.3.3. 1 脾细胞悬液的制备
•       1.3.3. 2 接种培养
•       1.3.3. 3 MTT活性检测
•     1.3.4 HPP-c3-s1纯度和分子质量检测
•       1.3.4. 1 全波长扫描
•       1.3.4. 2 HPGPC法测定
•       1.3.4. 3 聚丙烯酰胺凝胶电泳法
•   1.4 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 利用DEAE-52纤维素柱层析对HPP进行分离纯化
•     2.1.1 HPP的DEAE-52纤维素柱层析洗脱曲线
•     2.1.2 HPP各多糖组分的HPGPC图谱
•     2.1.3 HPP各多糖组分单独刺激对小鼠脾细胞增殖的影响
•   2.2 Sephacryl?S400凝胶柱层析分离纯化
•     2.2.1 HPP-c3的Sephacryl?S400凝胶柱层析洗脱曲线
•     2.2.2 HPP-c3的各亚组分HPGPC图谱
•     2.2.3 HPP-c3的各亚组分单独刺激对小鼠脾细胞增殖的影响
•   2.3 HPP-c3-s1的纯度和分子质量
•     2.3.1 HPP-c3-s1的全波长扫描分析
•     2.3.2 HPP-c3-s1的纯度和分子质量检测
•     2.3.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定纯度
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘涵,张苗,刘晓娟,曹庸

关键词: 雨生红球藻,多糖,分离纯化,免疫活性

来源: 食品科学 2019年02期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工

单位: 华南农业大学食品学院广东省功能食品活性物重点实验室广东省天然活性物工程技术研究中心

基金: 广州市科技计划项目(201707010035),广东省自然科学基金项目(2017A030313150),国家自然科学基金青年科学基金项目(31401481)

分类号: TQ281

页码: 52-58

总页数: 7

文件大小: 2008K

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