牛源荚膜血清型A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及其种特异性基因的序列分析

论文摘要

从病死牛组织中分离到4株致病菌,编号分别为P1、P2、P3、P4。经菌落形态学观察、培养特性、生化反应和小鼠毒力试验,初步鉴定为多杀性巴氏杆菌。参考多杀性巴氏杆菌16S rRNA和种特异性kmt1基因以及荚膜血清型基因A(capA)、B(capB)、D(capD)、E(capE)和F(capF)合成引物,利用多重PCR扩增16S rRNA、kmt1和荚膜血清型基因,对PCR产物测序并进行同源性分析。结果显示,P1～P4都扩增出了16S rRNA、kmt1和荚膜血清型A型基因的特异性目的条带;P1～P4的16S rRNA、kmt1、A型基因序列与Genbank数据库中的多杀性巴氏杆菌相应序列具有高度同源性(>99.0%);P2、P3、P4间的16S rRNA基因同源性较高(>99.0%),而P1与其它3株(P2～P4)同源性较低,P1～P4间的kmt1基因、荚膜血清型A型的同源性较高(>99.0%)。说明本次分的4株病原菌P1～P4均为荚膜血清型A型多杀性巴氏杆菌。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 待检材料
•   1.2 主要试剂和设备
•   1.3 试验动物
•   1.4 引物合成
•   1.5 病料触片镜检
•   1.6 病料接种试验动物
•   1.7 病原分离培养
•   1.8 生化鉴定
•   1.916S rRNA、kmt1和荚膜血清型基因多重PCR扩增及测序
• 2 结果
•   2.1 病料镜检结果
•   2.2 动物试验结果
•   2.3 病原分离培养及菌落形态特征
•   2.4 生化鉴定结果
•   2.516S rRNA、kmt1和荚膜血清型基因多重PCR扩增结果
•   2.616S rRNA、kmt1、荚膜血清型A型基因同源性分析
•   2.716S rRNA与kmt1系统发育分析结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 阚威,王谢忠,李兆才,蔡金山,王文勇,马艳萍,韩蓉,周继章,王云平

关键词: 多杀性巴氏杆菌,荚膜,多重

来源: 中兽医医药杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,青海省动物疫病预防控制中心,青海省互助县动物疫病预防控制中心

基金: “西部之光”人才培养计划,国家重点研发计划(2017Y FD0501800)

分类号: S852.61

DOI: 10.13823/j.cnki.jtcvm.2019.04.005

页码: 18-22

总页数: 5

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