PPARα在雅安藏茶水提物降脂活性中的功能研究

论文摘要

为探讨雅安藏茶水提物调控PPARα水平及降脂的分子机制,构建pET32a-PTD-PPARα原核重组载体,表达具有进入细胞能力的PTD-PPARα融合蛋白,利用肝细胞L02构建高脂细胞模型. SDS-PAGE和Western blotting结果显示PTD-PPARα融合蛋白纯度及特异性较高,能自由进入L02细胞并降低L02高脂细胞中脂类沉积.L02高脂细胞模型经藏茶水提物处理24 h,油红O染色表明细胞脂类沉积显著降低,Western blotting表明PPARα蛋白水平显著增加,并具有浓度梯度依赖性.结果表明:藏茶水提物可能通过促进PPARα蛋白水平抑制脂类在细胞中沉积,调控脂类代谢.

论文目录

• 1 引 言
• 2 材料与方法
•   2.1 材 料
•     2.1.1 菌株、细胞株和质粒
•     2.1.2 试剂
•     2.1.3 PCR引物
•   2.2 方 法
•     2.2.1 藏茶水提物制备
•     2.2.2 两次PCR法获得PTD-PPARα基因
•     2.2.3 pET32a-PTD-PPARα原核表达载体的构建及鉴定
•     2.2.4 PTD-PPARα融合蛋白的诱导表达
•     2.2.5 目的蛋白的纯化与鉴定
•     2.2.6 Western blotting检测
•     2.2.7 细胞中脂类含量检测
• 3 结果与分析
•   3.1 藏茶水提物抑制细胞脂类沉积
•   3.2 藏茶水提物促进PPARα蛋白表达
•   3.3 PTD-PPARα融合蛋白载体构建及表达
•   3.4 PTD-PPARα融合蛋白的纯化和鉴定
•   3.5 PTD-PPARα融合蛋白的降脂活性测定
• 4 结 语

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 褚剑轲,曾茂,陈晓芳,李瑞,杜倩,王丹,郝军莉

关键词: 藏茶水提物,降脂活性,融合蛋白

来源: 四川大学学报(自然科学版) 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 成都医学院生物科学与技术学院

基金: 四川省教育厅项目(17ZA0102,16ZA0287),四川省卫生厅项目(16PJ103,18PJ586),国家大创项目(201513705009),成都医学院科研创新团队项目(CYTD16-04)

分类号: TS272.5;TS201.4

页码: 1177-1181

总页数: 5

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