半滑舌鳎源创伤弧菌分离鉴定与药敏试验

论文摘要

为查明引起河北省昌黎县某海水养殖场半滑舌鳎患病及死亡的病原菌,本研究从半滑舌鳎肝、脾、腮、肠道分离纯化得到1株优势菌株,对其进行了理化鉴定和16S rDNA序列分析、致病性试验、毒力基因检测和中西药的药敏试验。结果显示,分离菌为创伤弧菌（V.vulnificus）,序列比对显示与创伤弧菌同源性为100%,菌株命名为V.vulnificus QHD-1。动物回归试验证明该菌是半滑舌鳎的病原菌。小鼠半数致死量(LD50)为2.4×106 CFU/mL,携带毒力基因溶细胞素（vvhA）、细胞毒素（rtxA）、铁载体（viuB）、荚膜多糖（wza）等。西药药敏试验结果显示,分离菌株V.vulnificus QHD-1对氟苯尼考等7种药物敏感,对氧氟沙星等5种药物中敏;对头孢拉定、土霉素等6种药物耐药;中药药敏试验结果表明,苏木、诃子、乌梅、五倍子抑抑菌效果较好;最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）均为1.9～7.8 g/L;中药联合抑菌试验结果表明,黄芩和黄柏组合、五倍子和黄芩组合、乌梅和五倍子组合、艾叶和荆芥组合、板蓝根和黄芩组合对创伤弧菌表现协同作用。研究结果证明V.vulnificus QHD-1对鱼和小鼠具有较强的致病性,具有一定的公共卫生危害性;同时药敏试验结果为该地区鱼病的防治提供了依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病料
•   1.2 实验动物
•   1.3 主要试剂
•   1.4 中草药
•   1.5 临床症状和病理剖检变化
•   1.6 细菌的分离、纯化
•   1.7 菌落形态观察
•   1.8 染色镜检
•   1.9 生化鉴定
•   1.10 细菌的16S rDNA基因序列的PCR扩增、测序
•   1.11 致病性试验
•   1.12 毒力基因检测
•   1.13 药敏试验
•     1.13.1 西药药敏试验
•     1.13.2 中药药敏试验
• 2 结果
•   2.1 临床症状观察
•   2.2 细菌形态观察
•   2.3 生化鉴定试验结果
•   2.4 16S rDNA鉴定以及系统发育进化树的构建
•   2.5 致病性试验
•   2.6 毒力基因检测结果
•   2.7 药敏试验
•     2.7.1 西药药物敏感性试验
•     2.7.2 中药药物敏感性试验
•     2.7.3 中药联合使用试验
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王洪彬,朱利霞,吴同垒,任海,高桂生,张志强,史秋梅,靳晓敏

关键词: 半滑舌鳎,创伤弧菌,分离鉴定,药敏试验

来源: 中国兽医学报 2019年05期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室

基金: 国家自然科学基金青年基金资助项目(31502187),秦皇岛市科技局资助项目(201602A048,201602A341),河北科技师范学院海洋专项资助项目(2018HY007),农业部淡水渔业健康养殖重点实验室资助项目(ZJK201812),河北省科技师范学院海洋专项资助项目(2018HY007)

分类号: S852.61

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.05.18

页码: 912-918

总页数: 7

文件大小: 759K

下载量: 178