导读:本文包含了核酸探针论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:核酸,探针,纳米,光学,喹啉,病毒,显色。
核酸探针论文文献综述
于天晓,许红,韩彦洁,张瑶,王亚芳[1]（2019）在《核酸探针杂交及酶联显色方法定量检测微小RNA-21》一文中研究指出目的:建立一种基于核酸探针杂交及酶联显色的高灵敏方法,实现对微小RNA-21(miRNA-21)的定性和定量检测。方法:将生物素标记的miRNA-21捕获探针通过生物素-亲和素系统固定在96孔板上,当靶miRNA-21出现在反应体系中时,能够与固定在96孔板上的捕获探针结合。利用辣根过氧化物酶标记的DNA检测探针的催化和信号放大作用,催化底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺,使反应体系出现颜色变化,根据颜色变化对miRNA-21的浓度进行定性和定量分析。结果:通过考察方法的灵敏度、精密度、回收率可得该方法最低检测限可达0. 81 pmol·L-1,相对标准偏差均在7. 5%以下,回收率在78. 9%～119. 2%之间,结论:本研究建立了一种高通量显色分析方法,该方法能够高灵敏检测miRNA-21,且具有良好的灵敏度、重复性和回收率。(本文来源于《现代医学》期刊2019年07期）
孔秋月[2]（2019）在《核酸探针和PCR技术在食品检验中的运用》一文中研究指出随着科学技术的高速发展,人们对于食品安全问题越来越关注。加强对食品安全质量检测工作的重视,可以及时精准地检测在食品中存在的病毒与有害物质。基于此,本文主要对核酸探针和PCR技术在食品检验中的运用进行了简单的分析论述。(本文来源于《食品安全导刊》期刊2019年21期）
张聪,岳巧丽,陶丽霞,胡莹莹,李晨钟[3]（2019）在《基于核酸探针的光学传感方法和细胞成像研究》一文中研究指出许多疾病的特征在于各种生物分子表现出的异常活性,这些物质通常在细胞内外显示过表达现象,因此对其灵敏靶向识别可以提供诊断和治疗效用。由于基因诊疗和化学传感技术的发展,用于灵敏检测细胞内外生物化学物质的核酸探针突显优势。核酸探针可以在稳定进入细胞的同时,特异性地结合目标物质,通过光学方法检测或通过成像技术标识出来。本文综述了采用光学传感方法和成像技术,基于核酸探针检测生物分子的新进展。根据检测对象进行分类,概括分析了几个代表性体系:核酸序列、蛋白质和酶、化学物质和物理化学条件,并详细阐述其关键设计原理、灵敏度及样品检测等结果,同时指出了各类核酸探针的优缺点。(本文来源于《化学进展》期刊2019年06期）
杨晓雪[4]（2018）在《鸭乙型肝炎病毒核酸探针的制备与应用以及全基因组序列分析》一文中研究指出近年来我国临床上鸭乙型肝炎的危害日益加重。为了了解鸭乙型肝炎病毒在我国鸭群中的感染状态,建立一种特异性好、灵敏度高的适合大批量样本检测的方法,本试验将鸭乙型肝炎病毒(DHBV)C区的高度保守区域一段长423bp的序列克隆制成核酸探针。核酸探针的特异性试验结果表明,制备的核酸探针只与DHBV的DNA杂交成阳性,特异性高,敏感性试验结果表明,该探针对DHBV的最低检出(本文来源于《中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2018-11-21）
李鹏飞,张瑞华,宋莎莎,王玮,陈君豪[5]（2018）在《鸭源新型鹅细小病毒核酸探针的制备与应用》一文中研究指出近年来,我国大陆地区暴发了一种由新型鹅细小病毒(NGPV)感染引起的鸭"短喙侏儒综合征"的疫病。为了建立一种特异性好、灵敏度高适合临床大批量样本检测的方法,本试验将鸭源NGPV的VP3保守区域1段长390bp的序列克隆制成核酸探针。特异性试验结果表明,制备的该核酸探针特异性高,只与鹅细小病毒(GPV)反应;灵敏性试验结果表明,针对NGPV最低检出量约为6pg。应用该核酸探针对来自山东、江苏、安徽3省的87只疑患"短喙长舌-侏儒综合征"的樱桃谷肉鸭的870份组织脏器进行检测,结果个体阳性率为89.7%(78/87),检测的10种组织脏器中均有NGPV检出,说明该病毒对樱桃谷鸭具有广泛的组织嗜性。同时,利用PCR方法对采集的样品进行检测,比较发现与核酸探针法的阳性个体检出率及阳性个体检出符合率为100%。以上结果表明,制备的NGPV核酸探针特异性强,灵敏性高,适合不同来源的NGPV临床批量诊断和流行病学调查。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年11期）
薛骁[6]（2018）在《核酸探针和PCR技术在食品检验中的应用》一文中研究指出食品安全问题关系到公众的生命和健康,应当引起人们的足够重视。食品检测是确保食品安全的一道重要的保护墙。我国在食品检测中应用了很多生物检测技术。核酸探针和PCR技术就是较为有效的两种检测技术。笔者总结了这两种技术目前的应用情况,分析了这两种技术的优势和缺陷,对今后的创新应用方向提出了一些建议。期望能够对我国食品检验技术的进步起到促进作用。(本文来源于《中外企业家》期刊2018年31期）
刘正杰,张忠平[7]（2018）在《端粒酶专属性球形核酸探针用于肿瘤跨平台检测》一文中研究指出癌症是一种高发病率和高致死率的疾病,其共性是细胞不受控制生长和永生化。在活体条件下精确区分肿瘤细胞和正常细胞是癌症早期诊断、干预和治疗评估的基础性、关键性难题,其根本困难是肿瘤细胞异质多样性和缺乏真正通用标志物~([1-5])。本研究跨过不同肿瘤细胞的基因型和表型差异,直接针对肿瘤细胞不受控制生长和永生化共性的决定因素(端粒酶活性),设计了肿瘤细胞专属性成像的球形核酸探针,探针以金纳米颗粒为载体,表面负载大量特异性双链DNA。在端粒酶的催化作用下,探针能够释放荧光染料进入细胞质中,使肿瘤细胞发出荧光,从而达到肿瘤细胞的可视化检测。通过荧光信号的变化,实现了肿瘤细胞与正常细胞的精确区分、小鼠肿瘤的活体成像、裸眼可视化和组织切片鉴定等。研究结果表明,这种球形核酸探针可以实现肿瘤活体影像诊断和细胞级别的肿瘤精准手术,是一种理想的肿瘤精准手术导航造影剂。(本文来源于《第五届全国原子光谱及相关技术学术会议摘要集》期刊2018-09-20）
冯艳茹[8]（2018）在《氮杂环双光子荧光核酸探针的制备及其性质的研究》一文中研究指出双光子荧光核酸探针在DNA双光子荧光显微成像领域具有重要的应用前景。本文利用Vilsmeier甲酰化反应和哌啶催化下的羟醛缩合反应合成了8种喹啉基咔唑类双光子荧光核酸探针材料,其中7种未见报道。研究了它们在DMF中的电子跃迁吸收光谱、荧光发射光谱,计算了量子产率;采用脉宽为120 fs、波长为800nm和重复频率为1 kHz(Ti:蓝宝石激光器)的脉冲激光研究了双光子光学性质,测定了双光子诱导的荧光光谱、双光子吸收截面和活性吸收截面;研究了化合物作为核酸探针与小牛胸腺DNA在Tris-HCl-NaCl缓冲溶液中作用前后的电子跃迁吸收光谱、荧光发射光谱及双光子荧光发射光谱的变化。讨论了分子结构对化合物光学性质和DNA光开关效应的影响。通过化合物与单个碱基、核苷酸及DNA体外作用的电子跃迁吸收光谱、荧光发射光谱及圆二色谱变化,并利用Gaussian 09软件和含时密度泛函理论方法计算了探针分子在水中及非水环境的电子跃迁能级,讨论了在DNA作用下化合物光学性质改变的原因,探讨了探针分子与DNA融合机理。利用莱卡DMI3000B倒置显微镜和卡尔蔡司Carl Zeiss LSM710激光扫描共聚焦显微镜开展了化合物染色3T3细胞后的生物荧光成像研究。通过与商用细胞核染色剂Hochest 33342的共染色成像实验,研究了化合物作为荧光核酸探针的细胞膜渗透能力和核定位水平;通过400 nm和800 nm光激发下的荧光成像研究了双光子成像的优势;通过激光分层扫描技术拍摄不同照射深度的细胞成像图研究了化合物作为双光子探针的单细胞叁维成像能力;利用延时激光持续辐照研究了化合物作为探针染色细胞后的双光子荧光强度随时间的变化趋势、荧光持续时间、荧光衰减幅度和平均荧光衰减速率,讨论了分子结构对化合物光稳定性的影响;发现化合物具有较低的荧光漂白作用,较高的双光子荧光的稳定性。分子中引入双臂的喹啉阳离子基团、喹啉邻位乙烯基取代和碘甲烷盐化可有效地增强化合物的双光子细胞成像的稳定性。活性双光子吸收截面较大的化合物其荧光衰减速率较低。利用MTT法研究了化合物作为生物探针的细胞毒性。(本文来源于《黑龙江大学》期刊2018-09-15）
唐永琼[9]（2018）在《基于功能化核酸探针的设计及其在生化检测中应用的研究》一文中研究指出癌症,是恶性肿瘤的代表,严重危害着人类的生命健康。随着生物传感技术的发展,人们开始从分子水平上去研究癌症的生理和病理机制,以期用于癌症的早期诊断和治疗。核酸探针作为一种重要的分子探针,因其具有易合成、易修饰、设计灵活、性质稳定和易功能化等优点,被广泛地用于肿瘤基因诊断研究。此外,核酸探针还具有组装可控、生物相容性、低细胞毒性等特性,常被用于构建各种DNA纳米结构用于肿瘤细胞成像和药物输送。然而,核酸探针在肿瘤基因诊断等领域依然存在许多有待解决的问题,例如灵敏度低、选择性差、分析速度慢、实验背景高等。为解决以上问题,本论文成功开发了几种功能核酸探针,并借助核酸工具酶、纳米金以及信号放大技术,构建了各种新型、高效的生物分析方法。实验结果表明,本论文构建的生物分析方法在肿瘤基因检测等领域具有潜在应用。首先,基于回文序列自杂交的特性,设计了一个回文双分子探针,并结合等温链置换扩增技术,构建了一种超灵敏的荧光传感系统用于检测原癌基因K-ras。该传感系统借助荧光光谱仪进行表征,在目标基因K-ras浓度范围为10 pM-150nM,体系荧光强度与目标基因K-ras的浓度具有良好的线性关系,检测下限可达10 pM。此外,该传感系统能够快速、准确的辨别K-ras基因的野生型与突变型,表现出良好的单碱基突变检测能力。其次,我们充分利用纳米金的荧光淬灭作用,结合等温链置换扩增技术,构建了一种链杂交信号放大系统用于抑癌基因p53的快速、灵敏检测。在该传感体系中,由于荧光基团靠近纳米金表面,荧光基团的荧光被纳米金淬灭。当有目标基因存在时,因发夹探针与目标基因杂交形成刚性双链,迫使荧光基团离开纳米金表面,被淬灭的荧光信号恢复。该检测方法设计的原理简单、分析速度快、背景信号低、选择性好、灵敏度高,可检测5 pM浓度的目标基因。此外,实际样品的检测结果也令人满意。最后,我们以I-motif序列作为识别元件,利用DNA纳米结构的优异性能,构建了一种DNA六面体纳米结构用于体外p H值的检测。本论文构建的纳米结构合成方法简单,原料易得,因其具有一定的空间构型,能有效地减慢核酸酶对纳米结构的降解速度。此外,I-motif序列还能对不同的pH值快速进行响应。因此,本实验构建的纳米结构有望用于检测细胞内pH值并进行细胞成像。(本文来源于《江西师范大学》期刊2018-06-01）
赵海燕[10]（2018）在《新型功能化核酸探针的设计及生物传感应用》一文中研究指出生物传感与生物分析是通过特定的生物识别元件和信号转导方式将目标物的识别转换为可测量的信号报告出来,进而实现生物分子含量或功能的评估,不仅推进了分析化学与生命科学的科学研究,而且大大的推动了以分子特征变化为基础的临床诊断的发展。由于具有多元化的识别机制、灵活的信号转导和信号输出方式,一系列多重功能化的核酸探针已经被构建,并在生物传感与生物分析领域得到了广泛的应用。在众多信号输出方式中,荧光信号由于灵敏性高以及便于细胞内生物分子的原位分析而受到研究者们的重视。本论文致力于基于新型功能化核酸探针的设计及其荧光生物传感应用,通过对已经报道的核酸探针进行总结,发现随着核酸探针的深入应用,逐渐的暴露出了一些不足和新的挑战:1)如何克服需要荧光团和淬灭团双重标记或染料的非特异性吸附引起的假阳性响应;2)如何避免一个传感系统中需要设计多个核酸探针及伴随的非特异性扩增问题;3)如何满足复杂体系中痕量生物分子的分析,尤其是单细胞水平的分析;4)如何构建活细胞内生物分子响应的逻辑分析平台,用于不同表型癌细胞的准确分型?本论文基于以上问题和挑战,开发了一系列新型的功能化核酸探针,并将其用于疾病相关的DNA片段、DNA甲基转移酶活性和活细胞内的mRNA的逻辑分析以及不同表型的癌细胞识别。论文主要分为以下五章内容:第一章为绪论部分,主要总结和概述了经典的核酸探针、基于核酸扩增的核酸探针以及基于微/纳米材料的核酸探针的设计原理及应用,并在此基础上总结了现阶段核酸探针在生物传感与生物分析领域内存在的问题和新的挑战。第二章,构建了一种DNA稳定的银纳米簇(DNA/Ag NCs)荧光探针用于免标记的核酸检测的新方法。首先设计了一个含有目标DNA识别序列和富含G碱基序列的发夹探针,该发夹探针与目标DNA杂交后形成3'平端的双链DNA。随后,该双链DNA在ExoⅢ的作用下逐步水解,释放出目标DNA和富含G碱基的序列,释放的目标DNA触发新一轮的反应实现目标物的循环放大,从而释放更多的富含G碱基的序列。最后,释放的大量的富含G碱基的序列与加入的DNA/Ag NCs荧光探针杂交,产生增强的荧光信号用来检测。本工作中DNA/Ag NCs荧光探针能够避免复杂的荧光团标记过程,同时杂交诱导的荧光增强能够降低非特异性吸附引起的假阳性响应。方法对HIV-1 DNA的检出限是2.9 × 10-10 mol L-1,并且对错配的目标序列表现出良好的区分能力。此外,本方法在血清及细胞裂解液等复杂体系中具有满意的回收率,表明具有在实际的生物样品中测定的潜力。第叁章,构建了一种目标物保护的哑铃分子探针(D-probe)介导的级联滚环扩增(CRCA)策略用于DNA甲基转移酶活性灵敏、准确检测。本方法中设计的D-probe兼具目标物识别、信号转导和扩增以及信号输出的功能。首先,D-probe能够作为DNA甲基转移酶和内切酶的酶联识别探针,用来区分甲基化和未甲基化的分子探针。随后,甲基化保护的完整的D-probe能够作为CRCA的环状模板进行扩增。最后,CRCA的进行产生大量的D-probe复制体,这些复制体能够与多分子标记的Sybr Green Ⅰ(SGI)染料结合,产生协同放大的荧光信号用于检测。与已报道的基于双链或发夹DNA分子探针相比,本方法具有以下的特点:(1)D-probe同时作为DNA甲基转移酶和内切酶的识别探针、CRCA的模板和信号探针避免了多个探针设计的需要。(2)一旦未甲基化的D-probe被内切酶切为两部分,CRCA能够被有效的阻止,因此降低了非特性的扩增。(3)CRCA和多分子标记的SGI的协同放大作用能够保证DNA甲基转移酶活性分析灵敏度的提高。(4)DNA甲基转移酶和内切酶的酶联识别之后,D-probe能够直接的进行CRCA。这种更直接的检测模式会实现更简单和灵敏的DNA甲基转移酶活性分析。本方法具有出色的特异性和灵敏性,检测限低至0.0024 U/mL,在定量监测DNA甲基转移酶活性和相关的抗癌药物的筛选中具有潜在的应用价值。第四章,构建了一种单个集成化磁性微探针策略用于单细胞水平的人类甲基转移酶活性(Dnmt1)的灵敏准确分析。单个集成化的磁性微探针是由功能化的双链DNA和单个磁性微球构建的。功能化的双链DNA设计有半甲基化的DNA位点用于Dnmt1识别,单链的尾巴用于触发原位的滚环扩增(RCA)。在Dnmt1的作用下,半甲基化的双链DNA能够被催化成为完全甲基化的双链DNA,进而能够保护其免于BssHII内切酶的切割。但是,没有被催化成完全甲基化的双链DNA会被BssHII内切酶切成两部分,致使单链尾巴脱离单个集成化的微探针。随后,在DNA连接酶和聚合酶的作用下,可以在微球表面进行完全甲基化保护的原位RCA,扩增后的产物可以将大量的信号探针结合到单个集成化的微探针,实现放大的信号的累积。最后,通过荧光共聚焦显微镜读取单个集成化的微探针的荧光信号实现Dnmt1活性的评估。在本工作中,单个集成化的磁性微探针被赋予了整合的功能,包括目标物识别、信号放大、信号累积和基质分离。因此,该方法能够实现低至0.007 U/mL的Dnmt1的检测,同时也实现了多种细胞裂解液内Dnmt1活性的分析,乃至单细胞水平的分析。此外,也评估了 RG108对Dnmt1的活性抑制。结果表明这种基于单个集成化的磁性微探针的策略对于Dnmt1活性的灵敏检测和抗癌药物的筛选具有一定的参考价值。第五章,基于可编程的DNA-AuNPs球型核酸探针的设计,开发了细胞内mRNA响应的DNA计算平台,实现了细胞内EMT相关mRNA和癌症相关mRNA的原位成像分析及不同表型癌细胞的识别和区分。上皮间质转化(EMT)是癌细胞转移时伴随的由具有极性的上皮细胞转化为运动侵袭能力更强的间质型细胞的现象和过程。EMT转化在分子层面上表现为上皮型标志物表达水平降低,间质型标志物表达水平升高。EMT相关mRNA在不同表型的细胞中的表达水平不同,可用于不同表型细胞的识别。C-myc是一种有效的肿瘤发生的激活剂,与多种肿瘤的发生和发展密切相关,在癌细胞(如乳腺癌)中过表达,正常细胞中不表达或低表达,可用于癌细胞和正常细胞的区分。因此本工作以EMT相关mRNA和C-myc mRNA作为细胞内DNA计算的输入,通过YES门DNA-AuNPs球型核酸探针的构建验证相关mRNA的表达水平,然后通过两种mRNA的逻辑分析(如AND门)的成像结果实现不同表型乳腺细胞的鉴定,对于CTCs内mRNA的成像、CTCs表型的识别和肿瘤异质性的分析具有一定的应用潜力。第六章为结论部分,主要总结了本论文的创新点。(本文来源于《山东大学》期刊2018-05-31）
核酸探针论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
随着科学技术的高速发展,人们对于食品安全问题越来越关注。加强对食品安全质量检测工作的重视,可以及时精准地检测在食品中存在的病毒与有害物质。基于此,本文主要对核酸探针和PCR技术在食品检验中的运用进行了简单的分析论述。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核酸探针论文参考文献
[1].于天晓,许红,韩彦洁,张瑶,王亚芳.核酸探针杂交及酶联显色方法定量检测微小RNA-21[J].现代医学.2019
[2].孔秋月.核酸探针和PCR技术在食品检验中的运用[J].食品安全导刊.2019
[3].张聪,岳巧丽,陶丽霞,胡莹莹,李晨钟.基于核酸探针的光学传感方法和细胞成像研究[J].化学进展.2019
[4].杨晓雪.鸭乙型肝炎病毒核酸探针的制备与应用以及全基因组序列分析[C].中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集.2018
[5].李鹏飞,张瑞华,宋莎莎,王玮,陈君豪.鸭源新型鹅细小病毒核酸探针的制备与应用[J].中国兽医学报.2018
[6].薛骁.核酸探针和PCR技术在食品检验中的应用[J].中外企业家.2018
[7].刘正杰,张忠平.端粒酶专属性球形核酸探针用于肿瘤跨平台检测[C].第五届全国原子光谱及相关技术学术会议摘要集.2018
[8].冯艳茹.氮杂环双光子荧光核酸探针的制备及其性质的研究[D].黑龙江大学.2018
[9].唐永琼.基于功能化核酸探针的设计及其在生化检测中应用的研究[D].江西师范大学.2018
[10].赵海燕.新型功能化核酸探针的设计及生物传感应用[D].山东大学.2018
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