三七多糖的微生物发酵提取工艺优化及其抗炎功效评价

三七多糖的微生物发酵提取工艺优化及其抗炎功效评价

论文摘要

以三七粉为原料,采用微生物发酵法发酵三七,得到的三七发酵液多糖进行纯化并研究其抗炎功效。选定三七多糖的提取得率为衡量指标,采用单因素试验和正交试验优化三七多糖发酵提取工艺,结果表明,三七多糖的最佳发酵提取工艺为:液料比50∶1(mL/g)、接菌量为5%、温度为32℃、pH值为中性7,此时多糖提取得率最高,达到0.501 g(多糖)/g(原料)。通过噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法毒性试验检测发酵多糖对HacaT细胞的增殖作用及安全浓度范围,同时在安全范围内用不同浓度发酵三七多糖培养HacaT细胞,最后选择0.5 g/L的发酵三七多糖为最终浓度,考察不同时间处理对炎症细胞因子表达量的影响:发酵三七多糖对白细胞活化因子CSF2、CSF1的表达,胞内信号负调节因子TNF-AIP3的表达、CXCl3、TNF-AIP3基因的表达均有抑制作用;对IL6的表达为促进作用,对CCL20、IL8(CXCL8)的表达为先促进再抑制作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 试验方法
  •     1.3.1 总糖含量的测定
  •     1.3.2 还原糖含量测定
  •     1.3.3 多糖含量测定
  •     1.3.4 高效食用级黄酒酵母的培养
  •     1.3.5 微生物发酵法提取三七多糖单因素试验
  •       1.3.5. 1 液料比单因素试验
  •       1.3.5. 2 时间单因素试验
  •       1.3.5. 3 温度单因素试验
  •       1.3.5. 4 接菌量单因素试验
  •     1.3.6 三七多糖提取得率
  •     1.3.7 微生物发酵法提取三七多糖正交试验
  •     1.3.8 三七发酵液多糖制备
  •     1.3.9 细胞培养
  •       1.3.9. 1 细胞复苏
  •       1.3.9. 2 细胞传代
  •       1.3.9. 3 MTT法测定HacaT细胞毒性试验
  •       1.3.9. 4 三七多糖溶液对细胞进行不同时间培养
  •     1.3.1 0 细胞总RNA提取与转录
  •     1.3.1 1 引物及探针的设计和合成
  •     1.3.1 2 实时荧光PCR
  • 2 结果
  •   2.1 发酵法提取三七多糖单因素试验结果
  •     2.1.1 液料比对三七多糖提取的影响
  •     2.1.2 时间对三七多糖提取的影响
  •     2.1.3 温度对三七多糖提取的影响
  •     2.1.4 接菌量对三七多糖提取的影响
  •   2.2 发酵法提取三七多糖正交试验结果
  •   2.3 对HacaT细胞增殖的影响
  •   2.4 三七多糖处理浓度的确定
  •   2.5 三七多糖添加时间影响
  •     2.5.1 炎症因子类基因(IL-6、IL-8)
  •     2.5.2 造血生长因子(CSF1、CSF2)
  •     2.5.3 趋化因子相关基因CCL20、白细胞募集因子CXCL3
  •     2.5.4 蛋白抗体TNF-AIP3
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘平平,虞旦,王昌涛,赵丹,张佳婵,李萌

    关键词: 三七,发酵,多糖,抗炎,化妆品

    来源: 食品研究与开发 2019年18期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学,一般化学工业,中药学

    单位: 北京工商大学理学院植物资源研究与开发重点实验室,北京工商大学食品营养与人类健康高精尖创新中心

    分类号: TQ920.6;R285

    页码: 71-78+83

    总页数: 9

    文件大小: 730K

    下载量: 479

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