大鼠脂肪干细胞的提取与鉴定

论文摘要

目的:提取大鼠脂肪干细胞并进行成脂、成骨、成内皮诱导分化及鉴定。方法:取大鼠腹股沟周围脂肪组织,使用Ⅰ型胶原酶消化后获得原代脂肪干细胞进行培养;流式细胞术检测脂肪干细胞表面分子标志物;使用成骨、成脂、成内皮诱导液诱导脂肪干细胞向骨细胞、脂肪细胞、血管内皮细胞定向分化,并用相应的染色剂进行鉴定。结果 :脂肪干细胞呈长梭型生长,传代之后形态趋于稳定。流式细胞术检测显示CD29、CD44、CD90表达阳性,CD45表达阴性。成脂诱导分化后油红O染色显示细胞内出现大小不等的橘红色脂滴。成骨诱导后茜素红染色显示橘红色的钙化结节。成内皮诱导后细胞形态呈现"铺路石"样,细胞能吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白并具有分泌一氧化氮能力。结论:大鼠脂肪干细胞易分离培养且具有多向分化的潜能。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 主要试剂
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 大鼠脂肪干细胞的提取
•     1.3.2 脂肪干细胞的传代
•     1.3.3 脂肪干细胞生长曲线绘制
•     1.3.4 脂肪干细胞表面分子标志物的鉴定
•     1.3.5 脂肪干细胞的成脂诱导及其鉴定
•     1.3.6 脂肪干细胞的成骨诱导及其鉴定
•     1.3.7 脂肪干细胞成血管内皮诱导及其鉴定
•     1.3.8 Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白 (dil-acetylated
•     1.3.9 NO含量检测
•     1.3.1 0 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 原代脂肪干细胞形态变化
•   2.2 脂肪干细胞生长曲线
•   2.3 脂肪干细胞成脂鉴定
•   2.4 脂肪干细胞成骨鉴定
•   2.5 脂肪干细胞向血管内皮细胞分化形态学变化
•   2.6 脂肪干细胞成内皮诱导后Dil-Ac-LDL吞噬功能变化
•   2.7 脂肪干细胞成内皮诱导后NO分泌变化
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李志然,马强,马利民

关键词: 脂肪干细胞,分离培养,鉴定,大鼠

来源: 南通大学学报(医学版) 2019年01期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 南通大学附属医院泌尿外科

基金: 国家自然科学基金资助项目(81771571)

分类号: R329.2

DOI: 10.16424/j.cnki.cn32-1807/r.2019.01.004

页码: 14-18

总页数: 5

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