长沙医学院口腔医学院410219
【摘要】目的以小鼠为例，介绍近年来肝硬化模型制作的研究进展。方法选取国内外近十几年来关于肝硬化模型的相关文献，对其进行整理、归纳和分析。结果就目前而言，主要有两大类建模方案：单因素诱导建模与复合因素诱导建模。结论虽然制作肝硬化模型的方法很多，但是符合人们预期的有效方法却较少，因此，要想制作出令人们满意的肝硬化模型，还有很长的路要走。
【关键词】小鼠肝硬化；模型制备；研究进展
【中图分类号】R657.3+1【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）09-005-01
肝硬化（hepaticcirrhosis，HC）是临床常见的慢性进行性肝病，主要由一种或多种疾病因长期或反复作用而形成的弥漫性肝损害。早期可能因为肝脏代偿功能较强从而无明显症状，后期则主要以肝功能损害和门脉高压为主要特征，并有多系统同时损坏，晚期则经常出现上消化道出血、肝性脑病、继发感染、脾功能亢进、腹水、癌变等并发症，并且肝硬化具有极高的死亡率[1]。然而，针对肝硬化者以疾病，目前医学界尚未完全明确其发病机制。为此，建立肝硬化模型，通过模型研究肝硬化的发病机制，进而探索肝硬化的预防与治疗手段已经成为我们亟待解决的问题。
引起肝硬化因素有很多，包括病毒性肝炎、酒精中毒、营养障碍、工业毒物或药物、循环障碍和代谢障碍等等，综上所述，其中最主要的人们可能会因为自身平时的各种不良生活习惯以及恶劣的生活环境，从而引发人们的肝硬化疾病的发生。近年来，针对肝硬化的发病机制的相关研究已经陆续展开，主要是建立在以动物为模型的基础上。但是由于动物与人类之间仍存在巨大差异，我们完全可以想象到，若要完全模拟肝硬化的病理特点制备实验动物模型难度相当大。因此，为深入了解肝硬化的发病机制和特点，本文将以动物中的小鼠为例，综合近十几年来的已有相关研究，对肝硬化模型的制备方法进行整理、归纳和分析，以期为临床研究提供参考和依据。根据近十几年的文献综述，我们总结出了两种主要的肝硬化制作模型，分别是单因素诱导性肝硬化模型和多因素诱导性肝硬化模型，下面我们分别举例说明两种模型。
1单因素诱导性肝硬化模型
1.1四氯化碳（CCl4）诱导性肝硬化模型
以小鼠为例，四氯化碳（CCl4）诱导性肝硬化模型是最传统的制作方法，通常多采用30%-60%CCl4油剂皮下注射的方法，一般小鼠为1-3mL·kg（体重），每周两次[2]。此模型制作周期短（仅需9周），模型成功率高，死亡率低，具有简便、快捷、高效等优点，特别适于大批量制作。
1.2化学致癌物诱导性肝硬化模型
长期使用低剂量致癌物也可能引起肝硬化。化学致癌药物诱发的效果比较稳定，但是由于这些化学致癌物本身的毒性很大、且易挥发，所以制作模型时需格外注意自身安全，必要时尽量隔离。
1.3酒精性肝硬化模型
不良的生活习惯如长期酗酒是引起肝硬化的主要原因之一。针对这一原因，早期相关研究选择使用胃瘘管灌注酒精性液体饲料的方法建立了酒精性肝损伤动物模型，但因为动物的酒精摄取量难以控制，酒精法较少使用。目前的相关研究中大多采用液体食物，通过改变食物成分诱发大鼠肝纤维化的方法[3]。国内目前常用喂养固体饲料的同时每天将一定浓度的酒精定时定量灌胃的方法，制作小鼠肝硬化模型，利用这种方法制作的模型的死亡率低，成功率高。
1.4病毒性肝硬化动物模型
目前，在医学上，对人类危害最大、临床上最为多见的肝脏疾病仍是急、慢性病毒性肝损害，其中乙型肝炎病毒（HBV）尤其严重。如果未及时发现这种病变，不能得到及时、有效的治疗，后果不堪想象。因此，建立HBV的动物模型，是关于肝硬化的医学诊断与治疗的历史上具有纪念意义的重要里程碑，对预防及治疗肝硬化等相关疾病具有非常重要的意义。近几年来，随着科学技术的发展，我们迎来了转基因技术的突破与创新，随着是道德进步与发展，转基因技术逐渐成为我们构建肝硬化模型的重要研究方法。
2复合多因素诱导性肝硬化模型
2.1CCl4复合多因素联合诱导法
CCl4联合多因素诱导的方法能有效提高CCl4单因素法的建模效率，并且能进一步提高模型的稳定性。这种CCl4复合多因素联合诱导法可以根据动物体重及耐受情况调整CCl4的使用剂量，既能够引起持续性肝损伤，又不易导致急性肝功能衰竭，最主要的是这种方法能成功地模拟人在酗酒后的一些生理状态，在建立肝硬化模型的研究方面具有开创性的成果，为此，近年来该方法应用较多。
2.2酒精加铁剂联合诱导法
使用单纯的酒精诱导法建立肝硬化模型时引起并发症的可能性非常大，在这个过程中，加上铁剂就会有不一样的效果。为此，在构建肝硬化模型的过程中，铁剂就发挥了至关重要的作用，铁剂的加入增强了单纯酒精性诱导法因素引发的效应。这种联合诱导建模法不仅缩短了单纯酒精诱导法的建模时间，而且使建立模型的成功率也大大增加。
3讨论与展望
综上所述，虽然制作小鼠肝硬化模型的方法有很多，但是符合人们预期的有效方法却较少，目前上没有发现一种是完全符合人们的预期，能达到人们最终设定目标的一种有效的方法制定出人们最满意、最有效的肝硬化模型。因此，针对目前的相关研究，要想制作出令人们满意的肝硬化模型，还有很长的路要走。
在研究之外，从生活中来看，近年来肝硬化的患者不断增多，而对肝硬化的预防与治疗也已经成为时代的主题。从医学角度来说，预防肝硬化首先应该重视病毒性肝炎的防治。由于肝硬化早期识别比较困难，所以只要一经发现，我们就应当对肝硬化的早期发现和隔离病人给予积极治疗。同时，已有的相关研究显示，肝硬化的发病机制大多是因为人们的日常生活饮食习惯不佳造成的，所以说，我们应该在日常生活中注意饮食，注重生活环境卫生，作息规律，加强身体锻炼。另外，我们应该养成良好的生活习惯，定期进行体检，对于有上述病因而疑有肝硬化者，一经怀疑，应及时进行全面体检及相关实验室检查，争取在代偿期得到合理积极治疗，防止向失代偿期发展。最后，定期体格检查，同时避免各种诱因，及时预防和治疗可能出现的并发症。
4结论
虽然制作肝硬化模型的方法很多，但是符合人们预期的有效方法却较少，因此，要想制作出令人们满意的肝硬化模型，还有很长的路要走。
参考文献：
[1]石亮，&孙蓉.（2016）.肝硬化动物模型的研究进展与中药药效评价思考.中国药物警戒，13（1），32-35.
[2]张贵阳，杨卫平，&陈皓.（2008）.肝硬化动物模型构建的研究进展.外科理论与实践，13（3），266-269.
[3]唐映梅，&杨晋辉.（2000）.肝硬化实验动物的模型建立与研究现状.实用肝脏病杂志，5（3），191-193.
课题基金号：长医教〔2016〕19号课题：《CCl4溶液对肝硬化小鼠模型制备成功率的影响》