基于不等长引物等位特异性PCR的SNP检测方法

论文摘要

为开发一种便捷的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)的检测方法,本研究以水稻的6种SNP变异形式(A/T, A/G, A/C, T/G, T/C, G/C)为研究对象,在下游引物为共用引物的情况下,首先设计两条长度相差20个核苷酸但3’末端分别与SNP两个等位差异碱基配对的常规上游引物。另外我们还评估在两条上游引物3’端的第2位或第3位碱基引入了错配碱基后观察对特异性的影响。结果表明,经3%的琼脂糖凝胶电泳后,不等长引物等位特异性PCR能区分不同的纯合子及杂合子,未引入错配碱基的引物只检测出A/T,C/G变异类型的SNP;而引物中引入错配碱基的等位PCR具有更高的检出效率,能检测出6种类型中的5种SNP。因此,本研究开发了一种成本低、操作简单、准确度高的SNP检测方法。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 SNP位点的筛选及引物设计
•   1.2 未引入错配碱基的引物PCR检测
•   1.3 引入错配碱基的引物PCR检测
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 试验材料
•   3.2 引物设计
•   3.3 聚合酶链式反应扩增
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈露露,黄光元,张丹丹,夏志辉

关键词: 分子标记,不等长引物等位特异性

来源: 分子植物育种 2019年13期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 海南大学热带作物学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室

基金: 海南省自然科学基金(318MS007),抗病转基因水稻新品种培育(2016ZX08001-002)共同资助

分类号: Q943.2

DOI: 10.13271/j.mpb.017.004295

页码: 4295-4301

总页数: 7

文件大小: 483K

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