发菜1,4-α-葡聚糖分支酶（GBE）的基因克隆及其对干旱胁迫的响应

论文摘要

由glgB基因编码的1,4-α-葡聚糖分支酶（GBE）是催化调控α（1-6）糖苷键分支合成的关键酶。本研究从发菜中克隆获得1,4-α-葡聚糖分支酶glgB基因全长2 292 bp （GeenBank登录号:KX679395）,编码763个氨基酸。原核表达得到88.6 kD的glgB基因外源蛋白,MALDI-TOF-TOF/MS质谱分析表明外源蛋白为GBE。发菜glgB与点形念珠藻的glgB序列相似性为94%,氨基酸序列相似性为97%;GBE在第747位的甘氨酸疏水性最强,第168位的组氨酸亲水性最强;Thr有15个磷酸化位点,Tyr有12个磷酸化位点、Ser有27个磷酸化位点;GBE二级结构及三级结构由α螺旋、β折叠、随机卷曲和β转角构成。发菜glgB在干旱胁迫下转录水平的表达量逐渐增加,GBE含量增加,糖原合成酶活性和糖原含量均先增加后降低。研究结果为认识glgB基因信息和发菜响应干旱胁迫的糖原代谢和调控机制提供了依据。

论文目录

• 1 结果与分析
•   1.1 发菜glgB的克隆
•   1.2 发菜glgB的原核表达与产物验证
•   1.3 glgB原核表达产物的质谱分析
•   1.4 发菜glgB基因及编码蛋白序列分析
•   1.5 干旱胁迫下发菜glgB qRT-PCR分析
•   1.6 干旱胁迫下发GBE的表达变化
•   1.7 干旱胁迫下发菜糖原合成酶活性变化
•   1.8 干旱胁迫下发菜糖原含量变化
• 2 讨论
• 3 材料与方法
•   3.1 材料
•   3.2 发菜glgB基因的克隆
•   3.3 发菜glgB基因的原核表达
•   3.4 glgB原核表达产物的质谱分析
•   3.5 序列分析
•   3.6 干旱胁迫下发菜glgB的qRT-PCR
•   3.7 干旱胁迫下发菜GBE的差异表达
•   3.8 干旱胁迫下发菜糖原合成酶活性的测定
•   3.9 干旱胁迫下发菜糖原含量的测定
•   3.1 0 数据处理
• 作者贡献

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李晓旭,丁苗苗,王猛,严奉坤,张筝,梁文裕,徐婷婷,王俊,王玲霞

关键词: 发菜,葡聚糖分支酶,克隆,干旱胁迫,差异表达

来源: 分子植物育种 2019年19期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,园艺

单位: 宁夏大学生命科学学院,宁夏大学农学院,宁夏大学民族预科教育学院

基金: 国家自然科学基金项目(31660114,31660066),宁夏大学引进人才科研项目(BQD2015009)共同资助

分类号: Q945.78;S647

DOI: 10.13271/j.mpb.017.006305

页码: 6305-6313

总页数: 9

文件大小: 2846K

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